HRD1、P53、HER2水平与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系

目的研究HRD1、P53,HER2与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系。方法选取确诊并实施相关治疗的82例乳腺癌患者为此次试验的对象,收集全部患者的癌旁组织以及癌组织石蜡切片,应用免疫组织化学EliVi-sion两步法比较癌旁组织以及癌组织中HRD1、P53、HER2水平,分析HRD1、P53、HER2与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的相关性。结果癌组织中HRD1(χ^(2)=5.502,P=0.019)、P53(χ^(2)=6.552,P=0.011)、HER2(χ^(2)=5.512,P=0.023)的阳性表达率显著高于癌旁组织;脉管侵犯有无、不同肿瘤直径、TNM不同分期以及淋巴结是否发生转移患者的P53、HRD1、HER2表达水平存在差异(P<0.05);相关性分析发现,患者的肿瘤直径、脉管侵犯、TNM分期以及淋巴结转移情况与患者的HRD1、P53、HER2水平呈正相关。结论HRD1、P53、HER2与乳腺浸润性导管癌临床病理特征呈现显著的相关性,可作为日后治疗的重要靶点。

籼稻紫叶种质hrd1的鉴定及杂种优势分析

籼稻紫叶材料hrd1来源于特籼占13与02428杂交后代。农艺性状考察表明,籼稻紫叶种质hrd1紫色性状表现稳定、叶绿素含量正常,其株高较矮、分蘖中强、柱头双外露率极高,农艺性状较优良。以hrd1为母本与11个水稻品种配制杂交组合,对杂种F1及亲本的主要农艺性状进行统计分析,结果表明:hrd1与11个品种杂交F1在主要农艺、经济性状上都表现了较强的杂种优势,特别是单株穗重杂种优势表现突出。该种质在标记性状转育和杂种优势利用中具有一定价值。

HRD1在糖尿病小鼠视网膜的表达变化

目的观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(Hmg Co A reductase degradation 1,HRD1)在糖尿病小鼠视网膜不同时期的表达变化。方法 STZ诱导的糖尿病C57BL/J小鼠,分别于糖尿病成功造模后1个月、3个月、6个月,选取糖尿病小鼠视网膜组织,利用免疫荧光、Western blot、RT-PCR技术检测HRD1在糖尿病不同时期的表达变化。结果免疫荧光观察到HRD1绿色荧光强度在1个月、3个月、6个月糖尿病小鼠视网膜随糖尿病进程逐渐减弱。Western blot、RT-PCR检测可见在1个月、3个月、6个月糖尿病小鼠视网膜组织HRD1基因水平和蛋白水平表达较对照组均明显减少(m RNA:P1=0.040 5;P2=0.006 2;P3=0.004 1;蛋白:P1=0.010 9;P2=0.001 3;P3=0.000 3)。结论HRD1可能在糖尿病视网膜病变发生发展过程中起到一定作用。

HRD1在oxLDL刺激的人脐静脉血管内皮细胞中的表达及意义

目的 :观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(HMG-Co A reductase degradation protein 1,HRD1)在人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内的表达情况,探讨HRD1对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox LDL)引起的血管内皮细胞凋亡及细胞内脂质沉积的影响。方法 :免疫荧光检测HRD1在动脉粥样硬化患者血管组织中的表达。同时体外传代培养HUVEC,ox LDL刺激细胞后Western blot法观察HRD1的表达情况。Ad-HRD1感染ox LDL刺激后的HUVEC,Western blot法观察HRD1对细胞凋亡的影响,油红O染色法观察HRD1对细胞内脂滴生成的影响。结果:HRD1表达于动脉粥样硬化患者血管组织中;也表达于ox LDL刺激后的HUVEC中;Ad-HRD1感染ox LDL刺激后的HUVEC,Cleaved PARP和Cleaved Caspase 3表达降低并且细胞内脂滴形成减少。结论:HRD1可抑制ox LDL导致的内皮细胞凋亡和细胞内脂质沉积。

