利用EST-SSR标记研究黄金茶群体遗传多样性及遗传分化

利用19对茶树EST-SSR引物对黄金茶群体的38个单株进行了遗传多样性和亲缘关系分析。19对引物共检测到等位位点37个，每个引物1～3个，平均1．95个；期望杂合度（He）在0．03～0．65之间，平均值0．32；观测杂合度（H0）在0～0．97之间，平均值0．33；群体内的Shannon指数0．55。以上结果均说明黄金茶群体的遗传多样性较低。基于EST-SSR数据以SAHN邻接法对供试种质资源进行UPGMA遗传相似性聚类，并绘制树状聚类图，按相似系数0．77可将参试的38份种质资源分为六大类。根据不同单株间的相似系数可为黄金茶群体的遗传改良提供一定参考。同时，AMOVA分析表明，黄金茶群体的遗传变异21．77％发生在种群间，78．23％发生于单株间，不同区域的种群间基因流为1．80，这可以为黄金茶群体的保护提供一定理论依据。

“黄金茶”特异种质资源遗传多样性和亲缘关系的ISSR分析

利用ISSR分子标记对珍稀地方种质资源＂黄金茶＂的110个株系进行遗传多样性和亲缘关系分析。从100条ISSR引物中筛选出18条多态性高、重复性好的引物,分别对供试材料的基因组进行扩增,共获得205条清晰可辨的谱带,其中多态性带187条,多态性比率达91.22%,反映了黄金茶群体基因组DNA多态性较高。110个黄金茶株系的平均有效等位基因数为1.51,平均Nei’s基因多样性指数为0.30,平均Shannon信息指数为0.45,说明黄金茶群体的遗传多样性较高。110个黄金茶株系间的Jaccard相似系数在0.22-1.00之间,平均值为0.55。根据相似系数平均值,用UPGMA法将供试的110个株系分成七大类群,并绘制ISSR聚类树状图,揭示了黄金茶群体各株系之间的亲缘关系。该研究为今后加强对黄金茶特异种质资源的保护和利用、优良品种的选育及杂交亲本的选配等从分子水平上提供了一定的参考依据。

保靖黄金茶1号工夫红茶加工工序对主要滋味物质形成的影响

以保靖黄金茶1号鲜叶为原料,研究工夫红茶萎凋、揉捻、发酵和干燥工序对主要滋味物质形成的影响。结果表明:萎凋工序对干茶中游离氨基酸的形成影响最大,占游离氨基酸总变化的比例为375%,对其他滋味物质的形成影响轻微。揉捻工序可降低茶叶中水浸出物、茶多酚、儿茶素、游离氨基酸和可溶性糖含量,对干茶中茶黄素和茶红素的形成影响大于其他工序,两者含量总变化的工序占比分别为260%和164%。发酵工序可增加茶叶中总黄酮、可溶性糖、没食子酸、茶红素和茶褐素含量,对干茶中可溶性糖和游离氨基酸总变化的工序占比分别为195%和183%。干燥工序可轻微增加茶叶中没食子酸、总黄酮和咖啡碱含量,对干茶中可溶性糖和茶黄素总变化的工序占比分别为148%和98%。

黄金茶工夫红茶的甜味量化及其与主要滋味物质相关性分析

以黄金茶工夫红茶为研究对象,量化评价茶汤甜味强度,检测主要滋味物质含量,并分析两者相关关系。结果表明:不同厂家的黄金茶工夫红茶甜味强度差异明显;糖类甜味物质中麦芽糖含量最高,氨基酸类甜味物质中丝氨酸含量最高;甜味物质(包括单糖、双糖和甜味氨基酸)和茶氨酸含量均与甜味强度呈正相关,且糖总量与甜味强度呈显著(P<0.05)正相关(r=0.781);儿茶素、咖啡碱、没食子酸、茶黄素、茶红素含量与甜味强度呈负相关,且儿茶素总量、茶黄素含量与甜味强度呈显著(P<0.05)负相关(r=-0.811和-0.781),添加表没食子儿茶素没食子酸酯能降低糖类甜度。鉴于甜味是工夫红茶的分属滋味之一,甜味量化及相关性分析将为工夫红茶品质评判提供研究基础。

