基因重组大肠杆菌表达HrpNEcc蛋白的发酵条件及诱导条件优化

对已构建好的表达HrpNEcc蛋白的工程菌BL21(DE3)/pET30a(+)hrpNEcc的摇瓶发酵条件及乳糖诱导进行优化,通过在7L发酵罐中放大发酵实验,以期提高蛋白产量并降低生产成本。在摇瓶中优化的发酵及诱导条件是:5%的接种量,TB培养基,菌体培养至对数生长前期,添加3g/L外源诱导剂乳糖时,HrpNEcc蛋白产量可达417.60mg/L,比不添加乳糖时提高了36.73%,比用IPTG诱导时提高了16.85%。7L发酵罐中发酵,获得菌体湿重达到57.24g/L(WCW),可溶性HrpNEcc蛋白产量占细胞总蛋白的50.2%,为3.29 g/L。

蛋白农药HrpNEcc防治大白菜软腐病试验

对HrpNEcc蛋白农药应用于大白菜软腐病防治的技术参数进行了研究,研究发现,HrpNEcc纯蛋白田间喷洒使用的适宜剂量为6~10 mg/m2或者使用体积分数为0.017%～0.033%稀释液为宜,对大白菜细菌性软腐病防治率可达90%左右;贮藏期间使用体积分数0.1%稀释溶液对大白菜细菌性软腐病防治率达到75.4%,可见HrpNEcc能有效防治大白菜细菌性软腐病的发生.