泛癌分析HOXA基因簇表达及预后意义

目的探讨HOXA基因簇中各蛋白编码基因和非编码基因在泛癌中的表达及对肿瘤预后评估的作用。方法使用NCBI网站GeneBank数据库分析HOXA基因簇中蛋白编码基因和非编码基因的组成及相互位置关系。应用UCSC数据库phasCons评分分析HOXA基因簇序列的保守性。基于美国阿拉巴马大学伯明翰分校创立的癌症组学数据UALCAN分析网站,评估HOXA基因簇转录的11个HOXA编码基因和6个非编码基因在24种癌症中的表达模式,Kaplan-Meier分析在泛癌中HOXA基因簇中蛋白编码基因和非编码基因表达与肿瘤预后的相关性。结果人HOXA基因簇由11个蛋白编码基因和6个已被注释的非编码基因组成,分别位于染色体7p15.2的DNA负链和正链上。HOXA基因簇各蛋白编码基因进化十分保守,而非编码基因的保守性低于编码基因。24种癌症的差异分析结果显示HOXA基因簇转录的蛋白编码基因及非编码基因在肿瘤组织中的表达与正常对照组织有差异,表达模式具有组织器官特异性。生存分析提示HOXA基因簇中蛋白编码基因和非编码基因低表达有利于肾透明细胞癌、子宫内膜癌、肺腺癌、直肠腺癌、胃腺癌、肾嫌色细胞癌、头颈部鳞状细胞癌、甲状腺癌及肾乳头状细胞癌的预后。结论HOXA基因簇成员可能是泛癌诊断和预后的重要分子生物标志物。

雌/孕激素受体和HOXA-9基因在输卵管和异位妊娠输卵管中的表达

目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HOXA-9基因在人输卵管中的表达及与输卵管妊娠的关系。方法:采用免疫组化和原位杂交方法对34例正常输卵管和38例妊娠输卵管黏膜中ER、PR和HOXA-9基因表达进行研究。结果:ER、PR在正常增生期和分泌期输卵管黏膜上皮中的表达率较高;在妊娠输卵管黏膜上皮中的表达率明显下降(P<0.01)。HOXA-9基因在正常增生期输卵管中的表达率较高,分泌期输卵管中表达降低,而在妊娠输卵管中表达率又有所增高(高于分泌期输卵管的表达率,P<0.05)。结论:ER、PR在输卵管黏膜上皮中的表达下降和HOXA-9基因表达增强与输卵管妊娠密切相关;在正常分泌期输卵管黏膜上皮中,ER、PR表达水平上调和HOXA-9基因表达下调可能起着屏障作用,防止输卵管着床的发生。

种植窗口期人子宫内膜组织中ER、PR及HOXA-11的表达

目的:探讨雌孕激素受体(ER、PR)及同源框基因-11(HOXA-11)在人子宫内膜种植窗口期的表达。方法:采用免疫组化和RT-PCR方法检测ER、PR及HOXA-11在拟行IVF-ET患者排卵后子宫内膜种植窗口期的表达。按IVF-ET后是否妊娠将153例因输卵管因素不孕的患者分为未妊娠组(n=86)和妊娠组(n=67)。结果:免疫组化结果显示PR和HOXA-11在妊娠组腺上皮细胞中的表达均低于未妊娠组(P均<0.001),在间质细胞中的表达均高于未妊娠组(P均<0.001)。RT-PCR结果显示妊娠组子宫内膜ER、PR及HOXA-11 mRNA的相对表达量均高于未妊娠组(P均<0.05)。P水平与腺上皮、间质PR及腺上皮HOXA-11蛋白表达有关(P均<0.05)。结论:种植窗口期内膜腺上皮PR、HOXA-11表达下调和间质细胞PR、HOXA-11表达上调的失败可能是导致子宫内膜容受性下降的原因之一。

