化痰降气胶囊对COPD模型大鼠支气管上皮细胞中多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响

目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,观察化痰降气胶囊对支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1(MRP1)功能和表达的影响,探讨化痰降气胶囊治疗COPD的作用机制。方法雄性Wistar大鼠24只随机分为正常对照组、模型组和化痰降气胶囊组(简称化痰降气组)。除正常对照组外,其余各组采用烟、二氧化硫定量熏吸并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法,建立COPD大鼠模型;观察化痰降气胶囊治疗后肺功能指标、支气管肺泡灌洗液细胞计数与分类、大鼠的肺组织病理学改变,并采用ELISA方法测定肺组织中白三烯C4(LTC4)的浓度及免疫组化测定肺支气管上皮MRP1的表达。结果 (1)模型组大鼠的肺顺应性(CL)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3%)/用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值、最大呼气中段流量较正常对照组显著降低(P<0.05)。化痰降气组上述肺功能指标较模型组明显升高(P<0.05)。(2)模型组气道炎症加重,且出现明显肺气肿;化痰降气组也出现了炎症和肺气肿,但程度较轻。(3)与正常对照组比较,模型组及化痰降气组肺组织中的LTC4均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组中肺组织的LTC4显著下降(P<0.05)。(4)与正常对照组比较,模型组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著增强(P<0.05)。结论化痰降气胶囊可能通过影响慢性阻塞性肺疾病状态下MRP1功能和表达,从而达到有效减轻COPD大鼠的气道炎症,延缓肺功能恶化等COPD发生和发展的目的。

化痰降气胶囊对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠影像学的影响

目的 :探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)模型大鼠及化痰降气胶囊治疗后影像学的变化。方法 :采用气管内注入脂多糖加熏香烟复合刺激法复制大鼠COPD模型。治疗组 4周后给药 ,6周后各组摄片。结果 :呼吸频率各组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 ) ;各组横膈前肋、横膈后肋、肋间隙积分比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1 ) ;横膈前肋积分 ,模型组与治疗组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :COPD大鼠有明显的肺气肿影像学表现 。

化痰降气胶囊化痰、止咳、平喘的实验研究

目的初步探讨化痰降气胶囊化痰止咳平喘的功效。方法化痰降气胶囊按小鼠剂量3.8 g生药.kg-1,7.5 g生药.kg-1,15 g生药.kg-1,大鼠和豚鼠剂量2.9 g生药.kg-1,5.8 g生药.kg-1,11.6 g生药.kg-1ig给药,观察化痰降气胶囊的化痰、止咳、平喘作用。结果化痰降气胶囊能明显促进小鼠酚红分泌量,增加大鼠痰液排出量,显著减少浓氨水致小鼠咳嗽次数,延长咳嗽潜伏期,显著减少枸橼酸喷雾致豚鼠咳嗽次数,延长氯化乙酰胆碱和组胺混合液喷雾引喘豚鼠潜伏期。结论化痰降气胶囊具有化痰止咳平喘的作用。

化痰降气胶囊治疗实验性慢性支气管炎病理观察

目的:初步观察化痰降气胶囊对大鼠实验性慢性支气管炎的治疗作用。方法:实验分组为化痰降气胶囊高、中、低剂量组(0.140,0.070,0.035 g/ml),桂龙咳喘宁组(0.53 g/kg),假手术组,模型组,气管注射脂多糖复制大鼠慢性支气管炎模型,光镜下观察化痰降气胶囊给药组大鼠的病理组织学改变。结果:化痰降气胶囊给药组大鼠的病理组织学指标明显改善,可减轻纤毛上皮脱落,减少杯状细胞增生和炎细胞浸润等症状,高剂量组效果优于中、低剂量组。结论:化痰降气胶囊对实验性慢性支气管炎大鼠具有治疗作用。

化痰降气胶囊制备工艺研究

目的:优选化痰降气胶囊最佳制备工艺。方法:采用正交试验法,以浸膏得率及盐酸麻黄碱含量为指标,优选药材乙醇提取工艺;以挥发油含量为提取工艺筛选指标;以挥发油利用率和包合物收率为包合工艺评价指标。结果:药材提取最佳工艺为:以70%乙醇为提取溶媒,加液量8倍,提取2次,时间分别为2h,1h;挥发油最佳提取条件搭配为:10倍水,浸泡1 h,提取4h,当归挥发油包合最佳工艺为:每1ml挥发油用10gβ-环湖精(β-CD),100ml水,60℃搅拌包合2h。结论:正交试验法为制备化痰降气胶囊提供依据。