不同季节保靖黄金茶1号工夫红茶挥发性成分的HS-SPME-GC-MS分析

为研究不同季节湖南保靖黄金茶1号工夫红茶的香气品质特点,以春、夏和秋季保靖黄金茶1号一芽一叶为原料分别加工成工夫红茶样品,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用对3个季节工夫红茶的挥发性成分进行分析,结合感官审评考察不同季节对保靖黄金茶1号工夫红茶挥发性成分的影响。结果表明,3个季节工夫红茶香气均以甜香为主要特征,具体表现为春茶甜香纯正,夏茶甜香尚高,秋茶甜香带花香,秋茶香气指数最高,香气品质最好,夏、春茶次之,与感官审评结果一致。3个季节工夫红茶样品检出并鉴定到80种香气成分,其中春、夏和秋季红茶样品中分别检测出51、63种和66种香气成分,共有组分40种,主要以醇类、醛类、碳氢化合物、酯类和酮类物质为主;基于不同季节工夫红茶香气成分的含量作主成分分析(拟合参数为R2 X=0.941,Q2=0.825)并建立偏最小二乘-判别分析模型(拟合参数为R2 X=0.972,R2 Y=0.994,Q2=0.982)可有效区分春、夏和秋季的工夫红茶样品,不同季节工夫红茶的标志差异性化合物有13种,分别为水杨酸甲酯、苯甲醛、月桂烯、2,6-二甲基-3,7-辛二烯-2,6-二醇、1-乙基-2-甲酰吡咯、藏红花醛、反-橙叔醇、苯乙烯、2-辛烯-1-醛、反-2-癸烯醛、苯乙醇、反-芳樟醇氧化物(吡喃型)、反-2-壬烯醛。

黄金茶绿茶贮藏过程中色泽和叶绿素组成的相关性研究

以11个黄金茶株系(品种)和福鼎大白茶(CK)制成的烘青绿茶为材料,研究了常温贮藏条件下,干茶色泽及叶绿素组成的动态变化及相关性,结果表明:a*、C*值逐渐升高,L*、b*值逐渐降低;叶绿素a与叶绿素b含量均呈现出递减的趋势。叶绿素a含量与L*、b*、C*值呈正相关,与a*值呈负相关;叶绿素b含量与a*、C*值呈正相关,与L*、b*值呈负相关。叶绿素a含量对绿茶色泽的影响大于叶绿素b含量。黄金茶各株系(品种)制成烘青绿茶,在各个时期的a*值均低于福鼎,表现出良好的保绿特性。

基于变温发酵技术的黄金茶工夫红茶品质分析

该研究以保靖黄金茶1号1芽2叶鲜叶为原料试制工夫红茶,考察变温发酵(第一阶段40℃&第二阶段30℃)对黄金茶工夫红茶品质的影响。结果表明:变温发酵加工的工夫红茶色泽黑褐尚润,滋味甜醇、鲜爽,甜香尚高长,汤色红亮,叶底尚红匀;与恒温发酵相比,随着发酵程度的加深,茶汤颜色由红亮向红暗转变更明显,滋味由甜醇向纯和尚甜方向发展,叶底逐渐变暗失去光泽(红亮转为红褐),并随着发酵第一阶段(40℃)占据总体发酵时间延长而表现的更加明显;与变温发酵相比,40℃、3 h恒温发酵后的氨基酸、茶多酚含量下降最多,与(30℃,4 h)处理中茶多酚、氨基酸、可溶性糖等的变化趋势则基本一致,而变温发酵处理后茶黄素的最终含量(0.39%)均高于30℃、40℃恒温发酵处理;基于感官审评结果与各处理品质成分含量检测结果,综合判定变温发酵处理(40℃1 h+30℃2h)是以黄金茶为原料加工工夫红茶甜醇带鲜特征品质的最佳工艺。

