黄连解毒汤与降脂药对ApoE^(-/-)小鼠固有免疫反应影响的比较研究

目的比较黄连解毒汤及降脂药阿托伐他汀、非诺贝特和罗格列酮对高脂饮食饲喂载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠全身固有免疫反应及主动脉局部免疫反应的影响。方法采用配对比较法将60只雌性8周龄ApoE^(-/-)小鼠分为对照、模型、阿托伐他汀、非诺贝特、罗格列酮和黄连解毒汤6组,每组10只,10只匹配的C57BL/6J小鼠为野生对照组。对照组与野生对照组小鼠给予普通饲料,模型组小鼠给予高脂饲料,给药组小鼠造模同时分别给予阿托伐他汀(3 mg/kg)、非诺贝特(33 mg/kg)、罗格列酮(0.67 mg/kg)、黄连解毒汤水煎液(5 g/kg)灌胃。4周后,每组取5只小鼠,生化检测血浆血脂水平,流式细胞仪检测外周血单核细胞比例及表面Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)和清道夫受体CD36的表达、单核细胞亚型比例,HE染色检测主动脉组织病理变化,RT-qPCR检测主动脉组织炎性细胞因子表达;余下小鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),流式微球阵列(cytometric bead array,CBA)和ELISA检测血浆细胞因子的水平。结果与野生对照组比较,对照组小鼠血浆总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)水平明显升高(P<0.01),高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)水平明显降低(P<0.01);外周血单核细胞炎症亚型Ly6C++比例升高(P<0.05),Ly6C-和Ly6C+比例降低(P<0.05);主动脉组织炎性因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、单核细胞趋化蛋白(monocyte chemotactic protein,MCP)-1和一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)-2表达升高(P<0.05);LPS刺激后,对照组小鼠血浆IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠TC、TG、HDL和LDL水平进一步升高(P<0.05);外周血单核细胞的比例增多(P<0.05),CD36的表达增加(P<0.05);主动脉组织炎性因子IL-1β、IL-12、TNF-α和NOS-2表达升高(P<0.05);LPS刺激后,血浆IL-1β、IL-12 p70和MCP-1水平升高(P<0.05)。与模型组比较,阿托伐他汀干预没有改善血脂水平(P<0.05),但降低主动脉组织炎性因子IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、MCP-1和NOS-2 mRNA表达(P<0.05)。非诺贝特干预降低HDL水平(P<0.01);LPS刺激后,降低主动脉组织IL-12、TNF-α、MCP-1和NOS-2 mRNA表达(P<0.05)。罗格列酮干预没有改善血脂水平(P>0.05),但降低外周血单核细胞及其炎症亚型Ly6C^(++)比例(P<0.05),降低主动脉组织IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α和NOS-2 mRNA表达(P<0.05);LPS刺激后,罗格列酮降低血浆IL-12 p70的水平(P<0.05)。黄连解毒汤干预并未改善血脂水平,但显著降低外周血单核细胞及其炎症亚型Ly6C^(++)比例以及TLR4和CD36在单核细胞的表达水平(P<0.05),降低主动脉组织IL-1β、IL-12和NOS-2 mRNA表达(P<0.05)。结论黄连解毒汤、阿托伐他汀、非诺贝特和罗格列酮减轻高脂血症引发的固有免疫反应,且其免疫调节作用不依赖于降脂作用。其中黄连解毒汤和罗格列酮对全身固有免疫的调控作用优于阿托伐他汀和非诺贝特。