化痰降气胶囊抗炎免疫作用研究

目的观察化痰降气胶囊的抗炎免疫作用。方法化痰降气胶囊按小鼠剂量3.8、7.5、15g原药材/kg、大鼠剂量2.9、5.8、11.6g原药材/kg灌胃给药,观察化痰降气胶囊对二甲苯致小鼠耳肿胀度,大鼠肉芽组织增生以及小鼠的脏器系数和游泳时间的影响。结果化痰降气胶囊具有显著抗炎作用,能显著降低二甲苯致炎小鼠耳肿胀度,降低大鼠皮下注射琼脂生长的肉芽肿重量。化痰降气胶囊还能提高小鼠脾脏和胸腺脏器系数,延长小鼠游泳时间。结论化痰降气胶囊具有抗炎免疫的作用。

基于Notch通路研究化痰降气胶囊含药血清对人支气管上皮细胞MRP1的影响

目的基于Notch通路探讨化痰降气胶囊含药血清对人支气管上皮细胞(16HBE)中多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达和外排功能的影响。方法根据血清药理学的方法制备化痰降气胶囊含药血清和空白血清,然后将含药血清分为5%、10%、15%、20%4个浓度对16HBE细胞进行干预,CCK-8法检测细胞增殖率筛选出最佳作用浓度;细胞分为空白血清组、香烟烟雾提取物(CSE)+空白血清组、CSE+含药血清组、化痰降气胶囊含药血清组、Notch通路抑制剂DAPT+空白血清组、DAPT+含药血清组,用Western Blot法检测各组Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达;以5-羧基二乙酸荧光素(5-CFDA)为底物,采用流式细胞术检测细胞内荧光强度的变化评价MRP1的外排功能;免疫荧光法检测Notch1的胞内段(NICD)核移位活性。结果化痰降气胶囊含药血清的最佳作用浓度为15%。与空白血清组比较,含药血清组Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达呈浓度依赖性升高(P<0.05,P<0.01),MRP1转运体的外排能力明显提高(P<0.01),细胞核内NICD的荧光强度有所增强;而CSE+空白血清组蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与CSE+空白血清组比较,CSE+化痰降气胶囊含药血清组的Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01);与化痰降气胶囊含药血清组比较,DAPT+化痰降气胶囊含药血清组的Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),MRP1的外排能力也降低(P<0.01),胞质胞核荧光强度均减弱。结论化痰降气胶囊含药血清可能通过Notch通路上调16HBE细胞中MRP1的表达和外排功能,这可能是其治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用机制之一。

病理与生理状态下化痰降气胶囊大鼠血清移行成分对比研究

采用UPLC-Q-TOF-MS技术,分析化痰降气胶囊在生理和慢性阻塞性肺疾病(COPD)状态下大鼠的移行成分及其体内代谢过程的差异。通过烟熏复合气管滴入脂多糖法建立COPD大鼠模型,分别给予正常和模型大鼠化痰降气胶囊,灌胃给药,肝门静脉采血,经样品处理后,制得含药血清样品。将制得的10批化痰降气胶囊含药血清样品,进行UPLC分析,评价含药血清的质量稳定性。运用UPLC-Q-TOF-MS,进行移行成分质谱信息采集。该研究鉴定了正常大鼠化痰降气胶囊血清移行成分28个,COPD模型大鼠化痰降气胶囊血清移行成分25个,两者既存在相同移行成分,也存在差异移行成分;进一步研究发现2种状态下大鼠的移行成分的体内代谢过程也存在差异,在正常大鼠中,移行成分的代谢类型多以Ⅰ相反应居多,在COPD模型大鼠中,Ⅰ相反应相应减少,Ⅱ相反应相应增加。该研究借助UPLC-Q-TOF-MS技术,分析了在生理和病理状态下化痰降气胶囊的大鼠血清移行成分及其体内代谢过程的差异,表明在COPD病理状态下,血清移行成分会出现差异,体内一些代谢酶的活性会发生改变,进而影响药物在体内的代谢转化过程,为进一步阐明化痰降气胶囊的体内代谢过程及药效物质基础奠定了基础。