陕西人群HUMARA基因多态与衰老的相关性

目的 探讨陕西人群 HUMARA基因多态性分布及与衰老的相关性 .方法 应用聚合酶链反应 (PCR- STR)技术先后对老年人 (92例 )和青年人 (6 3例 )的 HU MARA基因的多态位点进行检测 .结果 在老年组中 ,片段大小在 2 80～4 4 5 bp之间 ,重复片段为 (GCA) ,重复次数最少 2 2次最多 77次 .频率分布在 0 .0 0 5～ 0 .39,高峰在 30 0～ 310 bp(39% ) ,杂合率为 0 .83,多态信息量 (PIC)为 0 .76 ;在青年组中 ,片段大小在 2 80～ 4 0 8bp之间 ,重复次数最少 2 2次最多 6 5次 ,频率分布在 0 .0 1～ 0 .33,高峰在 310～ 32 0 bp(33% ) ,杂合率为 0 .90 ,多态信息量 (PIC)为 0 .83.老年组基因频率分布与青年组比较 ,有显著性差异 (P<0 .0 1) .结论 推测该位点遗传多态与细胞的衰老有一定的相关性 。

HUMARA多态性与男性动脉粥样硬化的关系

应用多聚酶链式反应对 96例老年 AS患者及 92例非 AS老年人 HUMARA- STR位点进行多态性分析。结果表明 :1在 HUMARA位点重复单位 CAG,对照群体片段大小 2 80～ 4 4 5 bp,重复次数为 N=2 3～ 77,杂合度为 83% ,多态信息量为 0 .76。 2 AS人群中 HU MARA位点片段大小 2 2 0～ 4 4 5 bp,重复次数为 N=2～ 77,杂合度为 89% ,多态信息量为 0 .80。 3将男性的 AS组与对照比较差异显著 ;AS组男性与女性比较差异显著。

天津地区汉族群体人雄激素受体(HUMARA)基因座遗传多态性分析

目的 为了获得天津地区汉族群体HUMARA(人雄性激素受体 )基因座的基因频率分布资料 ,并与其他地区群体进行比较。方法 EDTA抗凝血样采自天津地区无血缘关系个体 ,TKM法提取DNA ,PCR扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶(PAG)电泳及银染法对HUMARA基因座进行遗传多态性分布调查。结果 共检出 11个等位基因 ,HUMARA位点扩增片段分布于 2 70～ 30 0bp ,基因型频率分布符合Hardy -Weinberg平衡。该基因座在天津地区人群中的个人识别能力 (Dp)为 0 .95 35 ,杂合度 (H)为 0 .732 4 ,多信息总量 (PIC)为 0 .8184。比较天津汉族与四川汉族在HUMARA位点无统计学意义 ,而与云南白族、美国黑人、美国白人和德国人之间有显著性差异。结论 HUMARA基因座在群体遗传学研究和法医学个人识别中具有较高的应用价值。

HUMARA基因座差异甲基化的法医学意义

目的 探讨X连锁差异甲基化多态性基因座的法医学应用意义。方法 以STR基因座HUMARA为例 ,应用甲基化敏感性限制酶消化后PCR技术 ,复合分析该基因座的STR多态性和甲基化状态 ,调查并比较男、女检材的分型效果。结果 基因组DNA经HpaⅡ消化后 ,男性没有扩增产物 ,女性分型不受影响 ,男女混合检材得到女性的分型图谱。女性单克隆瘤细胞只能检出 1个等位基因。结论 差异甲基化的HUMARA基因座是混合斑分析、性别鉴定和组织克隆性判断的有用工具。