基于网络药理学及分子对接技术探究黄连解毒汤治疗脓毒症的分子机制

目的:采用网络药理学方法和生物信息学理论,挖掘黄连解毒汤有效成分,预测黄连解毒汤治疗脓毒症的作用机制,为中医治疗该病提供理论依据。方法:利用TCMSP等数据库平台筛选黄连解毒汤有效活性成分。在Gene Card、OMIM及Disgenet数据库中获得脓毒症相关基因,结合疾病靶点及药物活性成分绘制PPI网络,对关键靶点并进行GO、KEGG富集分析以及运用Autodock软件进行关键靶点分子对接研究。结果:通过检索共筛选出黄连解毒汤有效活性成分59个,在此基础上获得206个预测靶点及关键基因;根据基因本体(gene ontology,GO)分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)结果可知,黄连解毒汤作用于该疾病主要涉及细胞因子活化、免疫和炎症相关过程激活等生物进程如肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)炎症信号通路及晚期糖基化通路(AGEs-RAGE)等。分子对接结果表明药对的活性成分可以对核心靶点(JUN和TNF)发挥调控作用。结论:黄连解毒汤治疗脓毒症作用机制是多层次、多角度的,其主要机制集中在抗炎及氧化应,为研究黄连解毒汤多成分、多靶点治疗脓毒症网络关系提供了新的研究思路。

黄连解毒汤联合葛根素对老年2型糖尿病患者糖脂、血管内皮功能及炎症因子水平的影响

目的探讨黄连解毒汤联合葛根素对老年2型糖尿病(T2DM)患者糖脂、血管内皮功能及炎症因子水平的影响。方法选取2020年2月—2023年2月铜川市耀州区孙思邈中医院收治的118例老年T2DM患者作为研究对象,根据随机数表法将其分为对照组和观察组,各59例。在常规治疗基础上,对照组给予黄连解毒汤治疗,观察组给予黄连解毒汤联合葛根素治疗。比较两组治疗前后血糖、血脂、炎症因子、血管内皮功能等实验室指标。结果治疗后,两组FPG、2 hPG、HbA1c水平均低于治疗前,且观察组2 hPG、HbA1c低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组TG、LDL-C水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),组间血脂水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均低于治疗前,且观察组低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组NO水平高于治疗前,ET-1水平低于治疗前,且观察组NO水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄连解毒汤联合葛根素在降糖、抑炎及改善内皮功能方面具有更强效力,可作为血糖控制不佳的老年T2DM患者的辅助用药。

黄连解毒汤提取物对脑缺血小鼠学习记忆的促进作用

采用避暗法和水迷宫法研究了黄连解毒汤提取物对实验性慢性脑缺血小鼠的作用。结果表明，黄连解毒汤提取物０５ｇ／ｋｇ、１０ｇ／ｋｇ能显著减少脑缺血小鼠避暗错误次数，并延长其钻洞潜伏期；提取物０５ｇ／ｋｇ、１０ｇ／ｋｇ和２０ｇ／ｋｇ均能显著增加脑缺血小鼠在水迷宫中的正确反应次数；且对脑缺血小鼠脑内丙二醛的生成有显著抑制作用。

黄连解毒汤对AD大鼠的治疗作用及对细胞因子含量的影响

目的 :探讨黄连解毒汤对老年性痴呆 (AD)的治疗作用及对细胞因子含量的影响。方法 :以 β 淀粉蛋白(Aβ)注射形成AD大鼠模型 ,以水迷宫实验进行学习记忆能力测试 ;以ELISA法测定细胞因子 :肿瘤坏死因子 (TNF α) ,干扰素 γ(INF γ) ,白介素 2 (IL 2 )变化。结果 :模型组学习记忆能力下降 ,逃避的平均潜伏期延长 ,进入盲端的错误次数增多 ;黄连解毒汤治疗后 ,学习记忆能力改善 ,P <0 .0 1;模型组TNF α ,INF γ ,IL 2含量水平较正常组增高 ,P <0 .0 1,黄连解毒汤治疗Ⅰ ,Ⅱ组则明显降低 ,P <0 .0 1。结论 :黄连解毒汤可能通过调整AD大鼠的免疫功能和增加抗炎而提高其学习记忆能力。

黄连解毒汤的化学及药理学研究进展

黄连解毒汤为清热解毒剂的代表方,由黄连、黄芩、黄柏、栀子4味药组成,具有清热、泻火、解毒之功效,主治实热火毒、三焦热盛之证。概括并归纳了该复方近年来的研究状况,包括复方相关药理学、药动学研究状况,化学研究及药效物质的探讨。

