鸡HOXC10基因多态性与背羽性状的关联性研究

试验旨在研究HOXC10基因多态性与清远麻鸡背羽性状的关联性,为适宜优质肉鸡的品种选育提供理论资料。试验以208只清远麻鸡作为研究对象,测定其99日龄时背羽的性状指标,包括背羽长度、重量、羽根长度和羽根直径,利用直接测序法检测HOXC基因第二内含子的单核苷酸多态性(SNP)。结果显示:共筛选出6个SNPs,分别为SNP1(g.865129G>C)、SNP2(g.865204G>T)、SNP3(g.865226C>T)、SNP4(g.866122T>A)、SNP5(g.826133A>G)、SNP6(g.866270C>T)。将不同位点SNPs的基因型与背羽性状进行关联分析发现,SNP1与背羽羽根长度极显著相关(P<0.01),SNP2与背羽羽根长度显著相关(P<0.05),SNP3与背羽羽根直径极显著相关(P<0.01)。研究表明,清远麻鸡HOXC10基因的单核苷酸多态性对背羽性状有显著相关性,可作为鸡背羽性状选育的分子标记。

胃癌组织中HOXC10表达与临床病理特征及预后关系的研究

目的探讨胃癌组织中HOXC10表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。方法采用荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测20对胃癌组织及相应癌旁组织和264例患者胃癌病理切片中HOXC10的表达水平,采用χ^2检验分析胃癌组织中HOXC10的表达水平与患者临床病理特征的关系。采用单因素、多因素Cox回归分析评估HOXC10表达水平与无复发生存期(RFS)、总生存期(OS)的关系。用二元Logistic回归分析建立预测患者5年内复发或死亡风险的模型。结果与HOXC10高表达组相比,HOXC10低表达组的RFS和OS更长(P<0.05),病理分化程度更好(P=0.001),淋巴结转移更少(P=0.001),TNM分期更早(P=0.001)。单因素Cox回归分析显示,病理分级、Lauren分型、TNM分期、T分期、N分期及HOXC10表达水平均与RFS及OS显著相关(P<0.05);多因素Cox回归分析显示,病理分级、Lauren分型、TNM分期、T分期、N分期及HOXC10表达水平均与RFS及OS显著相关(P<0.05)。基于传统临床病理特征参数的Logistic回归模型与基于HOXC10参数的Logistic回归模型对胃癌患者术后5年内复发或死亡风险的预测效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论HOXC10低表达的胃癌患者的Lauren分型以肠型为主,分化程度较好,TNM分期较早,淋巴结转移较少,预后较好。HOXC10可作为胃癌患者预后的预测指标。在淋巴结转移情况不明时,以HOXC10为参数的Logistic回归模型可辅助预测预后。

京海黄鸡中HOXC10基因表达规律及其生物信息学分析

同源异型盒基因（homeobox genes,HOX）是在酵母乃至人类等几乎所有的真核细胞中均表达的一类基因。为了探究HOXC10基因表达规律及其生物信息学,采用qRT-PCR方法研究HOXC10基因在8周龄京海黄鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸肌、腿肌、下丘脑和卵巢组织中的表达规律,检测其在300日龄高、低产组卵巢组织的表达差异,并通过多种在线软件对原鸡HOXC10基因进行生物信息学分析。结果显示,HOXC10基因在京海黄鸡腿肌中表达丰度极显著高于其他组织（P〈0.01）,且300日龄高产组中HOXC10基因表达丰度显著低于低产组（P〈0.05）。原鸡HOXC10基因序列与火鸡、野鸽、绿头鸭、人、小鼠、牛、猪、山羊及非洲爪蟾的同源性分别为77.4%、94.8%、98.6%、68.3%、67.9%、66.0%、59.0%、68.1%和79.4%;HOXC10基因共编码354个氨基酸,其中丝氨酸的含量最高,潜在的磷酸化位点有24个,在280~342的氨基酸序列内存在一个同源结构域,蛋白质亚细胞主要定位在细胞核中,且不包含跨膜结构。HOXC10基因在京海黄鸡生长和繁殖的基因调控网络中发挥了重要作用。