福辛普利联合非诺贝特对DM小鼠视网膜Nrf2及HRD1表达的影响

目的探讨福辛普利联合非诺贝特对糖尿病(DM)小鼠视网膜核因子E2相关因子2 (Nrf2)及甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1 (HRD1)表达的影响。方法选择150只SD雄性小鼠,采用随机数表法分为空白对照组(假造模)、模型对照组(DM模型)、福辛普利给药组(20 mg·kg^-1·d^-1福辛普利干预)、非诺贝特给药组(400 mg·kg^-1·d^-1非诺贝特干预)和联合给药组(20 mg·kg^-1·d^-1福辛普利与400 mg·kg^-1·d^-1非诺贝特联合干预),每组30只。采用裂隙灯检查各组小鼠的晶状体浑浊程度,采用实时荧光定量PCR检测视网膜Nrf2及HRD1 mRNA的表达水平,采用Western blot方法检测视网膜Nrf2及HRD1蛋白表达水平,采用TUNEL染色法检测视网膜组织细胞凋亡TUNEL指数,视网膜丙二醛(MDA)、血管内皮生长因子(VEGF)浓度与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)酶活性采用ELISA法检测。对五组小鼠检测的指标进行比较。结果空白对照组小鼠晶状体无浑浊,其余四组小鼠晶状体均可见不同程度浑浊,五组小鼠晶状体浑浊程度比较差异有统计学意义(P<0.05);五组小鼠视网膜中Nrf2及HRD1 mRNA表达及其蛋白水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中,空白对照组表达最高,联合给药组次之,单药给药组再次,模型对照组表达最低;五组小鼠视网膜组织细胞凋亡TUNEL指数比较差异有统计学意义(P<0.05),其中模型对照组最高,随后从高至低依次为福辛普利给药组、非诺贝特给药组、联合给药组和空白对照组;五组小鼠视网膜组织中的MDA、VEGF浓度与GSH-PX、SOD、ROS酶活性比较差异均有统计学意义(P<0.05),GSH-PX、SOD在空白对照组中活性最高,MDA、VEGF浓度、ROS活性最低,联合给药组次之,单药给药组再次,模型对照组最高或最低。结论福辛普利联合非诺贝特可通过有效增加DM小鼠视网膜Nrf2和HRD1的表达水平来降低氧化应激损伤和内质网应激水平,进而延缓DM进程,改善糖尿病小鼠视网膜功能。

Hrd1在博来霉素诱导大鼠肺纤维化中的表达

目的探讨Hrd1在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中的表达及其与Ⅰ型胶原、Nrf2的关系。方法将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、溶剂组、LS-102组,每组15只。气管内注射博来霉素复制肺纤维化模型,LS-102组每日腹腔注射LS-102溶液,溶剂组、对照组及模型组分别腹腔注射等体积DMSO及0.9%氯化钠溶液。分别于第7天、第14天、第28天每组各处死5只大鼠。HE染色、Masson染色观察肺组织炎症及纤维化,免疫组化检测Hrd1、Ⅰ型胶原、Nrf2的表达。结果造模后第7天、第14天、第28天模型组、溶剂组、LS-102组大鼠肺组织,肺泡炎、肺纤维化程度及Hrd1、Ⅰ型胶原、Nrf2的表达均较对照组明显增强(P均<0.05)。LS-102组于造模第7天、第14天肺泡炎性程度以及肺纤维化程度均较模型组和溶剂组明显减弱(P均<0.05)。LS-102组Hrd1的表达在3个时间点均较模型组、溶剂组明显减少,LS-102组第14天、第28天大鼠肺组织Ⅰ型胶原的表达较模型组、溶剂组明显减少(P<0.05)。LS-102组于第7天肺组织Nrf2表达量较模型组、溶剂组明显增加(P<0.05)。结论Hrd1可能通过促进Ⅰ型胶原表达及抑制Nrf2的生成参与肺纤维化的发生、发展过程。

人参皂苷Rb1激活HRD1信号通路对动脉粥样硬化内皮细胞凋亡的影响

目的探讨人参皂苷Rb1(GRb1)激活羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(HRD1)通路对动脉粥样硬化介导的内皮细胞凋亡的影响。方法将人主动脉内皮细胞(HAECs)分为正常对照组(NC组)、模型组[氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),100 mg/L]、GRb1组(50μmol/L)、GRb1+si-NC组(si-HRD1阴性对照)和GRb1+si-HRD1组,比较各组HAECs的细胞活力、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平、细胞凋亡、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)及HRD1蛋白表达。结果与NC组比较,模型组细胞活力、SOD水平、Bcl-2及HRD1蛋白降低,ROS、MDA水平、细胞凋亡率、Caspase-3及Bax蛋白升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,GRb1组细胞活力、SOD水平、Bcl-2及HRD1显著升高,ROS、MDA水平、细胞凋亡率、Caspase-3及Bax蛋白降低,差异有统计学意义(P<0.05);沉默HRD1逆转了GRb1对ox-LDL诱导的动脉粥样硬化内皮细胞的影响。结论GRb1可能通过激活HRD1通路抑制ox-LDL诱导的动脉粥样硬化内皮细胞凋亡。

HRD1蛋白在结肠癌组织中的表达及意义

目的:探索HRD1在结肠癌中的表达和评估它与结肠癌患者临床特征的相关性。方法:免疫组织化学方法检测HRD1在90例人结肠癌组织及其相应的癌旁正常组织中的表达,并分析HRD1与患者临床病理特征之间的关系。结果:与正常组织相比,结肠癌组织HRD1的表达显著增加(78.89%,P<0.001);HRD1表达水平与肿瘤入侵深度(P=0.002)、远处转移(P<0.001)、TNM分期(P=0.001)以及肿瘤的病理分级显著相关。结论:HRD1在结肠癌高表达,它与结肠癌患者的临床特点密切相关,它可能作为结肠癌治疗的靶标。