黄连解毒汤及配伍成分的降脂及抗动脉粥样硬化作用

目的:对黄连解毒汤在降脂及抗动脉粥样硬化的作用进行综合考查,探讨黄连解毒汤及其配伍成分在降脂及抗动脉粥样硬化研究上应该进一步深化的课题。方法:对近10年来的研究状况进行总体回顾,结合最新研究成果,系统阐述黄连解毒汤在降脂及抗动脉粥样硬化方面的直接和潜在的优势及作用机制。结果:临床和实验研究方面的数据表明,黄连解毒汤不仅能降低肝细胞中胆固醇的浓度,而且能治疗引起冠状动脉粥样硬化的危险因素如高血压等疾病。方中各组成成分也具有直接或间接的降脂和抗动脉粥样硬化的作用。结论:黄连解毒汤具良好的降脂和抗动脉粥样硬化的研究前景,需要用现代科学的研究手段进行深入研究,以期扩大其临床应用范围。

黄连解毒汤的抗氧化作用研究

目的 :探讨黄连解毒汤的抗氧化作用。方法 :红细胞溶血、肝匀浆 MDA生成及羟自由基生成用比色法测定。结果 :黄连解毒汤体外给药能明显抑制红细胞自氧化或 H2 O2 所致红细胞溶血 ,并抑制小鼠肝匀浆自发性或 Fe2 + -Vit C诱发的脂质过氧化反应。对 H2 O2 所产生的羟自由基亦有直接的清除作用。结论 :黄连解毒汤对血细胞和组织细胞具有膜保护作用。

黄连解毒汤醇提物预防给药对MDR模型小鼠相关基因表达产物的影响

目的:观察黄连解毒汤70%醇提物预防给药对小鼠多药耐药(MDR)基因表达产物P170、肺耐药蛋白(LRP)和拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)的影响,探讨其干预MDR的分子生物学基础,指导临床应用以预防MDR的产生。方法:小鼠随机分为非耐药模型组、耐药模型组、黄连解毒汤70%醇提物100,50mg·kg^(-1)组,模拟临床PFC方案,建立小鼠S180肿瘤细胞多药耐药在体模型,同时给予黄连解毒汤70%醇提物4周,流式细胞仪荧光检测P170,LRP,TOPOII。结果:黄连解毒汤70%醇提物明显降低化疗诱导后耐药细胞P170,LRP的表达率和ROPOII活性。结论:黄连解毒汤70%醇提物可通过对相关生物活性物质的调节,干预和逆转化疗诱发的肿瘤MDR的产生。

黄连解毒汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注后的保护作用及其对caspase-3表达的影响

目的观察黄连解毒汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的保护作用及其对caspase-3表达的影响。方法雄性Wistar大鼠104只随机分为假手术组、手术对照组和黄连解毒汤组及阳性对照组。后3组又根据再灌注时间的不同各分为1 h2、4 h4、8 h、7 d 4个小组。线栓法制作脑缺血-再灌注损伤模型。缺血2 h分别再灌注1 h、24 h4、8 h7、d后断头取脑,应用TUNEL染色及SP免疫组织化学方法观察并测定梗死灶体积、凋亡细胞数及caspase-3的表达。结果假手术组未发现脑梗死灶和凋亡细胞及caspase-3阳性表达。黄连解毒汤组较手术对照组脑梗死体积显著缩小(P<0.05),凋亡细胞数减少(P<0.05),caspase-3表达减弱(P<0.05)。结论黄连解毒汤通过下调caspase-3的表达抑制脑细胞凋亡,具有脑保护作用。

黄连解毒汤防治2型糖尿病研究进展

黄连解毒汤是清热解毒的代表方,具有泻火解毒之功效。近些年研究发现黄连解毒汤具有降糖和调脂等功效,是治疗糖尿病合理、有效的方药。综合近年来的研究状况,从其抗炎、抗氧化、多靶点改善胰岛素抵抗等作用方面进行综述。

