短小棒状杆菌CpG-DNA提取方法的研究

目的:建立一种高效纯化CP-CpG-DNA的方法,为研究DNA免疫增强佐剂功能奠定基础。方法:应用经超声破碎、蛋白酶K消化、CTAB沉淀及酚、氯仿抽提等步骤从短棒杆菌(Corynebacterium parvum,CP)中提取基因组DNA(CP-CpG-DNA)。结果:琼脂糖凝胶电泳检测,CP-CpG-DNA主要集中在2.3Mb;CP-CpG-DNA经限制性内切酶HpaII酶切后,琼脂糖凝胶电泳检测,得到小于1000bp的片断。结论:建立的高效纯化CP-CpG-DNA方法,获得的CP-CpG-DNA纯度较好,而且CP-CpG-DNA中存在大量非甲基化CpG位点,可用于DNA免疫增强佐剂的应用。