抗猪支原体HspA1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为阐明猪支原体HspA1的生物学特性,本研究构建了重组质粒pET-28a-HspA1,原核表达HspA1重组蛋白并纯化;以纯化的HspA1蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,通过常规方法制备单克隆抗体,利用间接ELISA方法检测单克隆抗体效价,通过Western-blot检测单克隆抗体的特异性。结果显示,本研究成功筛选出以4B4、2G2命名的2株杂交瘤细胞,其抗体分泌稳定;这2株杂交瘤细胞特异性好,与HspA1重组蛋白均能发生特异性反应;这2株杂交瘤细胞识别的抗原表位相同,单抗亚型均为Ig G1、κ链;4B4、2G2的细胞上清和腹水的ELISA抗体效价分别为:1∶3200、1∶800和1∶13107200、1∶819200。