黄连解毒汤对尼莫地平在大鼠脑内处置动力学的影响

目的在整体和离体水平上研究黄连解毒汤对尼莫地平脑处置动力学的影响。方法测定大鼠单独给予尼莫地平以及尼莫地平与黄连解毒汤合用的血浆、脑组织中的尼莫地平经时过程,并在离体水平上采用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(rBMEC)模型考察ig黄连解毒汤后的大鼠血清、黄连解毒汤中的指标成分黄芩苷和小檗碱对尼莫地平在血脑屏障上转运的影响。结果整体实验中,合用黄连解毒汤组,尼莫地平在血浆和脑组织中的Cmax和AUC均显著高于单独给予尼莫地平组;离体实验中,ig黄连解毒汤后的大鼠血清、黄芩苷(5μg/mL)、小檗碱(>10ng/mL)促进rBMEC对尼莫地平的摄取,小檗碱(10ng/mL)对尼莫地平的摄取没有影响。结论在合用黄连解毒汤时,尼莫地平在大鼠血浆和脑组织中的药动学行为均发生改变;合用组尼莫地平在大鼠脑组织中分布增加,可能部分源于黄连解毒汤中黄芩苷的作用。

基于单抗的间接竞争ELISA检测黄连解毒汤中栀子苷在小鼠体内的代谢

目的：应用自主研制的栀子苷单克隆抗体建立的间接竞争ELISA（icELISA）法，检测黄连解毒汤灌胃给药后小鼠体内栀子苷的含量，分析药代动力学参数。方法：icELISA方法学验证；小鼠给药后分17个时间点取血，10μl／只，icELISA法检测栀子苷。结果：该方法的线性范围是1．17—37．5μg／ml，最低检测限0．14～0．45μg／ml，最低定量检测限1．17μg／ml；日内和日间精密度均≤10％；回收率96．38％-103．38％；栀子苷含药血浆样品室温放置12h稳定性好。本实验测得的栀子苷在小鼠体内的达峰时间和平均滞留时间与文献报道基本～致。结论：基于栀子苷单克隆抗体的icELISA法能够高通量、快速、准确检测生物样品中栀子苷，具有良好的应用前景。

交泰丸等4首不同方剂对2型糖尿病大鼠治疗作用的比较研究

目的:比较白虎加人参汤(BHJRST)、黄连解毒汤(HLJDT)、六味地黄丸(LWDHW)和交泰丸(JTW)对高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)致2型糖尿病大鼠模型的药效作用。方法:4周龄SD大鼠高糖高脂饲料喂养5周后腹腔注射小剂量STZ(40 mg/kg)制备2型糖尿病模型,分为BHJRST、HLJDT组、LWDHW组和JTW组、模型组,并设正常组作对照,连续灌胃21 d。记录各组大鼠饮食量、体质量、空腹血糖(FBG)的动态变化,实验末检测血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)、三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、胰岛素(insulin,INS)的变化,计算胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI),并观察胰岛组织病理与超微结构变化。结果:与正常组比较,模型组体质量明显下降,饮水量、摄食量增加(P<0.01),FBG和FFA、TG升高(P<0.05),INS与ISI降低(P<0.05),形态学显示胰岛及β细胞结构严重破坏。与模型组比较,JTW组FBG、FFA、TG水平明显降低(P<0.05),ISI明显升高(P<0.05),胰岛结构及β细胞形态改善;而LWDHW组饮水、进食量减少(P<0.05),血清FFA明显降低(P<0.05),ISI明显升高(P<0.01),胰岛β细胞形态亦有所改善。结论:JTW、LWDHW对2型糖尿病大鼠模型具有明显保护作用,不同方剂对同一疾病可能存在不同的作用特点和机制。

黄连解毒汤化学成分及药物动力学研究现状

黄连解毒汤是中医临床的1种代表性方剂,对于多种病症具有确切的疗效。近年来,国内外学者对黄连解毒汤的化学成分和药物动力学进行了较深入的研究,从中分离出大量的化合物,对于阐明黄连解毒汤的药效物质基础和体内作用机制具有重要的意义。该文对近年来黄连解毒汤的化学成分和药物动力学研究成果作一综述。

