健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗治疗克罗恩病患者疗效及对肠道菌群的影响

目的探讨健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗对克罗恩病患者疗效及肠道菌群的影响。方法选取94例克罗恩病患者,使用随机数字表法分成观察组与对照组各47例。对照组给予英夫利昔单抗。在此基础上,观察组口服健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗治疗。比较治疗前后两组患者主要中医证候评分、粪便中肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、肠杆菌)数量、血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平。结果所有患者均顺利完成该次研究,无脱落病例。观察组总有效率95.74%(45/47),高于对照组[82.98%(39/47)],差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组腹痛拒按、腹泻急迫、腹胀、神疲乏力等证候积分降低,而且观察组积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组血清TNF-α、CRP水平降低,而且观察组水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组双歧杆菌、乳酸杆菌数量升高,肠球菌、肠杆菌数量降低,而且观察组双歧杆菌、乳酸杆菌数量高于对照组,肠球菌、肠杆菌数量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾解毒化瘀方联合英夫利昔单抗应用于克罗恩病整体疗效确切,促进腹痛等症状的缓解,减轻肠黏膜炎症状态,其作用可能与其显著纠正肠道菌群失衡、改善肠黏膜屏障功能有关。

益气化瘀解毒方治疗慢性阻塞性肺疾病网络药理学及生物信息学研究

目的 通过网络药理学及生物信息学技术探讨益气化瘀解毒方治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)潜在作用机制。方法 采用TCMSP和TCMIP数据库检索益气化瘀解毒方的活性成分及靶点;经GeneCards、TTD、DrugBank、OMIM、DisGeNET数据库等筛选COPD疾病靶点,并于基因表达综合数据库(GEO)中下载并分析芯片GSE130928和GSE5058数据集,筛选出COPD患者与健康人的差异基因;运用Venny2.1平台获取益气化瘀解毒方与疾病的交集靶点,导入Cytoscape3.9.1软件分析益气化瘀解毒方治疗COPD的核心活性成分;通过STRING数据库构建PPI网络并得出该网络的核心靶点;借助Metascape数据库对共同靶点及差异基因进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析;运用Autodock Tools和Pymol软件将核心靶点蛋白与核心活性成分进行分子对接加以验证。结果 该研究共得到益气化瘀解毒方176种活性成分,中药靶点478个,疾病靶点15 256个,关键“方-病”靶点400个;益气化瘀解毒方治疗COPD的核心活性成分包括槲皮素、木犀草素、山柰酚、黄芩黄酮Ⅱ、异鼠李素等;PPI网络中潜在核心靶点有MAPK3、AKT1、TP53、MAPK1、HSP90AA1、JUN等;GO富集分析得到生物学过程1154个、细胞组成137个和分子功能135个,条目主要分布于氧化应激、营养代谢、细胞膜结构及蛋白结合活性等内容;KEGG通路富集分析主要涉及AGE-RAGE、cAMP、NF-κB信号通路等,与炎症、氧化应激、新陈代谢关系密切。分子对接结果均显示结合所需能量较低,亲和力较强,能形成稳定构象。结论 研究初步探讨了益气化瘀解毒方治疗COPD的潜在作用机制,表明该方具有多成分、多靶点、多通路的药效特点,将为今后相关研究提供新的思路和依据。

祛浊化瘀方治疗痛风性关节炎的作用及机制研究

目的探索祛浊化瘀方治疗痛风性关节炎作用及机制。方法通过TCMSP、GeneCards、DisGeNET、MalaCards、DAVID6.7等数据库,筛选出祛浊化瘀方的核心成分及核心靶点。通过GEO数据库获得痛风性关节炎模型小鼠基因数据,筛选样本之间的差异表达基因,GO分析以及KEGG信号通路富集分析共同的差异基因。分析痛风性关节炎组与正常组当中免疫细胞浸润情况,比较差异相关性。与网络药理学信号通路结果进行对比验证,综合得到的结果以确定作用靶点,并通过动物实验验证。结果网络药理学发现白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是与痛风性关节炎相关密切的核心靶点。基于GEO数据库的差异表达基因分析,白细胞迁移、趋化,产生细胞因子、中性粒细胞迁移在内的多个生物过程,经由NF-κB路径的TNF-α信号通路等多个炎症信号通路参与痛风性关节炎,与网络药理学所得结果基本一致。通过免疫细胞浸润分析发现固有免疫细胞如中性粒细胞、巨噬细胞是主要的参与痛风性关节炎炎症反应的免疫细胞类型。动物实验结果显示:祛浊化瘀方能够降低痛风性关节炎模型组织局部IL-1β、TNF-α、IL-6表达,减少中性粒细胞胞外诱捕网的形成。结论祛浊化瘀方可能通过多成分、多靶点和多通路抑制炎症反应防治痛风性关节炎。