HOXC10通过靶向调控CST1的表达对肺癌细胞干细胞样特性的作用研究

目的:探究HOXC10通过靶向调控CST1的表达对肺癌细胞干细胞样特性的作用。方法:肺癌细胞系A549在无血清培养条件下形成肿瘤球,WB分别检测HOXC10及干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达。构建ShNC、ShHOXC10 A549细胞,检测干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达,肿瘤成球实验检测细胞自我更新能力,CCK8法检测细胞增殖能力。构建ShNC、ShHOXC10肺癌小鼠皮下瘤模型,测定肿瘤体积和重量,免疫组织化学法检测HOXC10、CST1和干性蛋白标志蛋白CD44、CD133在肿瘤组织中的表达。qPCR和WB法检测ShNC、ShHOXC10组A549细胞中CST1 mRNA和蛋白表达,ChIP-PCR和ChIP-qPCR检测HOXC10和CST1启动子序列结合,双荧光素酶报告基因验证HOXC10对CST1启动子活性的调控。在ShHOXC10细胞中回补pcDNA3.1-CST1,检测CST1过表达对干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4表达及肿瘤成球和细胞增殖的影响。结果:HOXC10在A549细胞肿瘤球中高表达,敲低HOXC10显著抑制干性蛋白标志CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达,抑制A549细胞的增殖和肿瘤成球能力,皮下瘤实验显示,敲低HOXC10抑制A549细胞的成瘤能力(P<0.001),肿瘤重量(P<0.0001)和体积(P<0.01)显著降低。HOXC10直接结合CST1上游启动子序列,敲低HOXC10抑制CST1的mRNA及蛋白表达水平,显著抑制CST1启动子活性(P<0.01)。在ShHOXC10细胞中过表达CST1显著上调干性蛋白标志CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达,增强A549细胞的增殖和肿瘤成球能力。结论:在肺癌细胞中HOXC10通过CST1调控肺癌细胞干细胞样特性。

HOXC10在人脑胶质瘤中的表达及其与病人预后的关系

目的探讨同源框C10(HOXC10)在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病人预后的关系。方法选取2013年6月至2018年4月手术切除的胶质瘤组织106例和2018年4月至2019年6月颅脑损伤内减压术中切除的正常脑组织30例,SP法免疫组织化学染色检测HOXC10的表达水平。Cox比例回归风险模型分析总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的影响因素。生存曲线分析HOXC10表达水平与OS和PFS的关系。结果高级别胶质瘤组织HOXC10表达水平明显高于低级别胶质瘤组织(P<0.001),而低级别胶质瘤组织又明显高于正常脑组织(P<0.001)。多因素Cox比例回归风险模型分析显示,WHO分级Ⅲ~Ⅳ级、术后未化疗和HOXC10高表达是胶质瘤病人OS和PFS较短的独立影响因素(P<0.05)。HOXC10高表达组病人中位OS为38个月(四分位间距28~42个月),中位PFS为26个月(四分位间距22~45个月);HOXC10低表达组中位OS为47个月(四分位间距36~54个月),中位PFS为48个月(四分位间距44~53个月)。HOXC10低表达组OS和PFS均明显高于高表达组(P<0.05)。结论人脑胶质瘤组织HOXC10表达水平明显增高,与不良生存预后和肿瘤进展有关。

