HOXA-11基因与女性生殖调节的研究

检测41例不明原因不孕患者(不孕组)及28例正常未孕者(对照组)子宫内膜组织中HOXA-11基因mRNA及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)蛋白的表达,并通过组织学区分子宫内膜标本期别。结果不孕组中晚分泌期子宫内膜间质细胞中HOXA-11基因阳性表达率明显高于增生期,P<0.05;HOXA-11基因在增生期及分泌期上皮细胞、间质细胞中表达率均明显高于不孕组,P均<0.05。对照组分泌期子宫内膜腺上皮细胞中ER、PR阳性表达率明显低于间质细胞,P<0.05;ER、PR在正常增生期子宫内膜腺上皮细胞中阳性表达率明显高于分泌期,P<0.05。ER、PR在不孕组增生期子宫内膜上皮细胞及间质细胞中阳性表达率明显高于正常组,P均<0.05;分泌期不孕组子宫内膜间质细胞ER、PR阳性表达率明显低于对照组,P均<0.05。提示HOXA-11基因在子宫内膜的表达呈周期性变化,且与子宫内膜“着床窗”期一致,其在子宫内膜表达异常可能是女性不孕原因之一;HOXA-11基因对子宫内膜的作用通过ER、PR调节。

HOXA-11基因与不孕及妊娠失败关系的研究

目的 :研究HOXA 11基因与不孕及妊娠失败的关系。方法 :选择 4 1例不明原因不孕症患者及 30例难免流产患者 ,同时选择 2 8例正常未孕者及 18例正常早期妊娠者分别作为对照组 ,留取子宫内膜或蜕膜组织。子宫内膜标本通过组织学检查分为增生期或分泌期。难免流产及正常妊娠组均妊娠 6～ 9周。采用原位杂交方法检测所有子宫内膜或蜕膜组织中的HOXA 11基因mRNA的表达。结果 :整个月经周期子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞中均有HOXA 11基因mRNA表达 ,并因月经周期不同而有所波动。HOXA 11基因mRNA在分泌中晚期子宫内膜间质细胞中阳性表达率为 10 0 % ,在增生期子宫内膜间质细胞中的阳性表达率为 6 3.6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;在不明原因不孕症患者中HOXA 11基因失去了它在正常子宫内膜表达的周期性变化 ,而且基因表达缺失明显。HOX A 11基因在正常增生期及分泌期子宫内膜腺上皮细胞或间质细胞中的阳性表达率分别为90 .9%、82 .4 %和 6 3.6 %、10 0 % ,在不孕症增生期及分泌期子宫内膜两种细胞的阳性表达率分别为 38.9%、4 7.8%和 2 2 .2 %、39.1% ,两组分别比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;HOXA 11基因在正常早期妊娠蜕膜细胞中持续表达 ,其阳性表达率均为 10 0 % 。

矛尾鱼Hoxa-11基因克隆及5'端序列分析(英文)

Ｈｏｘａ－１１基因调节鱼类鳍和四足动物肢的发育，在脊椎动物进化过程中起着重要的作用。利用人和鼠的Ｈｏｘａ－１１基因保守序列设计了两个兼并引物，通过ＰＣＲ扩增到了矛尾鱼的Ｈｏｘａ－１１基因。经克隆和ＤＮＡ序列分析，该片段为２０６５ｂｐ，包括绝大部分外显子 Ⅰ，内含子和部分外显子Ⅱ，编码２０４个氨基酸。其氨基酸序列与人、鼠、鸡、蛙和斑马鱼的同源性分别为６６．０％、６７．６％、７４．４％、７２．８％和５９．７％。外显子Ⅰ的长度从矛尾鱼到蛙、鸡、鼠和人呈现逐步上升趋势，人比矛尾鱼增长了１６％。进一步分析，外显子Ⅰ可分为４个区域：两个高度保守区域，１个中度保守区域和１个可变区域。外显子Ⅰ的长度变化主要是由于可变区域内丙氨酸同聚物以及两侧富含甘氨酸和丝氨酸序列的累积。矛尾鱼只有１个由两个丙氨酸组成的同聚物，蛙有１个由５个连续丙氨酸组成的同聚物，而鸡、鼠和人有３个丙氨酸同聚物，其中最大的同聚物由７个连续丙氨酸组成，而且在同聚物两侧出现了富含甘氨酸和丝氨酸序列。这表明可变区域可能与脊椎动物进化和鳍－肢转换过程中新功能的获得有关。同源异型盒所在的外显子Ⅱ区和剪接位点是高度保守的。内含子的长度变化较大。