保靖黄金茶1号杂交创新利用研究

本研究选择主要经济性状优良的福鼎大白茶等6个茶树品种为母本、具“黄金韵”但适应性一般的保靖黄金茶1号为父本,采用人工杂交方法,开展资源创新利用研究,以期达到品种改良目的。试验通过研究保靖黄金茶1号花粉生活力、不同杂交组合结实率、杂种F1成苗率、F1优良单株选择率等,发现保靖黄金茶1号花粉生活力较强,当天新鲜花粉生活力达94.22%,在常温、4℃和-20℃条件下最长分别可以存放7 d、30 d和40 d;6个杂交组合结实率为15.25%(碧香早)~31.32%(福鼎大白茶),平均结实率为21.88%,成苗率为50.77%(碧香早)~66.65%(铁观音),平均成苗率为59.62%,不同组合及不同年份间结实率和成苗率均无显著差异;3次优株选择和无性繁殖能力鉴定后,共获得60个新株系,选优率为2.35%,远高于优异资源自然杂交后代选优率(0.04%)。经生化成分、产量、品质等综合评价后选择布置区域试验的3个新品系,生长势均优于父本保靖黄金茶1号,感官品质优异,尤以香气突出,达到“扬长补短”种质创新目的。

黄金茶种质资源遗传多样性的AFLP分析

应用AFLP-银染技术，分析黄金茶群体111个株系的遗传多样性与亲缘关系。选用多态性高、分辨力强的引物组合E37M32、E41M33与E41M42分别扩增样品基因组DNA，共得到229条清晰条带，其中多态性条带186条，多态位点百分比为81．22％，反映了样品基因组DNA具有较高的多态性。111个样品得出的平均有效等位基因数（Ne）为1．42~0．35，平均Nei’S基因多样性（H）为O．25＋0．18，平均Shannon’S信息指数（I）为0．38＋0．25。应用NTSYSpc2．1软件，计算得到111个样品间的相似系数在0．65～0．99之间，平均为0．76。根据UPGMA法，将111个株系分成8大类群，绘制样品AFLP聚类树状图。本研究为黄金茶种质资源的保护及利用，从分子水平提供了一定的依据。

高氨基酸黄金茶种质资源筛选鉴定

对保存在湖南省茶叶研究所种质资源圃内的75份黄金茶群体资源进行高氨基酸茶树资源筛选,并对获得的高氨基酸资源进行生化成分分析及适制性试验,共筛选出36份高氨基酸资源、1份高茶氨酸资源。生化成分分析结果表明,高氨基酸黄金茶资源酚氨比<8,变异系数最大的是酚氨比(12.31%),其次分别是茶多酚(9.89%)、咖啡碱(6.93%)、氨基酸(6.31%),最小的是水浸出物(2.39%),茶多酚具有较大的改良潜力,而水浸出物最小;适制性试验表明,高氨基酸资源制绿茶品质优。

特早生高氨基酸优质绿茶茶树品种黄金茶2号选育研究

从"保靖黄金茶群体"中经系统选种、无性繁殖,育成了特早生高氨基酸优质绿茶茶树品种黄金茶2号。经多年试验表明,黄金茶2号为特早生种,春季一芽一叶萌发期比福鼎大白茶(ck)早7～9天;产量高,比对照增产3.94%;内含物丰富,氨基酸含量高,春季一芽二叶水浸出物38.59±2.63%、氨基酸5.44±0.42%、茶多酚17.45±3.09%、咖啡碱3.85±0.73%;制绿茶品质优,适制毛尖、高档名优绿茶;抗寒性、抗旱性、抗病虫性强。黄金茶2号于2013年通过湖南省农作物品种审定委员会品种登记。