不明原因不孕妇女分泌期子宫内膜Hoxa-10mRNA表达意义的研究

目的 :探讨不明原因不孕与子宫内膜Hoxa 10基因表达的关系。方法 :采用核酸原位杂交技术 ,以Hox a 10mRNA寡核苷酸为探针进行检测。结果 :不明原因不孕组分泌早中期子宫内膜上Hoxa 10mRNA表达的灰度阳性单位 (PU)值无显著差异 ;正常生育组分泌中期子宫内膜上Hoxa 10mRNA表达的PU值显著高于分泌早期 ;不孕组分泌中期子宫内膜上Hoxa 10mRNA表达的PU值显著低于同期正常组。结论 :子宫内膜Hoxa 10基因在分泌中期的高表达可能和子宫内膜容受力密切相关 ,其表达缺陷可能是导致不明原因不孕的重要原因之一。

苯乙酸对胶质瘤细胞HOXA1-A4基因mRNA表达的影响

目的观察苯乙酸(PA)诱导分化胶质瘤细胞C6过程中,同源盒基因HoxA1,A2,A3和HoxA4基因mRNA水平表达的变化。方法应用逆转录PCR(RT-PCR)及图像分析法,分组检测原代培养的大鼠星形胶质细胞及应用PA前后胶质瘤细胞C6中HoxA,A2,A3和HoxA4基因mRNA水平表达。结果HoxA1和A4基因在正常大鼠脑组织中弱表达,在胶质瘤C6细胞中存在明显表达;HoxA2基因在正常大鼠脑组织中未见表达,在胶质瘤C6细胞中存在明显表达;HoxA3基因在正常大鼠脑组织和应用PA前后的胶质瘤C6细胞中,均存在明显表达。应用PA处理后,胶质瘤C6细胞中HoxA1、A2基因未见表达,与未用药的C6细胞比较,图象分析显示差异有显著性(P<0.01);应用PA处理后,HoxA3、A4基因明显表达,与未用药的C6细胞比较,图象分析显示差异没有显著性(P>0.05)。结论苯乙酸抑制胶质瘤细胞增殖的作用机理可能与降低胶质瘤细胞HoxA1和HoxA2基因mRNA水平表达有关。

HOXA-11基因与不孕及妊娠失败关系的研究

目的 :研究HOXA 11基因与不孕及妊娠失败的关系。方法 :选择 4 1例不明原因不孕症患者及 30例难免流产患者 ,同时选择 2 8例正常未孕者及 18例正常早期妊娠者分别作为对照组 ,留取子宫内膜或蜕膜组织。子宫内膜标本通过组织学检查分为增生期或分泌期。难免流产及正常妊娠组均妊娠 6～ 9周。采用原位杂交方法检测所有子宫内膜或蜕膜组织中的HOXA 11基因mRNA的表达。结果 :整个月经周期子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞中均有HOXA 11基因mRNA表达 ,并因月经周期不同而有所波动。HOXA 11基因mRNA在分泌中晚期子宫内膜间质细胞中阳性表达率为 10 0 % ,在增生期子宫内膜间质细胞中的阳性表达率为 6 3.6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;在不明原因不孕症患者中HOXA 11基因失去了它在正常子宫内膜表达的周期性变化 ,而且基因表达缺失明显。HOX A 11基因在正常增生期及分泌期子宫内膜腺上皮细胞或间质细胞中的阳性表达率分别为90 .9%、82 .4 %和 6 3.6 %、10 0 % ,在不孕症增生期及分泌期子宫内膜两种细胞的阳性表达率分别为 38.9%、4 7.8%和 2 2 .2 %、39.1% ,两组分别比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;HOXA 11基因在正常早期妊娠蜕膜细胞中持续表达 ,其阳性表达率均为 10 0 % 。

HOXA-10基因影响胚胎着床机制及调节因素

同源框基因属多基因家族的转录调控因子。人类同源框基因分为4个基因簇,其中HOXA-10基因主要表达于子宫,对女性生殖系统的发育、子宫内膜形态的构建、胚胎的发育、子宫容受性的建立、胚胎的定位及粘附等发挥着重要作用。同时受雌、孕激素和白血病抑制因子等多种因素的调控。认清HOXA-10基因影响胚胎着床的作用机制及调控因素,将为避孕、治疗不孕不育及提高体外受精与胚胎移植成功率提供新的思路和方法。