化瘀祛痰方对痰瘀互结证急性冠脉综合征患者血小板功能及活性的影响

目的 探讨影响痰瘀互结证急性冠脉综合征(Acme coronary syndrome, ACS)患者血小板功能及活性的相关因素及化瘀祛痰方对其的作用。方法 前瞻性开放标签招募2022年6月—2023年6月就诊于辽宁中医药大学附属医院心内科,符合痰瘀互结证ACS诊断标准同时服用双联抗血小板聚集药物患者50例为研究对象,给予化瘀祛痰方治疗4周。检测化瘀祛痰方治疗前后血小板压积(Plateletcrit, PCT)、花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)最大聚集率、二磷酸腺苷(Adenosinediphosphate, ADP)最大聚集率、血小板活化标记物全血P选择素CD62p、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物PAC-1水平,探讨化瘀祛痰方对其的作用。同时采用Pearson、Spearman相关系数分析探讨血小板功能及活性参数与ACS重要危险因素:吸烟史、体质量指数(Body Mass Index, BMI)、血脂水平、2型糖尿病病史、高血压病病史的相关性。结果 1.化瘀祛痰方治疗后,痰瘀互结证ACS患者血清总胆固醇(Total Cholesterol, TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein, LDL-C)水平明显下降,载脂蛋白A1(Apoprotein A1,APO-A1)水平明显上升,差异有统计学意义(P<0.01);血清甘油三酯(Triglycerides, TG)、载脂蛋白B(Apoprotein B,APO-B)、脂蛋白A[Lipoprotein(a),LPa]水平呈下降趋势,高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein, HDL-C)水平呈上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。2.化瘀祛痰方治疗后,痰瘀互结证ACS患者血小板压积减低,AA最大聚集率下降,CD62p、PAC-1含量降低,差异有统计学意义(P<0.01);ADP最大聚集率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。3.吸烟史、BMI、血脂水平与AA、ADP最大聚集率、CD62p、PAC1、血小板压积均无明显关系;2型糖尿病病史与血小板压积之间存在显著相关关系(P<0.05),且为正相关;高血压病病史与AA最大聚集率、CD62p之间存在显著相关关系(P<0.05),且均为正相关。结论 化瘀祛痰方能够一定程度上降低痰瘀互结证ACS患者血小板聚集功能及活性,发挥其防治痰瘀互结证ACS的作用。吸烟史、BMI以及血脂水平与痰瘀互结证ACS患者血小板聚集功能及活性均无明显相关性。2型糖尿病病史与痰瘀互结证ACS患者血小板压积之间存在正相关。高血压病病史与痰瘀互结证ACS患者AA最大聚集率、CD62p之间存在正相关。

化瘀祛痰方干预糖酵解途径对高脂血症大鼠肝脏脂质沉积的影响及机制研究

目的探讨化瘀祛痰方干预肝脏糖酵解途径对高脂血症大鼠肝脏脂质沉积的影响及机制。方法将24只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组和化瘀祛痰方组,每组8只。正常组给予基础饲料喂饲,模型组和化瘀祛痰方组给予高脂饲料喂养制备高脂血症模型。造模时间为4周,造模结束后灌胃给药4周。化瘀祛痰方组给予化瘀祛痰方10 mL/(kg·d)灌胃,其余两组给予等量生理盐水。全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;HE及油红O染色观察大鼠肝脏组织形态学改变;ELISA法检测糖酵解关键酶己糖激酶-II(HK-II)、磷酸果糖激酶(PFKM)及丙酮酸激酶(PKM2)活性;用蛋白免疫印迹法(Western Blot法)检测肝脏HK-II、PFKM、PK、cleaved-caspase3、cleaved-PARP、Bax、Bcl2蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肝脏HK-II、PFKM、PKM2、cleaved-caspase3、cleaved-PARP、Bax、Bcl2 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著升高,HDL-C含量有下降趋势;HE染色显示大鼠的肝细胞肿胀明显,肝细胞脂肪变性;油红O染色显示胞浆内含有大量脂肪空泡蓄积;肝脏HK-II、PFK、PKM2活性降低;肝脏组织HK-II、PFKM、PKM2蛋白及mRNA表达降低,cleaved-caspase3、cleaved-PARP、Bax/Bcl2蛋白及mRNA的表达增高;与模型组比较,化瘀祛痰组大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著降低,HDL-C含量有升高趋势。肝脏HK-II、PFKM、PKM2活性升高。肝脏组织HK-II、PFKM、PKM2蛋白及mRNA表达升高,cleaved-caspase3、cleaved-PARP、Bax/Bcl2蛋白及mRNA的表达降低;肝细胞形态恢复或者部分恢复,胞浆内脂滴含量明显减少。结论化瘀祛痰方可能通过调控糖酵解途径,抑制肝脏细胞凋亡,减轻肝脏细胞脂质沉积,进而防治高脂血症。

