肝素酶siRNA联合亚砷酸抑制胰腺癌侵袭性的实验研究

目的:观察Hpa小干扰RNA(small-interfering RNA,siRNA)联合亚砷酸对胰腺癌侵袭力的影响,为Hpa-siRNA联合亚砷酸治疗胰腺癌提供实验依据。方法:将3条Hpa干扰靶序列Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA稀释退火,分别与线性化pGenesil-1.1质粒表达载体的连接制成pGenesil1.1/Hpa1-siRNA、pGen-esil1.1/Hpa2-siRNA、pGenesil1.1/Hpa3-siRNA等重组质粒。然后将上述目的基因转染SW1990胰腺癌细胞,并设空白对照和阴性对照组。RT-PCR检测转染后Hpa-mRNA表达,Western blot检测转染后Hpa蛋白表达。采用Transwell小室试验检测转染后Hpa-siRNA和经亚砷酸处理SW1990细胞体外侵袭能力。结果:Hpa-mR-NA和Hpa蛋白在基因转染前后的表达,NC和HK组无明显差别,Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA三组均明显下降,Hpa2-siRNA抑制效率优于Hpa1-siRNA和Hpa3-siRNA(P<0.05)。随着亚砷酸浓度从0.5、1.0、2.0mg/ml递增,侵袭抑制率也随之升高,分别为7.78%、46.8%及76.8%,差异有统计学意义(χ2=71.633,P<0.05)。Hpa2-siRNA联合亚砷酸后均能显著抑制SW1990胰腺癌细胞侵袭力,抑制率均达100%。结论:Hpa-siRNA和亚砷酸对SW1990胰腺癌细胞侵袭力具有协同抑制作用。

肝素酶siRNA抑制胰腺癌侵袭性的实验研究

目的 观察肝素酶（hparinase,Hpa）小干扰RNA（small-interfering RNA,siRNA）对胰腺癌侵袭力的影响.方法 设计3条Hpa干扰靶序列：Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA,稀释退火后分别与线性化pGenesil-1.1质粒表达载体的连接制成pGenesil1.1/Hpa1-siRNA、pGenesil1.1/Hpa2-siRNA、pGenesil1.1/Hpa3-siRNA重组质粒.然后将上述目的基因转染SW1990胰腺癌细胞,并设空白对照和阴性对照组.RT-PCR检测Hpa-mRNA表达,Western blot检测Hpa蛋白表达.Transwell小室检测SW1990细胞体外侵袭力.结果 Hpa-mRNA和Hpa蛋白在基因转染前后的表达,NC和HK组无明显差别,Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA三组均明显下降,Hpa2-siRNA抑制效率优于Hpa1-siRNA和Hpa3-siRNA（P＜0.05）.Hpa2-siRNA明显抑制SW1990胰腺癌细胞侵袭力,抑制率均达42.6%.结论 Hpa2-siRNA是Hpa特异性干扰序列,对SW1990胰腺癌细胞侵袭力具有明显抑制作用.