HOXA10基因表达对子宫内膜异位症患者胚胎着床的作用

同源异型盒(HOX)蛋白质是高度保守的转录因子,决定着包括人类在内的许多物种的部分生物性状的表达。HOXA10基因通过调节下游基因及雌激素、孕激素的表达直接影响子宫的胚胎发育和着床。根据体内激素的调控作用,HOXA10基因在子宫内膜上呈周期性表达,其表达高峰发生在植入窗期。HOXA10基因在子宫内膜异位症(EMs)病变中表达对子宫内膜组织的"从头开始"发育过程是必要的。EMs患者的子宫内膜存在影响胚胎着床的诸多不利因素,提示胚胎着床失败可能是EMs患者不孕的主要因素之一。EMs患者通常不会出现HOXA10表达水平在黄体中期上升的现象,可以解释EMs是造成不孕的原因之一。

斑马鱼Hoxa-11a基因克隆及序列分析

用PCR法从斑马鱼基因组DNA中扩增了Hoxa-11a基因的完整编码序列,并将其克隆到PCR-TOPO载体.该基因包括两个外显子,长度分别为622bp和233bp,其间的内含子为726bp,共编码284个氨基酸.它与人、鼠、鸡、爪蟾和矛尾鱼Hoxa-11基因氨基酸序列的同源性分别为50.0%、51.3%、53.3%、56.7%和59.7%.除同源异型盒外,外显子 区和内含子中也存在保守序列.外显子 中丙氨酸同聚物与其两侧富含甘氨酸和丝氨酸亚区的积累是不同动物Hoxa-11基因长度变化的主要因素.

原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达

目的 :探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-1 0基因的表达。方法 :采用原位杂交的方法。结果 :HOXA-1 0基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达 ;中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期 ,且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论 :( 1 ) HOXA-1 0基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。 ( 2 ) HOXA-1 0基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。

矛尾鱼Hoxa-11基因克隆及5'端序列分析(英文)

Ｈｏｘａ－１１基因调节鱼类鳍和四足动物肢的发育，在脊椎动物进化过程中起着重要的作用。利用人和鼠的Ｈｏｘａ－１１基因保守序列设计了两个兼并引物，通过ＰＣＲ扩增到了矛尾鱼的Ｈｏｘａ－１１基因。经克隆和ＤＮＡ序列分析，该片段为２０６５ｂｐ，包括绝大部分外显子 Ⅰ，内含子和部分外显子Ⅱ，编码２０４个氨基酸。其氨基酸序列与人、鼠、鸡、蛙和斑马鱼的同源性分别为６６．０％、６７．６％、７４．４％、７２．８％和５９．７％。外显子Ⅰ的长度从矛尾鱼到蛙、鸡、鼠和人呈现逐步上升趋势，人比矛尾鱼增长了１６％。进一步分析，外显子Ⅰ可分为４个区域：两个高度保守区域，１个中度保守区域和１个可变区域。外显子Ⅰ的长度变化主要是由于可变区域内丙氨酸同聚物以及两侧富含甘氨酸和丝氨酸序列的累积。矛尾鱼只有１个由两个丙氨酸组成的同聚物，蛙有１个由５个连续丙氨酸组成的同聚物，而鸡、鼠和人有３个丙氨酸同聚物，其中最大的同聚物由７个连续丙氨酸组成，而且在同聚物两侧出现了富含甘氨酸和丝氨酸序列。这表明可变区域可能与脊椎动物进化和鳍－肢转换过程中新功能的获得有关。同源异型盒所在的外显子Ⅱ区和剪接位点是高度保守的。内含子的长度变化较大。

热带爪蟾Hoxa11基因克隆及序列的进化分析

H oxa1 1基因是控制脊椎动物肢发育的重要基因 .根据人和鼠 H oxa1 1基因外显子 区和 区的保守序列设计了简并引物 ,采用 PCR法从热带爪蟾基因组 DNA中扩增和克隆到了H oxa1 1基因 ,并测定了核苷酸序列 .克隆的热带爪蟾 H oxa1 1基因片段长 1 598bp,由外显子 、内含子和外显子 三部分组成 ,其中外显子 60 4 bp,外显子 49bp.将该片段的核苷酸序列与人、鼠、斑马鱼 H oxa1 1基因的相应区域进行比较 ,发现该基因的内含子长度存在明显差异 .斑马鱼、热带爪蟾、鼠和人的内含子长度分别为 632 bp,945bp,1 42 1 bp和 1 41 2 bp,随动物进化阶梯的提高而变长 .外显子 区则高度保守 ,都是 49bp,外显子 区在长度上呈现约 1 0 %的变异 .将热带爪蟾 H oxa1 1基因编码的氨基酸序列与人、鼠、斑马鱼进行比较 ,它们之间分别有 67.0 %、66.5%和 46.0 %的同源性 .热带爪蟾与哺乳动物的同源性高于鱼类 ,可能反映了脊椎动物从鳍到肢的进化过程中 ,H oxa1 1基因经历了较多的变异 .

HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用

目的探讨HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)分别检测未孕及早孕小鼠第1、2、3、4、57、d HOXa-10基因表达量的变化规律;同时用可以持续表达HOXa-10的DNA/脂质体复合物质粒和HOXa-10反义寡脱氧核糖核酸分别转染到受孕2d小鼠子宫角内,观察胚泡着床数。结果FQ-PCR结果显示,随着小鼠妊娠天数的增加,HOXa-10基因表达量也逐渐增高,在孕4d达到峰值,孕5d开始下降,孕7d时表达量已接近未孕状态;在用HOXa-10 DNA质粒/脂质体转染孕2d小鼠子宫角后,小鼠的胚泡着床数明显增加;用HOXa-10反义寡脱氧核糖核酸/脂质体转染孕2d小鼠子宫角后,小鼠的胚泡着床数明显减少(P<0.05)。结论在胚泡植入窗口期,子宫内膜HOXa-10基因表达上调,其可能参与了胚泡着床过程。

Hoxa家族基因在白血病中的表达及意义

用流式细胞仪对骨髓细胞进行白血病细胞免疫分型,用RT-PCR方法主要检测了急性白血病样品中Hoxa1-13和Meis1基因的表达.结果表明在所有急性白血病患者中CD45和HLA-DR表达阳性,无T系抗原CD3表达,髓系抗原CD33和CD13阳性比例高(76%),B系抗原CD19阳性率为47%,而CD10和CD20阳性率为24%~29%.在急性白血病中Hoxa9和Meis1表达正相关,Hoxa6和Hoxa2表达大多呈现正相关,Hoxa1和Hoxa3在大多数样品中表达负相关.Hoxa3只在CD19阴性CD7阳性的急性白血病样品中表达.结果提示在急性白血病中Hoxa家族基因的表达异常,具有一定的表达相关性,并且免疫表型具有异质性,免疫抗原与Hoxa基因存在着一定的联系.

Hoxa-10在人月经周期分泌中期子宫内膜腺上皮表达下降

目的 :对同源异型框基因 Hoxa-1 0在月经周期各阶段人子宫内膜的表达形式进行观察。方法 :通过原位杂交方法测定了 5例增殖期、9例分泌期的人子宫内膜 Hoxa-1 0的表达。结果 :Hoxa-1 0基因在人子宫内膜均有表达。但在各周期阶段 ,其表达的强度和部位却有所不同。首次发现 Hoxa-1 0在对应于着床期的分泌中期以及分泌晚期子宫内膜腺上皮的表达明显降低或不表达。结论 :Hoxa-1 0在人类着床过程中可能具有重要功能。

沉默HOXA10基因表达联合川芎嗪可逆转K562/ADR细胞的多药耐药性

目的 :研究靶向沉默人慢性髓系白血病耐多柔比星(adriamycin,ADR)细胞株K562/ADR中同源盒A10(homebox A10,HOXA10)基因表达后联合川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对逆转K562/ADR细胞多药耐药性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用脂质体法将构建有靶向HOXA10基因的sh RNA重组表达载体p GPHI/GFP/Neo-HOXA10-sh RNA稳定转入K562/ADR细胞中,分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测对HOXA10 m RNA和蛋白表达的影响。实验分为6组:空白对照组、阴性对照-sh RNA(negative controlsh RNA,NC-sh RNA)组、HOXA10-sh RNA组、TMP单药组、NCsh RNA+TMP(2μg/m L)组和HOXA10-sh RNA+TMP(2μg/m L)组。采用MTT法检测各组细胞的逆转耐药倍数。FCM法检测细胞内ADR平均荧光强度的变化;蛋白质印迹法检测细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)的表达。结果:p GPHI/GFP/Neo-HOXA10-sh RNA表达载体能有效抑制K562/ADR细胞中HOXA10 m RNA及蛋白的表达。HOXA10-sh RNA+TMP(2μg/m L)组K562/ADR细胞对ADR的逆转耐药倍数为5.08倍,均较HOXA10-sh RNA组和TMP单药组提高(P值均<0.05);细胞内ADR的平均荧光强度均较HOXA10-shR NA组和TMP单药组提高(P值均<0.05);P-gp和MRP1的表达水平均较HOXA10-shR NA组和TMP单药组明显下调(P值均<0.05)。结论 :靶向沉默HOXA10基因表达联合TMP能逆转K562/ADR细胞的多药耐药,两者间有协同作用,可为临床逆转白血病多药耐药提供重要的实验依据。