黄连解毒汤对大鼠营养性肥胖的影响

目的:观察黄连解毒汤低、中、高剂量组给药时间长短对营养性肥胖大鼠的影响。方法:100只SD雄性大鼠按体重随机分为正常组、模型组、黄连解毒汤组(高、中、低剂量组),每组20只,除正常组外,其余各组用"高脂乳剂+碳酸饮料+普通饲料"混合喂养造大鼠营养性肥胖模型,连续3周,3周后分别于给药22d、42d,每组各处理10只大鼠,分离血清,剥离肾及生殖器周围脂肪组织,检测血清GLU、TG、TC、HDL-C、LDL-C和脂肪组织CEBPα含量,计算脂肪指数。结果:与模型组比较,各给药组可明显降低肥胖大鼠体重、脂肪指数,明显升高肥胖大鼠HDL-C水平,其中黄连解毒汤中剂量组能明显降低TG、TC、LDL-C、CEBPα水平。以上结果均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连解毒汤对大鼠营养性肥胖具有一定的干预作用,其中中剂量组作用尤为突出,除HDL-C,对其它指标的影响给药时间均不宜过长。

俞长荣教授治疗高血压病的经验

俞长荣教授认为高血压病血压的升高与内脏功能的失调有一定关联，阴阳、气血紊乱是高血压病的主要发病因素。对本病的治疗应该根据中医临证思维方法，通过辨证论治，以求从根本上解除高血压病的内在因素。使用中药降压不能依赖实验室结果选择降压药，要跳出＂见病套药＂的框子，不能简单地使用平肝降火，养阴凉血药物。

加味黄连解毒汤联合西药治疗幽门螺杆菌感染性胃溃疡临床研究

目的:观察加味黄连解毒汤联合西药治疗幽门螺杆菌感染性胃溃疡的临床疗效及对血清炎症因子的影响。方法:将幽门螺杆菌感染性胃溃疡患者114例,按照随机数字表法分为2组,各57例。对照组应用甲硝唑、阿莫西林胶囊、西咪替丁片治疗,观察组在对照组的基础上加用加味黄连解毒汤治疗。2组均治疗4周,观察比较2组临床疗效及不良反应,2组治疗前后血清白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-17 (IL-17)及干扰素-γ(IFN-γ)水平变化。结果:观察组总有效率为91.22%,对照组为75.43%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组血清IL-6、IL-17水平均较治疗前降低(P<0.05),IFN-γ水平较治疗前升高(P<0.05);且观察组各项指标改善较对照组更显著(P<0.05)。观察组不良反应发生率为5.26%,对照组为5.26%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味黄连解毒汤联合西药治疗幽门螺杆菌感染性胃溃疡疗效显著,可有效减轻患者炎症反应,效果优于单纯西药治疗。

黄连解毒汤对过氧化氢诱导大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的:观察黄连解毒汤有效部位(HLJDTAF)对培养皮层神经细胞过氧化氢损伤的保护作用。方法:体外培养新生大鼠皮层神经细胞,加入过氧化氢观察其对神经细胞的损伤及HLJDTAF的保护作用。结果:HLJDTAF 610,305 mg·kg-1可减少模型乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,305 mg·kg-1还可提高模型细胞活性(P<0.05;P<0.01)。同时HLJDTAF各剂量均可减少丙二醛生成,153 mg·kg-1还可减少一氧化氮生成。结论:HLJDTAF对培养神经细胞自由基损伤具有显著的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关。

黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂中小檗碱的药动学的比较

目的比较黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂中盐酸小檗碱的药动学行为的一致性。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温:35℃;流速1 mL.min-1;流动相为甲醇-0.05 mol.L-1KH2PO4-冰醋酸(40∶60∶1,v/v),检测波长为345 nm。结果灌胃低、中、高剂量组的2种汤剂后,大鼠血浆中小檗碱Cmax分别为:1.952和2.195μg.mL-1,3.188和3.388μg.mL-1,4.10和4.54μg.mL-1;AUC0～∞分别为:10.468和11.841μg.h.mL-1,18.50和20.9μg.h.mL-1,23.16和25.20μg.h.mL-1;tmax均为3.0 h。结论经统计分析,2种汤剂中盐酸小檗碱的Cmax、tmax、AUCo～∞以及药时曲线均无显著差异性,显示小檗碱在2种汤剂中的药动学过程无显著性差异。