两种鱼类Hoxa-11基因片段克隆及5'端序列分析

为了分析脊椎动物从鳍到肢转变过程中基因的系统进化,采用PCR法克隆了斑马鱼和矛尾鱼的Hoxa-11基因片段,测序并进行序列分析.结果显示同源异型盒所在的外显子 区和剪接位点是高度保守的,外显子 区又可分为四个亚区:中度保守区、可变区和两个高度保守区.从鱼到四足动物,Hoxa-11基因的主要变化是可变区的长度梯增且出现富含丙氨酸的区域.此外,在内含子中也发现了两个高度保守的DNA序列,其长度分别为35bp和16bp.

斑马鱼Hoxa-11a基因克隆及序列分析

用PCR法从斑马鱼基因组DNA中扩增了Hoxa-11a基因的完整编码序列,并将其克隆到PCR-TOPO载体.该基因包括两个外显子,长度分别为622bp和233bp,其间的内含子为726bp,共编码284个氨基酸.它与人、鼠、鸡、爪蟾和矛尾鱼Hoxa-11基因氨基酸序列的同源性分别为50.0%、51.3%、53.3%、56.7%和59.7%.除同源异型盒外,外显子 区和内含子中也存在保守序列.外显子 中丙氨酸同聚物与其两侧富含甘氨酸和丝氨酸亚区的积累是不同动物Hoxa-11基因长度变化的主要因素.

斑马鱼Hoxa-11a基因克隆及序列分析的研究

浙江大学生物技术系薛良义和林凯先对斑马鱼基因组DNA进行研究。他们用PCR法从斑马鱼基因组DNA中扩增了HoXa-11a基因的完整编码序列，并将其克隆到PCR—ToPo载体，该基因包括两个外显子，其长度分别为622bp和233bp，其间的内含子为726bp，可共编码为284个氨基酸，它与人、鼠、鸡、爪蟾和矛尾鱼HoXa-11基因氨基酸序列的同源性分别为50．0％、51．3％、53．3％、56．7％和59．7％除同源异型盒外，

种植窗口期人子宫内膜组织中ER、PR及HOXA-11的表达

目的:探讨雌孕激素受体(ER、PR)及同源框基因-11(HOXA-11)在人子宫内膜种植窗口期的表达。方法:采用免疫组化和RT-PCR方法检测ER、PR及HOXA-11在拟行IVF-ET患者排卵后子宫内膜种植窗口期的表达。按IVF-ET后是否妊娠将153例因输卵管因素不孕的患者分为未妊娠组(n=86)和妊娠组(n=67)。结果:免疫组化结果显示PR和HOXA-11在妊娠组腺上皮细胞中的表达均低于未妊娠组(P均<0.001),在间质细胞中的表达均高于未妊娠组(P均<0.001)。RT-PCR结果显示妊娠组子宫内膜ER、PR及HOXA-11 mRNA的相对表达量均高于未妊娠组(P均<0.05)。P水平与腺上皮、间质PR及腺上皮HOXA-11蛋白表达有关(P均<0.05)。结论:种植窗口期内膜腺上皮PR、HOXA-11表达下调和间质细胞PR、HOXA-11表达上调的失败可能是导致子宫内膜容受性下降的原因之一。