脐血造血干祖细胞增殖过程中人类巨细胞病毒感染对hoxa9、hoxa10基因表达影响的研究

目的在基因水平探讨人类巨细胞病毒(HCMV)感染导致脐血CFU-G损伤的机制,探讨人类脐血造血干细胞(HSC)向粒系祖细胞(CFU-G)增殖过程中hoxa9、hoxa10基因表达的情况。方法从2006年5月至2007年10月收集12例正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血,采用造血干细胞体外培养技术及荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法,以HCMV-AD169和(或)全反式维甲酸(ATRA)持续干扰HSC,观察正常对照组、ATRA组、HCMV-AD169组、ATRA+HCMV组的造血干祖细胞经人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导后,在增殖分化过程中第3、7和12天检测CFU-Ghoxa9、hoxa10基因表达情况。结果各组hoxa9、hoxa10基因均在CFU-G增殖分化的第7天表达量最高(P<0.01),第12天表达量明显减弱(P<0.01),与正常对照组比较,CFU-Ghoxa9、hoxa10基因表达受ATRA(6×10-8mol/L)上调,而受HCMV下调(P<0.01),与HCMV组比较,ATRA可上调HCMV感染的CFU-Ghoxa9、hoxa10基因的表达。结论 CFU-G的增殖分化与hoxa9、hoxa10基因的表达相关。HCMV可能通过调控hoxa9、hoxa10基因表达异常引起造血功能异常,ATRA不仅能显著上调正常CFU-Ghoxa9、hoxa10基因的表达,而且能上调HCMV感染的CFU-Ghoxa9、hoxa10基因的表达。

先天性马蹄内翻足与HoxA基因传递不平衡研究

目的探讨先天性马蹄内翻足（CCF）与HoxA基因是否存在相关性。方法在胚胎发育调控相关的HoxA基因染色体区域7p14—15内选择微卫星DNA标记D7S516和D7S1808，应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对54个CCF核心家系的162名成员进行基因型分析，并进行传递不平衡检验（TDT）。结果在D7S516位点上共检测到7个等位基因，TDT结果显示CCF与D7S516位点存在传递不平衡（X^2=20.3864，P〈0.01）。D7S1808位点上共检测到7个等位基因，但TDT结果显示CCF与D7S1808位点不存在传递不平衡（X^2=11．3196，P〉0.05）。结论人类CCF与HoxA基因有相关性，HoxA基因可能是CCF的另一个易感基因。

RNA干扰靶向白血病HOXA基因的研究进展

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是指经双链RNA特异性转录后,引起同源靶基因沉默,从而阻断靶基因表达[1]。白血病是造血干细胞（hema-topoietic stem progenitor cells,HSPC）恶性增殖性疾病,其发生与HSPC的增殖失控、分化受阻、凋亡等相关。

不同卵巢癌HOXA-10和PTEN及p53的特异性表达差异及意义

目的比较透明细胞癌合并子宫内膜异位症，卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症，为临床特殊合并症的诊断及治疗提供依据。方法选取2010—12—2014—12患者共i00例，应用免疫组化技术检测各组PTNE、HOXA-10和p53的表达情况。结果PTEN在正常妇女、单纯子宫内膜异位症、卵巢透明细胞癌和透明细胞癌合并子宫内膜异位症患者及卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症中的表达逐渐降低。结论PTEN突变与表达缺失与卵巢癌发生发展有关，PTEN蛋白低表达和卵巢癌的侵袭、转移有关。