湖北引种黄金茶1号主要生化特性及绿茶适制性分析

以湖北茶区主栽品种鄂茶1号为对照,研究引种的茶树品种黄金茶1号鲜叶以及春梢所制绿茶的主要生化成分含量变化,并进行感官审评。结果表明,黄金茶1号春梢鲜叶氨基酸、咖啡碱显著高于对照,而水浸出物、茶多酚、儿茶素、酚氨比低于对照;夏、秋梢鲜叶内含物质丰富,各生化成分含量相对高于春梢。春梢所制绿茶水浸出物、茶多酚、儿茶素、酚氨比低于对照,茶氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸以及氨基酸总量高于对照;共检测出香气成分37种,各香气类别、组分所占比例均与鄂茶1号有明显差异;感官审评表明,黄金茶1号所制绿茶苦涩味低、嫩香浓郁、滋味鲜醇淡爽,品质优于鄂茶1号。

黄金茶5个茶树品种(品系)的主要植物学特征与经济性状比较

本试验研究对5个黄金茶品种(品系)的主要植物学特征和经济性状进行比较分析,结果表明:5个品种中,保靖黄金茶1号的特征为发芽特早、氨基酸含量高;黄金茶2号的特征为芽叶绿带紫;黄金茶168号的特征为叶片水平着生,叶身内折,芽叶色泽绿;黄金茶8号的特征为大叶种品种,叶片椭圆形;黄金茶18号的特征为大叶种品种,叶片长椭圆形,芽头肥壮,毫多。5个品种发芽最早的为保靖黄金茶1号,其次依次为黄金茶168号、黄金茶2号、黄金茶18号与黄金茶8号。5个品种中,水浸出物含量最高的为黄金茶2号(40.69%),最低的为保靖黄金茶1号(38.14%);茶多酚最高的为黄金茶18号(25.42%),最低的为保靖黄金茶1号(22.28%);氨基酸含量最高的为保靖黄金茶1号(5.46%),最低的为黄金茶8号(3.85%);咖啡碱含量最高的为黄金茶168号(4.24%),最低的为黄金茶2号(3.32%)。

保靖黄金茶夏季叶部病害的调查与防控

对保靖黄金茶夏季叶部病害进行初步调查,经鉴定主要有3种,分别是茶圆赤星病、茶网饼病、茶藻斑病。并对其发生特点分别进行了客观的调查、分析,进而提出了相应的防控对策。

春剪秋控修剪技术对特早生茶树品种萌芽与产量的影响

为了进一步提高名优绿茶的品质和产量,选择保靖黄金茶1号和白毫早2个特早生茶树品种为材料,研究了春剪秋控修剪技术对萌芽和产量的影响。结果表明:采用春剪秋控修剪技术,保靖黄金茶1号和白毫早春茶一芽一叶期分别比常规修剪技术(CK)提早18.0和17.7 d,一芽二叶期分别比CK提早16.7和16.3 d;保靖黄金茶1号和白毫早的一芽一叶百芽重分别比CK高41.13%和65.67%,发芽密度分别比CK高16.79%和13.18%,春茶鲜叶产量分别比CK增产111.60%和154.47%,其中一芽一叶百芽重和春茶鲜叶产量的差异达极显著水平,春茶发芽密度的差异达显著水平。

黄金茶群体等5个品种(系)制茶品质研究

通过理化检测和感官审评,对黄金茶群体、保靖黄金茶1号、黄金茶2号、黄金茶8号和黄金茶168号等5个品种(系)主要生化成分和绿茶品质进行了研究。结果表明,黄金茶各品种(系)内含物丰富,水浸出物含量36.42%~40.17%,茶多酚含量20.79%~29.89%,游离氨基酸含量3.03%~6.31%,咖啡碱含量3.82%~4.57%,儿茶素总量8.31%~14.90%;黄金茶群体、保靖黄金茶1号、黄金茶2号、黄金茶8号和黄金茶168号依次检测出香气成分47、30、40、43种和46种,其中共性成分18种,醇类是黄金茶各品种(系)所制绿茶的主要香气组分;感官审评结果显示黄金茶群体等5个品种(系)均适制名优绿茶。