HOXC10对胃癌细胞增殖和转移的调控作用及其机制研究

目的观察H OXC10对胃癌细胞增殖和转移的调节作用。方法采用RT-PCR方法检测人胃癌组织及癌旁正常组织中HOXC10的mRNA水平,同时检测胃癌细胞株BGG823.SGC7901细胞和正常胃黏膜细胞株GES-1细胞中HOXClOmRNA和蛋白的表达。将胃癌BGC823细胞分别进行HOXCIO siRNA、阴性对照siRNA转染,并采用CCK-8法观察各组细胞增殖能力,采用细胞克隆形成检测各组细胞的克隆形成能力,采用transweU小室实验观察各组细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹法实验检测上皮间质表型蛋白的表达。采用裸鼠皮下移植瘤和肺转移模型评价HOXCIO对BGC823肿瘤生长和肺转移能力的影响。结果人胃癌组织中HOXC10的表达水平高于癌旁正常组织(PV0.05);BGC823.SGC7901细胞HOXCIO表达水平均高于GES-1细胞(P<0.05)oBGC823细胞HOXCIO siRNA组的细胞增殖能力,克隆形成能力和侵袭能力均显著低于siRNA对照序列组(均P<0.05);与NC siRNA组相比,HOXCIO siRNA组的间质表型蛋白波形蛋白(vimentin)和转移相关分子MMP-9的mRNA和蛋白均显著下调,而上皮表型蛋白上皮钙黏素的mRNA和蛋白均显著上调。HOXCIO过表达引起的细胞功能、mRNA和蛋白的变化与HOXCIO siRNA相反。HOXCIO siRNA能显著抑制BGC823细胞裸鼠移植瘤的生长和肺转移灶的形成。结论HOXCIO是人胃癌中潜在的诊断和预后生物标志物或治疗靶点。

兔抗多疣壁虎Hoxc10抗血清的制备及鉴定

目的:制备兔抗多疣壁虎Hoxc10抗血清并进行特性鉴定。方法:构建pGEX-4T1-g-Hoxc10质粒,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-g-Hoxc10蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备Hoxc10抗血清。用Western blot和免疫组化染色法检测Hoxc10抗血清的特性。结果:构建的多疣壁虎Hoxc10基因的原核表达质粒pGEX-4T1-g-Hoxc10,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的Hoxc10融合蛋白,以其免疫大白兔获得较高效价的Hoxc10抗血清。Western blot及免疫组化染色法检测显示,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:利用原核表达的多疣壁虎GST-g-Hoxc10融合蛋白制备的Hoxc10抗血清效价高,特异性良好,为进一步深入研究Hoxc10的功能提供了重要的制剂。

金川多肋牦牛HOXC10基因的克隆、序列分析及组织表达

旨在克隆牦牛HOXC10基因,并进一步分析该基因的结构与功能以及揭示其组织特异性表达规律。以金川多肋牦牛为材料,根据GenBank已公布的绵羊HOXC10基因序列设计引物,采用RT-PCR技术对HOXC10基因的cDNA全长进行扩增,并对其进行生物信息学分析及在各组织中的表达谱。对测序结果进行生物信息学分析表明,扩增的牦牛HOXC10基因长度是1 272bp,其中包含一个1 029 bp的开放阅读框,共编码342个氨基酸;同源性分析表明,牦牛与黄牛的相似性较高,为93.2%;预测HOXC10蛋白质的分子量为38.2 kD,理论等电点为8.45;进化树分析显示,牦牛与黄牛的亲缘关系最近,处于同一个分支上;组织表达谱分析表明,该基因在牦牛各组织中均有不同程度的表达,其中在肝脏中的表达量最高,胃中的表达量最低。

HoxC10与胃癌的研究进展

同源盒(Homeobox,Hox)基因在基因组水平上高度保守,在调控细胞凋亡、受体信号转导、分化、运动、血管生成和转移等众多过程中发挥重要作用。研究发现HoxC10与口腔鳞状细胞癌、宫颈癌、甲状腺癌、胰腺癌、结直肠癌、肺癌等肿瘤的发生发展、转移及预后密切相关,因此HoxC10逐渐成为相关肿瘤的研究热点。胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,目前研究发现HoxC10与胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移相关,涉及MAPK途径、NF-κB途径和上调促炎因子水平等。未来研究需要进一步阐明HoxC10在胃癌发生中的具体作用机制及其临床意义,为胃癌的治疗提供新的靶点。