动脉粥样硬化遗传易感性与HUMARA(GGC)n基因多态性的相关性研究

目的 :研究雄激素受体基因 (HU MARA )多态性在陕西地区老年动脉粥样硬化 (AS)人群中分布规律及其该位点与 AS遗传易感性的关系。方法 :应用 PCR- Am p- FL P(多聚酶链反应扩增片段长度多态性 )技术对老年 AS患者 10 0例及非 AS老年人 78例 HU MARA - STR(短串联重复序列 short tandem repeats)位点进行多态性分析。结果 :在正常人群中 HU MARA基因 GGC位点共检测出 16种基因型 ,13个等位基因 ,其片段大小在 177～ 2 6 7bp,杂合度为 85 %,多态信息量 (polymorphism information content,PIC)为 0 .80 ;AS人群 HU MARA基因 GGC位点共检出 15种基因型 ,13个等位基因 ,其片段大小为 195～ 2 37bp,杂合度为 77%,多态信息量为 0 .72 ,两群体中基因频率分布有显著差异 (P<0 .0 1) ,发现某些片段存在基因频率分布高峰 ,在两群体中亦有差异性。结论 :推测 HU -MARA基因 STR多态位点与 AS的遗传易感性相关。

SNP rs220028和STR HUMARA位点甲基化标记的时空稳定性研究

目的调查印记SNPrs220028和X-STRHUMARA位点甲基化标记的时空稳定性,评估其实用价值。方法采用甲基化敏感性限制酶消化后PCR技术,对SNPrs220028和STRHUMARA位点进行甲基化等位基因特异性分型。实验涉及10例不同年龄男女个体的血液、心、脑、肝、肾等主要组织以及不同程度降解的组织标本。结果SNPrs220028和STRHUMARA的甲基化等位基因特异性分型不受检材年龄、组织种类和一般程度降解的影响。结论SNPrs220028和X-STRHUMARA位点的甲基化标记稳定性良好,有实际应用价值。

应用 X 连锁 HUMARA 基因多态性分析血细胞群的克隆性

目的：探讨血细胞克隆性分析的方法。方法：采用ＰＣＲ和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Ｘ连锁人雄激素受体（ＨＵＭＡＲＡ）基因在我国女性中的杂合率以及该基因甲基化位点与Ｘ染色体灭活的相关性进行了研究，并采用ＨＵＭＡＲＡ基因多态性为标志分析了２０名正常女性和３０例女性急性髓系白血病（ＡＭＬ）未治患者的血细胞克隆性。结果：我国女性ＨＵＭＡＲＡ基因的杂合率为８８％，并且其甲基化方式与Ｘ染色体灭活稳定相关，１７名杂合子正常女性中１５名为多克隆性造血，２名呈现假性单克隆造血。２７例杂合子ＡＭＬ患者均为单克隆性造血。结论：Ｘ连锁ＨＵＭＡＲＡ基因多态性是一个很实用的克隆性标志，可用于血细胞的克隆性分析。

HuMARA(AGC)n,Amelogenin基因位点在强(轮)奸案检验中的应用

根据ＨｕＭＡＲＡ（ＡＧＣ）ｎ位于Ｘ染色体上和Ａｍｅｌｏｇｅｎｉｎ基因位于Ｘ，Ｙ染色体 上的特点，可以通过二者的扩增产物，对强（轮）奸案的检材成分进行分析，判断检材中 的ＤＮＡ来源。这在实际办案中有重要意义。

动脉粥样硬化遗传易感性与HUM ARA多态性的相关性

目的 研究 HUMARA基因多态性在陕西地区老年动脉粥样硬化 (AS)人群中分布规律及其该位点与 AS遗传易感性的关系 .方法 应用多聚酶链反应 (PCR)对 96例老年AS患者及 92例非 AS老年人 HUMARA- STR(短串联重复序列 short tandem repeats)位点进行多态性分析 .结果 在HU MARA位点重复单位 :CAG,对照群体片段大小在 2 80～44 5 bp之间 ,重复次数为 N=2 3- 77,杂合度为 83% ,多态信息量 (PIC)为 0 .76 ;AS人群中 HUMARA位点 ,其片段大小在 2 2 0～ 44 5 bp之间 ,重复次数为 N=2 - 77,杂合度为 89% ,PIC为 0 .80 .两组的基因频率分布比较无显著性差异 ,但将男性的 AS组与对照比较差异有显著性 ;女性的 AS组与对照比较差异无显著性 ;正常组男性与女性比较差异无显著性 ;AS组男性与女性比较差异有显著性 .结论 HU