黄金茶绿茶风味轮及滋味分类模型的构建

为探究以黄金茶理化成分对滋味类型判别的可靠性,对52个湖南湘西州黄金茶绿茶进行了感官审评和理化成分检测,并构建了黄金茶绿茶风味轮和滋味类型贝叶斯(Bayes)预测模型。结果表明,感官审评可将黄金茶分为醇厚型、鲜爽型和其他型3种滋味类型;同时以茶叶理化成分为基础,主成分分析和二阶聚类分析的结果与茶叶感官审评分类结果一致;预测模型对滋味分类具有较高的准确性,其自身验证的正确率为100%,交叉验证的正确率为89.74%,外部验证正确率为92.31%,可用于黄金茶绿茶滋味类型的判别分析。该研究为黄金茶绿茶提供了一种有效的滋味类型量化方法。

特早生高氨基酸优质绿茶茶树新品种保靖黄金茶1号选育研究

对黄金茶群体进行单株选拔,经系统选种、无性繁殖,育成茶树新品种保靖黄金茶1号。多年试验结果表明,保靖黄金茶1号为特早生种,春季一芽一叶萌发期比福鼎大白茶(ck)平均早19天;产量高,比对照增产24.45%;内含物丰富,氨基酸含量高。春季一芽一叶水浸出物41.04%,氨基酸7.47%,茶多酚18.40%,咖啡碱4.29%;适制毛尖、高档名优绿茶;抗寒性、抗旱性、抗病虫性强。保靖黄金茶1号于2010年通过湖南省农作物品种审定委员会品种登记。

黄金茶红茶加工过程中香气成分及其相关酶活性的动态变化

为探究黄金茶红茶在萎凋、揉捻、发酵等加工工序中β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,β-GC)、醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)、脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX)和主要香气成分的动态变化,该研究以黄金茶一芽二叶为原料,按照红茶工艺进行加工,测定其加工过程中β-GC、ADH、LOX的活性及香气组分的变化规律。结果表明,β-GC、ADH、LOX 3种酶的活性均在萎凋工序中达到最高,随后在揉捻和发酵工序中持续下降;共检测到263种香气组分,包括53种醇、53种烯烃、70种烷烃、36种酯、14种酮、17种醛和20种其他类化合物,其中醇类和酯类物质的相对含量均远高于其他香气种类。此外,相对含量较高的香气组分有苯乙醇、香叶醇、反式-橙花叔醇、芳樟醇、水杨酸甲酯、(4 E)-4 E-己酸己酯、二氢猕猴桃内酯、苯甲醛、反-2-辛烯醛、庚二烯醛、β-环柠檬醛、α-法尼烯、(-)-α-荜澄茄油烯、顺茉莉酮、β-紫罗酮等,且黄金茶红茶香型可能属于芳樟醇及其氧化物主导型香型。该研究结果丰富了黄金茶红茶风味品质的化学基础理论,并为生产优质黄金茶红茶提供了科学依据。

黄金茶1号夏秋乌龙茶加工过程化学成分变化与品质形成分析

为研究黄金茶1号夏秋乌龙茶品质特征,以一芽三、四叶鲜叶为原料,采用固相微萃取结合气质联用(SPME/GC-MS)对挥发性成分进行测定,结合感官审评,分析其加工过程化学成分变化与品质形成。结果表明:干茶色泽青褐,汤色杏黄明亮,香气以清花香为主要特征,滋味醇和,叶底黄绿显红边。化学成分方面,从鲜叶到毛茶,茶多酚含量由16.82%降至11.61%,儿茶素总量下降了4.39%;游离氨基酸、可溶性糖总量呈波浪型变化;黄酮含量总体呈下降趋势;水浸出物含量萎凋后升高并达到最大值46.99%,最终毛茶含量为43.60%;(氨基酸+可溶性糖)/茶多酚比值毛茶最高,为0.97。加工过程共检出157种香气成分,其中醇类成分48种,碳氢类成分37种,酯类成分52种,醛类成分4种,酮类成分9种,其他类香气成分7种;其中α-法呢烯、反式-β-法呢烯和(Z,E)-α-法呢烯、芳樟醇、反式橙花叔醇、己酸己酯以及吲哚占到毛茶香气总量的69%以上,是黄金茶1号夏秋乌龙茶香气的主要组成部分。