紫外线及全反式维A酸对人皮肤及成纤维细胞中Hrd1表达的影响

目的探讨紫外线照射及全反式维A酸(ATRA)对人皮肤及成纤维细胞中Hrd1表达的影响及机制。方法2017年12月至2018年6月于南京医科大学附属第一医院皮肤科收集12份人皮肤组织标本,30~40岁、60~70岁曝光及非曝光部位标本各3份,免疫组化检测各组Hrd1表达。将40只BALB/c小鼠分为对照组、紫外线组、ATRA组及紫外线+ATRA组,其中紫外线组、紫外线+ATRA组每日照射UVA10J/cm^2和UVB30mJ/cm^2,紫外线+ATRA组(照光前给药)、ATRA组小鼠背部剃毛区域每日均匀涂抹1次0.1ml0.1%ATRA药膏,对照组既不涂药也不照射紫外线。14周后处死小鼠并取背部皮肤免疫组化观察Hrd1的表达。体外培养的人皮肤成纤维细胞分为对照组、紫外线组、ATRA组及紫外线+ATRA组,紫外线组和ATRA+紫外线组照光前用磷酸盐缓冲液覆盖细胞上层,照射10J/cm^2UVA或30mJ/cm^2UVB,ATRA+紫外线组(照光后给药)和ATRA组用含ATRA1μmol/L的培养基继续培养24h。Western印迹法检测各组成纤维细胞Hrd1表达,荧光显微镜观察各组细胞内活性氧水平。组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,P<0.05认为差异有统计学意义。结果30~40岁、60~70组曝光部位皮肤组织中Hrd1表达水平分别为0.307±0.256、0.486±0.579,均明显高于避光部位(0.196±0.330、0.199±0.375),t值分别为5.486、10.579,P<0.05。BALB/c小鼠体内实验中,对照组、紫外线组、ATRA组及紫外线+ATRA组小鼠皮肤中Hrd1表达水平分别为0.189±0.015、0.288±0.017、0.187±0.020、0.226±0.021,差异有统计学意义(F=19.553,P<0.001),紫外线组高于对照组(t=5.337,P=0.033)和ATRA+紫外线组(t=4.891,P=0.039)。体外实验中,人皮肤成纤维细胞分别经UVA、UVB照射后,4组细胞Hrd1水平差异均有统计学意义(F值分别为120.704、102.119,均P<0.001),UVA或UVB照射对Hrd1表达水平的影响基本一致,紫外线组Hrd1水平均明显高于对照组和ATRA+紫外线组(均P<0.05)。紫外线照射后,紫外线组活性氧水平均明显高于对照组和ATRA+紫外线组(均P<0.05)。结论ATRA可以抑制紫外线介导的皮肤成纤维细胞中Hrd1的表达,其机制可能与ATRA抑制细胞内活性氧生成有关。

泛素连接酶Hrd1与呼吸系统疾病

肺部的细胞在受到缺氧、烟雾等外界刺激时会发生内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）,而ERS参与多种肺部疾病的发生发展-[1]。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（Hmg-Co A reductase degradation 1,Hrd1）为一个六次跨膜的内质网膜蛋白,其生物学功能是作为E3泛素连接酶参与内质网相关性降解（ER-associated degradation,ERAD）。

泛素连接酶Hrd1在胃癌组织中的表达及意义

[目的]研究泛素连接酶Hrd1在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。[方法]收集60例胃癌患者手术切除组织,采用免疫组化SP法检测Hrd1在胃癌组织和癌旁组织中的表达情况。[结果]60例胃癌患者的组织中有38例Hrd1阳性表达,阳性率为63.3%,在癌旁正常组织中23例Hrd1阳性表达,阳性率为38.3%,在胃癌组织中明显高于癌旁组织(P<0.05)。Hrd1在胃癌组织中的表达与肿瘤的大小、TNM分期有关(P<0.05);而与患者性别、年龄、分化程度及淋巴结转移、肿瘤发生部位等指标无明显相关性(P>0.05)。Hrd1在胃癌组织中的表达与胃癌预后相关(P<0.05)。[结论]Hrd1表达与胃癌发生、发展有关,其在胃癌中的表达情况可以作为判断胃癌预后的参考指标。

内质网压力响应相关的蛋白质降解

内质网相关蛋白质降解途径(ERAD),即蛋白质分泌过程中错误折叠或未折叠的蛋白质在内质网中被识别并逆向运输到细胞质经聚泛素化后由蛋白酶体降解的过程.自从发现该途径后对其机制的阐明一直处于不断探索的阶段.近年来,对ERAD底物识别、逆向运输和泛素化新组分的发现以及新技术的应用,使得该途径的具体分子机制更加清晰.本文全面梳理并综述了内质网应激响应、ERAD降解过程与机理的最新进展,并对模式蛋白底物和最新研究方法进行了总结,以期展示该领域的研究概况.