DYS393多态性分析及其法医学应用

探讨了Y-DNASTR基因座DYS393的多态性及其法医学应用价值,用变性PAGE结合荧光DNA自动测序仪分析及非变性PAGE,结合银染显示两种PCR扩增产物的方法,并调查了广州地区120例汉族无关男性个体DYS393等位基因分布状况;在此基础上,建立了DYS393和HumARA两基因座的复合扩增体系,结果显示DYS393基因座共检出4种等位基因,复合扩增体系可同时提供性别鉴定和个体识别的信息。

急性髓系白血病缓解前后克隆性演变探讨

为了动态观察急性髓系白血病（AML）完全缓解（CR）前后的克隆性演变及其与骨髓细胞染色体核型和临床转归的关系。采用人雄激素受体（HUMARA）基因多态性──甲基化分析的方法对15例杂合子女性AML患者缓解前后的克隆性进行了分析。结果显示：15例AML患者缓解方均为单克隆造血，经化疗完全缓解（CR）后其中的11的恢复为多克隆性造血，余4例仍为单克隆性造血，后者中的一例在检查后3个月复发，未发现CR后的克隆性与骨髓三系病态造血有何关系。AML为一克隆性疾病，大部分AML患者CR后恢复正常多克隆性造血，但的有1／4的患者仍为单克隆造血。

骨的纤维结构不良克隆性分析

目的 :检测FD病变的克隆性起源,探讨其病变的性质。方法 :采用基因组DNA抽提、PCR扩增及基因扫描的方法分析FD的克隆性。结果 :在80例FD中,其中30例FD的HUMARA基因DNA扩增成功。基因扫描分析成功的10例FD中,2例FD为纯合子,5例FD为单克隆,3例FD为多克隆。结论 :FD是一种单克隆性的病变。结合我们前期的实验研究(2例FD的GNAS1基因突变及1例FD恶变)提示FD是由于多种因素共同作用导致的骨发育成熟障碍的良性肿瘤性病变。

多激素分泌性垂体泌乳素腺瘤的激素分泌谱及克隆分析

目的对多激素分泌性垂体泌乳素腺瘤的克隆状态以及激素分泌谱进行分析。方法对26例女性垂体泌乳素腺瘤患者(单激素分泌性PRL腺瘤7例,多激素分泌性PRL腺瘤19例)进行肿瘤标本的免疫组化分析,并且提取DNA行HUMARA分析。结果免疫组化分析提示本组多激素分泌性垂体PRL腺瘤具有10种不同的激素分泌谱,现代分子生物学HUMARA克隆分析提示11/13例(85%)多激素分泌性垂体PRL腺瘤为单克隆起源。结论结果提示垂体泌乳素腺瘤除了分泌泌乳素外,还可以分泌多种垂体激素,而且绝大多数多激素分泌性垂体腺瘤的起源是单克隆性的。

乳腺导管内增生性病变的克隆性分析

目的检测乳腺导管内增生性病变的克隆性起源。方法采用激光捕获显微切割技术精确分离增生组织和周围正常组织中的导管上皮细胞，抽提其基因组DNA。以限制性内切酶HpaⅡ消化前后的基因组DNA为模板，荧光PCR法扩增人雄激素受体（HUMARA）外显子1，在DNA测序仪上毛细管电泳，并分析HUMARA两个位点的荧光强度。结果101例组织标本中，有68例PCR扩增HUMARA外显子1成功，并且该位点为杂合性，其中9例普通导管内增生（UDH）和5例导管上皮内肿瘤（DIN）1A在HpaⅡ消化前后的PCR产物均有2条，且荧光强度相近，即它们的X染色体失活是随机的，呈多克隆性。3例UDH、13例DIN1A、28例DIN1B和10例原位癌在HpaⅡ消化前后扩增出1条或2条强度差别较大的条带，提示它们为单克隆起源。结论DIN1A、1B和原位癌为单克隆起源，属于肿瘤性增生。