不同煎煮方式和饮片炮制的化痰祛湿活血方药理活性对比研究

目的研究饮片炮制和煎煮方式对化痰祛湿活血方(Huatan Qushi Huoxue Prescription,HQHP)治疗非酒精性脂肪型肝炎(NASH)药效的影响。方法实验将SD大鼠随机分为8组:空白组、模型组、易善复组(西药阳性组)、强肝胶囊组(中药阳性组)、原方混煎组、原方单煎组、炮制混煎组、炮制单煎组,采用微板法检测血清TC、TG、GGT、ALT、AST、ALP水平,Western blot法检测肝脏ADPN、NF-κB、Akt、P-Akt、P-NF-κB水平。结果炮制前后、不同煎煮方式的HQHP均能够降低NASH大鼠血清TC、TG、GLU、ALT、AST、ALP水平(P<0.05);与原方比较,炮制后大鼠血清水平均明显降低(P<0.05),与单煎组比较,混煎组大鼠血清TC、TG、ALT水平均显著降低(P<0.05)以炮制混煎组最优。另外,与模型组比较,各治疗组大鼠均能降低NF-κB、p-NF-κB水平、升高ADPN、Akt、P-Akt水平;炮制后各实验组疗效优于原方组,混煎组优于单煎组,以炮制混煎组最优。结论饮片炮制和汤剂煎煮方法对复方药理作用有一定影响,饮片炮制和复方传统混合煎煮可以提高药理活性,为化痰祛湿活血方在临床上如何煎煮和选用炮制品提供了实验依据。

化痰祛湿活血方含药血清对HepG 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制能力及脂肪代谢相关基因表达的影响

目的探讨化痰祛湿活血方治疗慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的可能作用机制。方法60只SD大鼠随机分为恩替卡韦组、化痰祛湿活血方组、联合组和正常组,每组15只。恩替卡韦组给予恩替卡韦分散片0.5mg/(kg·d)灌胃,化痰祛湿活血方组给予化痰祛湿活血方颗粒剂15g/(kg·d)灌胃,联合组给予恩替卡韦分散片和化痰祛湿活血方颗粒剂灌胃,剂量同上,正常组给予正常饲料喂养,10天采血制备含药血清。细胞实验分为对照组、模型组、恩替卡韦血清组、化痰祛湿活血方血清组、联合血清组、激动剂组、联合+激动剂组,每组3个复孔。除对照组外,其余各组均用浓度50μmol/L油酸处理HepG 2.2.15细胞建立CHB合并NAFLD细胞模型。造模后对照组和模型组给予10%正常大鼠血清,恩替卡韦血清组、化痰祛湿活血方血清组、联合血清组给予10%相应血清,激动剂组给予10%大鼠正常血清+T0901317,联合+激动剂组给予10%联合血清+T0901317。培养48h后比较各组细胞活力、细胞凋亡率,检测细胞中肝X受体a(LXRa)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)mRNA表达和细胞培养上清液中乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量。结果模型组和对照细胞活力和细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,恩替卡韦血清组细胞活力升高、细胞凋亡率降低,而激动剂组细胞活力降低、细胞凋亡率升高(P<0.01),化痰祛湿活血方血清组和联合血清组细胞凋亡率降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,模型组LXRa mRNA降低、HBV DNA含量升高(P<0.01);与模型组比较,化痰祛湿活血方血清组和联合血清组SREBP-1c mRNA降低,恩替卡韦血清组和联合血清组HBV DNA含量降低(P<0.01);激动剂组LXRa、SREBP-1c、FAS mRNA和HBV DNA含量均高于联合血清组,而联合+激动剂组LXRa、SREBP-1c mRNA低于激动剂组(P<0.01)。结论化痰祛湿活血方可能通过调控脂代谢相关基因表达影响肝细胞内脂肪合成,从而增强恩替卡韦抑制HBV DNA复制能力。