HOXC10基因对体外人牙髓干细胞增殖和成脂分化的调控作用机制研究

目的:探讨HOXC10基因对体外人牙髓干细胞增殖和成脂分化的调控作用及其分子机制。方法:原代分离培养人牙髓干细胞,分别将si-HOXC10、si-con转染至人牙髓干细胞,分别记作si-HOXC10组、si-con组,未经转染的人牙髓干细胞记作NC组,同时将人牙髓干细胞进行成脂诱导。q PCR与Western blotting分别检测HOXC10 mRNA及蛋白表达量;采用Western blotting检测成脂诱导后细胞中过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)、重组人CCAAT增强子结合蛋白-α(C/EBP-α)蛋白水平。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移能力;采用酶标仪检测细胞的黏附能力;Western blotting检测沉默HOXC10对PPARγ、C/EBP-α、WNT通路相关蛋白糖原合成酶激酶-3(GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。结果:与培养前相比,成脂分化诱导后人牙髓干细胞中HOXC10 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PPARγ、C/EBP-α的表达水平显著降低(P<0.05);与si-con组相比,si-HOXC10组人牙髓干细胞活性显著降低(P<0.05);相较于si-con组,si-HOXC10组人牙髓干细胞迁移细胞数显著增多(P<0.05),细胞黏附能力显著升高(P<0.05);与si-con组相比,siHOXC10组人牙髓干细胞中PPARγ、C/EBP-α的表达水平显著降低(P<0.05);与si-con组相比,si-HOXC10组人牙髓干细胞WNT通路中GSK3β蛋白水平显著降低(P<0.05),β-catenin蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:沉默HOXC10基因可抑制人牙髓干细胞增殖及成脂分化,其作用机制可能是通过激活WNT通路而发挥作用。

胃癌组织中HOXC10表达与临床病理特征的关系分析

目的分析胃癌组织中HOXC10表达与临床病理特征的关系。方法选取2019年1月至2022年12月厦门大学附属中山医院收治的80例胃癌患者,根据HOXC10mRNA水平将其分为低表达组(n=33)与高表达组(n=47)。收集并比较不同HOXC10表达胃癌患者的一般资料,分析胃癌组织中HOXC10表达与临床病理特征的相关性。结果不同HOXC10表达胃癌患者的性别、年龄比较无统计学差异(P>0.05),而胃癌病理分级、TNM分期、Lauren分型、T分期以及N分期比较有统计学差异(P<0.05)。进一步经Logistic回归分析结果显示,胃癌病理分级、TNM分期、Lauren分型、T分期、N分期是影响胃癌组织中HOXC10表达的独立因素(P<0.05)。结论胃癌组织中HOXC10表达与临床病理特征关系密切,且胃癌病理分级、TNM分期、Lauren分型、T分期、N分期是影响胃癌组织中HOXC10表达的独立因素。

HOXC10高表达与鼻咽癌患者预后的相关性分析

目的:探讨HOXC10在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌患者预后的相关性。方法:采用荧光定量PCR及免疫组织化学的方法对124例无转移的鼻咽癌患者组织中HOXC10 mRNA及蛋白水平表达进行检测。用Chisquare检验对HOXC10的表达与鼻咽癌患者临床病理资料间的相关性进行分析。并采用Kaplan-Meier对HOXC10表达水平与鼻咽癌患者生存率包括疾病特异性生存率(DSS),无转移生存率(MeFS),局部无复发生存率(LRFS)间的相关性进行分析。结果:在鼻咽癌组织中HOXC10表达上调,而HOXC10的高表达与鼻咽癌患者的肿瘤分期(P=0.021)及淋巴结转移(P<0.001)显著相关。单变量分析发现,就DSS(P=0.007)和MeFS(P=0.004 2)而言,HOXC10高表达与鼻咽癌患者差的预后呈正向关。多变量分析发现,HOXC10高表达在预测DSS(P=0.018,风险比=1.988)和MeFS(P=0.026,风险比=1.899)方面仍然是一个独立的预后因子,并且DSS(P=0.026)、MeFS(P=0.033)和LRFS(P=0.014)与鼻咽癌患者的肿瘤分期存在明显的相关性。结论:HOXC10在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌患者预后存在密切相关性,可能作为鼻咽癌患者预后的一个的生物标志物。

