中药怀牛膝醇提物有效单体成分的定性定量研究

目的:基于现代检测技术对怀牛膝有效制剂——牛膝醇提物的单体成分进行定性定量分析。方法:将怀牛膝醇提物液体制剂按照检测进样要求分别制备成烘干物和液体物,再应用核磁共振波谱(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)、气相色谱质谱联用(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)、顶空-气相色谱质谱联用(Headspace-Gas Chromatography-Mass Spectrometry,HS-GCMS)、液相色谱质谱联用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,LC-MS)、三重串联四极杆液相质谱联用(Triple Series Quadrupole Liquid Mass Spectrometry,LC-MSMS)等技术对牛膝醇提物的化学成分进行鉴定分析。结果:共检测出23个单体成分,包括糖类1个,类黄酮类1个,黄酮类1个,甾酮类1个,三萜类1个,氨基酸类16个,果酸类2个,其中槲皮素含量为0.0021%,β-蜕皮甾酮含量为0.0210%,齐墩果酸含量为0.00017%,并根据分子片段信息预测出了4’,5,6,7-四甲氧基黄酮成分。结论:本实验为怀牛膝醇提物制剂的临床应用提供了有效单体成分参考,为进一步对其单体物质的“药物-疾病-靶点”进行验证研究和开发应用提供依据。

道地药材之怀牛膝、川牛膝的本草考证

目的:考证怀牛膝、川牛膝的道地药材。方法:通过查阅怀牛膝、川牛膝的文献记载,考证怀牛膝、川牛膝的源流及分析历代医药学家对其功用、性状的描述。结果:历代本草文献所载的牛膝多指怀牛膝,并且自唐代始,大多以怀地产者为优;明清之后,始明确分怀牛膝、川牛膝,两者皆具有补益肝肾和行瘀达下的功效,但怀牛膝以行瘀达下为主,川牛膝以补益肝肾见长。结论:怀牛膝、川牛膝功用相似,但侧重点不同,临床使用应区别对待。

怀牛膝与川牛膝功效小考

目的:对怀牛膝与川牛膝的古今功效记载及现代研究进行梳理,以探究其功效的演变过程。方法:通过查阅牛膝(包括怀牛膝、川牛膝)在古代本草及方书中的记载,整理历代医药学家对其功效的描述及临床运用,结合现代的功效记载、药理研究进行综合分析。结果:现代功效认识与古代文献论述不一致。结论:目前对怀牛膝与川牛膝的功效认识还不够全面,需做进一步探索研究。

基于网络药理学及分子对接探讨怀牛膝治疗高血压的物质基础和作用机制

目的基于网络药理学方法探讨怀牛膝治疗高血压的作用机制。方法通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选怀牛膝的有效成分及相应的靶蛋白,通过Genecards、OMIM数据库获取高血压的靶点,利用Venn在线软件获取怀牛膝-高血压交集靶点,运用Cytoscape 3.7.2软件构建“化合物-靶点-疾病”网络图。使用String数据库绘制蛋白互作(PPI)网络,利用David数据库和R语言3.6.3中clusterProfiler包对关键靶点进行GO功能富集及KEGG通路分析,通过分子对接技术将怀牛膝主要活性成分与关键靶点进行对接验证。结果共筛选出怀牛膝潜在活性成分16个,有效作用靶点183个。通过Venn图获得76个药物疾病共同靶点,PPI网络发现IL6、AKT1、VEGFA、CCL2、MMP9、NOS3、PTGS2等可能是怀牛膝治疗高血压的关键靶点。GO分析共包含396条富集结果,其中生物过程307条,分子功能54条,细胞组成35条。KEGG通路分析发现60个条目。分子对接筛选得到与靶点有结合潜力的化合物。结论怀牛膝通过“多成分-多靶点-多途径”发挥降压作用,为深入研究其物质基础及作用机制奠定了基础,也为后期实验验证和临床应用提供了相关依据。

郑邦本常用对药举隅

郑邦本老师常用黄芪60 g配伍益母草15～30 g治疗肾病综合征、肾炎综合征、慢性肾炎、糖尿病肾病;灵芝30 g配刺五加15 g对脾肾阳虚,体虚乏力,食欲不振,腰膝酸痛,失眠多梦等证尤为有效,常用于疲劳综合征、神经衰弱的治疗;苏子10 g配地龙10 g降气止咳平喘,常用于支气管哮喘、喘息性支气管炎的治疗;木香10 g配伍槟榔10 g行气宽肠,治疗腹胀、肛门坠胀疗效显著;益母草15～30 g配生山楂30 g活血通经,治疗月经量少、痛经、不孕症等;半枝莲30 g与垂盆草30 g清热利湿退黄,退黄与降酶并举,常用于治疗肝功能异常湿热证;血肉有情之品鹿角胶10 g配伍骨碎补15 g补肾强筋骨,用于骨质疏松、骨折术后愈合不佳、脑萎缩等病;穿山甲5～10 g配鹿角片5～10 g治疗乳腺增生、输卵管不通疗效显著;怀牛膝15 g配刘寄奴30 g治疗血瘀阻络引起的关节疼痛,用于风湿性关节炎、膝骨性关节炎、骨关节损伤疾病。上述对药为郑老师经过长期临床验证,效如桴鼓,具有可重复性,如能在辨证基础上正确运用,常能收到良好效果。

加味四逆散对慢性疲劳综合征模型大鼠额叶和海马区端粒酶及端粒的影响

目的:观察加味四逆散对慢性疲劳综合征模型大鼠额叶、海马区神经元端粒长度及端粒酶活性的影响,探讨中医疏理气机法防治慢性疲劳综合征的神经端粒机制。方法:SD雌性1月龄大鼠100只,随机分为对照组、模型组、加味四逆散组、小柴胡汤组、柴胡加龙骨牡蛎汤组、怀牛膝组、四物汤组、黄芪建中汤组、人参组、帕罗西汀组,每组10只。采用慢性不可预见的中等强度应激刺激,造成动物的慢性疲劳状态。用酶联免疫吸附法研究端粒酶活性变化,用Southern Blotting法研究端粒长度变化。结果:1海马端粒酶活性变化:与对照组比较,除加味四逆散组外,其余各组均降低,且有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,除怀牛膝组和柴胡加龙骨牡蛎汤组外,其余各组均升高,且有统计学差异(P<0.01)。2额叶端粒酶活性变化:与对照组比较,除加味四逆散组和小柴胡汤组外,其余各组均降低,且有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,除怀牛膝组和柴胡加龙骨牡蛎汤组外,其余各组均升高,且有统计学差异(P<0.01)。3海马端粒长度变化:与对照组比较,除加味四逆散组外,其余各组端粒长度均缩短,且有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,除怀牛膝组和柴胡加龙骨牡蛎汤组外,其余各组端粒长度均延长,且有统计学差异(P<0.01)。4额叶端粒长度:与对照组比较,除加味四逆散组外,其余各组端粒长度均缩短,且有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,除怀牛膝组和柴胡加龙骨牡蛎汤组外,其余各组端粒长度均延长,且有统计学差异(P<0.01)。结论:慢性应激能诱发大鼠慢性疲劳状态,降低额叶区、海马区的端粒酶活性,缩短端粒长度。加味四逆散、小柴胡汤、四物汤、黄芪建中汤和人参可不同程度改善慢性应激大鼠的疲劳症状,其中以加味四逆散和小柴胡汤较优,其机制可能与调节额叶和海马区的端粒酶活性及保护端粒损伤有关。