黄连散改善特应性皮炎模型小鼠皮肤屏障及抗炎作用机制

目的:探讨黄连散对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的特应性皮炎(AD)模型小鼠的治疗作用。方法:将42只雄性BALB/c小鼠,随机分为正常组、模型组、氢化可的松组、黄连散油剂低、中、高剂量(0.3、0.6、1.2 g·kg^(-1))组、黄连散水提液(0.6 g·kg^(-1))组。除正常组外,其余组均于小鼠背部涂抹DNCB以建立AD模型。在DNCB刺激后的第15天各组给予相应药物或溶剂,观察并记录小鼠皮损变化、皮炎评分、抓挠次数;苏木素-伊红(HE)染色观察皮肤和脾脏组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测皮肤中丝聚蛋白(FLG)、兜甲蛋白(LOR)、内披蛋白(IVL)及脾脏免疫球蛋白E(lgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的mRNA水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠皮肤出现红肿、结痂等症状,皮炎评分、抓挠次数和脾脏指数均上升(P<0.05),皮肤组织中FLG、LOR、IVL的表达水平显著降低(P<0.01),脾脏中IgE、IL-4、IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达量显著升高,IFN-γ的表达量显著降低(P<0.01);与模型组比较,各药物组小鼠皮肤红斑、鳞屑及结痂等症状均有不同程度减轻,皮炎评分、抓挠次数及脾脏指数有所下降(P<0.05,P<0.01);此外,药物组小鼠皮肤中FLG、LOR、IVL的表达水平升高(P<0.05,P<0.01),脾脏中IgE、IL-4、IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达量减少,IFN-γ升高(P<0.05,P<0.01),皮肤和脾组织病变情况均有不同程度改善,以黄连散油剂中剂量组和氢化可的松组最为明显(P<0.05,P<0.01);且黄连散油剂中剂量组各指标均优于黄连散水提液组。结论:黄连散可能通过上调皮肤屏障蛋白表达水平,抑制辅助性T细胞2(Th2)相关炎症因子表达,提高辅助性T细胞1(Th1)炎症因子表达,恢复皮肤屏障功能及脾脏中Th1/Th2平衡,抑制AD小鼠脾脏组织炎症反应,从而缓解AD;黄连散油剂比水剂效果更佳。