LncRNA-00311通过下调HOXC10抑制口腔鳞癌侵袭和转移

目的:探讨LncRNA-00311与HOXC10信号通路的关系及其对口腔鳞癌侵袭转移的影响。方法:以HaCaT细胞和4种人口腔鳞癌细胞株(HN4、Cal27、HN30、HN6)为细胞模型,LncRNA-00311过表达病毒感染肿瘤细胞后,用RT-PCR、蛋白质印迹法等检查相关基因及蛋白表达情况,同时采用划痕实验检测肿瘤细胞侵袭迁移能力的变化。结果:LncRNA-00311过表达的HN6细胞的迁移能力显著降低,同时HOXC10的基因及蛋白表达显著下降,E-cadherin蛋白表达显著上调,N-cadherin和Vinmentin显著下调。结论:LncRNA-00311可能通过降低HOXC10表达,抑制HOXC10信号通路,进而抑制EMT,从而降低口腔鳞癌侵袭和转移。

幽门螺杆菌通过上调HOXC10介导胃癌细胞增殖转移和顺铂耐药

目的探讨HOXC10在胃癌中的作用及其与幽门螺杆菌(H.Pylori)感染的关系。方法mRNA芯片筛选H.Pylori感染胃上皮腺癌细胞系AGS的上调基因,并通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)验证HOXC10的表达差异。免疫组织化学检测H.Pylori感染对胃癌组织HOXC10表达的影响,并在GEO数据集中分析HOXC10与胃癌预后的关系。HOXC10小干扰RNA(siRNA)转染AGS细胞转染后,流式细胞术、细胞计数试剂盒(CCK-8)、Tanswell和成球实验评估H.Pylori对胃癌细胞凋亡、周期、增殖、侵袭、迁移和干性的影响。通过Kaplan-Meier方法及Log-rank(Mantel-Cox)生存期检验进行生存分析。两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析并用Neuman-Keuls检验进行两组间比较。结果H.Pylori感染AGS细胞后mRNA芯片分析表明HOXC10表达显著上调,并且在胃癌细胞和临床组织中采用RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学法也进一步证明H.Pylori感染可导致HOXC10表达上调(t=12.480、3.916,P<0.01)。此外,GEO数据集(GSE19188和GSE31210)分析显示HOXC10高表达与胃癌患者不良预后相关。siRNA沉默HOXC10表达能明显阻断H.Pylori感染对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的促进作用(t=8.818、15.920,P<0.01);并逆转H.Pylori感染对AGS细胞顺铂耐药性的增强作用[半数抑制浓度(IC50):1.550 mg/L比5.442 mg/L,t=1.342,P<0.01]。成球实验和周期分析结果表明沉默HOXC10表达能显著抑制H.Pylori诱导形成的胃癌干细胞并导致S期阻滞(t=7.528,P<0.01),进而降低H.Pylori介导的胃癌细胞顺铂耐药。结论H.Pylori可通过上调HOXC10促进胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,并抑制S期阻滞,导致胃癌细胞顺铂耐药。

肺腺癌细胞三维培养对HOXC10基因表达水平的影响

目的建立肺腺癌A549细胞株三维培养模型,观察和比较二维和三维不同培养条件下肺腺癌细胞的形态、增殖以及HOXC10表达水平的变化。方法二维和三维培养肺腺癌细胞,采用倒置显微镜观察肺腺癌细胞的生长情况,通过CCK8实验检测细胞增殖情况,Real time-PCR和Western blot方法检测HOXC10 mRNA和蛋白表达水平。结果二维单层培养的肺腺癌A549细胞贴壁生长,癌细胞呈梭形。三维细胞培养后,肺腺癌细胞聚集成紧密的多肿瘤细胞微球。HOXC10基因mRNA和蛋白质表达水平在A549细胞三维培养显著高于二维培养。结论HOXC10基因表达在肺腺癌A549细胞三维培养体系显著升高,可能与肿瘤微环境的作用密切相关。