健脾祛痰化瘀方调节miR-155/Rheb/mTOR途径介导内皮细胞自噬防治动脉粥样硬化机制研究

目的探讨健脾祛痰化瘀方调节miR-155/Rheb/mTOR途径介导内皮细胞自噬防治动脉粥样硬化(atherosclerotic,AS)的机制。方法将40只ApoE小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,8只C57BL/6 Cnc小鼠作为正常组。除正常组给予基础饲料外,其余各组给予高脂饲料。造模12周后,灌胃给药,正常组与模型组给予相应体积的生理盐水,阿托伐他汀组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组给予相应药物。4周后全自动生物化学分析仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;HE染色观察主动脉病理及斑块变化情况;采用透射电镜观察主动脉自噬体超微结构的变化;实时荧光定量Q-PCR法检测miR-155、LC3、Rheb、GAPDHmRNA的表达;采用Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统检测LC3、Rheb、p70s6k、p-p70s6k、mTOR、p-mTOR及β-actin蛋白的表达。结果与正常对照组相比,模型组ApoE小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平均显著升高,HDL-C水平显著下降(P<0.01);HE染色结果显示模型组小鼠主动脉管腔中斑块面积范围较大、程度较重;电镜结果显示模型组小鼠主动脉超微结构自噬小体增多;模型组ApoEAS小鼠主动脉LC3-I、LC3-II、miR-155 mRNA表达显著下调(P<0.01),Rheb mRNA表达显著升高(P<0.01);模型组ApoEAS小鼠主动脉LC3-II/LC3-I显著下降(P<0.01),Rheb、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K蛋白表达显著升高(P<0.01)。经阿托伐他汀和健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组治疗后,与模型组相比,阿托伐他汀组以及健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组血清中TG、TC、LDL-C水平均发生显著性降低(P<0.01),HDL-C水平无明显变化趋势;HE染色结果显示阿托伐他汀和健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组小鼠主动脉管腔中斑块面积范围明显减小、程度明显减轻;电镜结果显示阿托伐他汀和健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组小鼠主动脉超微结构显示自噬小体减少;阿托伐他汀组以及健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组LC3-I、LC3-II、miR-155mRNA表达显著上调(P<0.01或P<0.05),Rheb mRNA表达显著下调(P<0.01或P<0.05);阿托伐他汀组以及健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组LC3-II/LC3-I表达有所上调(P<0.01或P<0.05),Rheb、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K蛋白表达显著下调(P<0.01或P<0.05)。结论健脾祛痰化瘀方可能通过调节miR-155/Rheb/mTOR途径介导内皮细胞自噬从而达到防治AS的作用。

活血化瘀方联合视网膜光凝术对瘀血阻络型糖尿病视网膜病变疗效观察

目的研究活血化瘀方联合视网膜光凝术对瘀血阻络型糖尿病视网膜病变治疗疗效影响。方法研究对象选取医院收治的瘀血阻络型糖尿病视网膜病变患者112例,采用随机数字表法将其分为对照组和观察者,每组各56例。对照组患者接受视网膜光凝术治疗,在此基础上,观察者患者给予活血化瘀方治疗。比较两组患者的治疗疗效,同时比较两组患者治疗前后的血清血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)及血浆内皮素-1(ET-1)等细胞因子水平和视力、视野平均敏感度及中医证候积分。结果观察组患者的治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者的血清VEGF、PDGF、CysC及ET-1等细胞因子水平均明显低于对照组(P<0.01),视力和视野平均敏感度均明显高于对照组(P<0.01),中医证候积分均明显低于对照组(P<0.01)。结论活血化瘀方联合视网膜光凝术能明显提高瘀血阻络型糖尿病视网膜病变治疗疗效,改善微血管损伤和视力水平,促进患者病情恢复,值得在临床推广。

化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠主动脉G6PD/NF-κB表达及炎症水平的影响

目的基于G6PD/NF-кB表达,探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化(athrosclerotic,AS)小鼠斑块及炎症反应的影响及机制研究。方法24只ApoE基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,给予高脂饲料喂养12周。选用8只C57BL/6J小鼠作为空白组,给予普通饲料喂养。化瘀祛痰方组以及辛伐他汀组分别给予相应的药物灌胃,空白组与模型组给予等量的生理盐水。4周后采用酶联免疫法(ELISA)检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块形态学改变;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平;Western Blot法及实时荧光定量Q-PCR法检测主动脉IL-6、IL-1β、TNF-α、G6PD、NF-κB蛋白及mRNA的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C含量无明显改变(P>0.05),主动脉内膜增厚,管腔狭窄,大量粥样斑块形成,血清中IL-6、IL-1β、TNF-ɑ水平显著升高(P<0.05或P<0.01),主动脉内IL-6、IL-1β、TNF-ɑ、G6PD、NF-κB蛋白及mRNA水平显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,化瘀祛痰组及辛伐他汀组小鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著降低(P<0.05或P<0.01),HDL-C含量无明显改变(P>0.05),主动脉斑块较模型组明显减小,血清中IL-6、IL-1β、TNF-ɑ水平显著降低(P<0.05或P<0.01),主动脉内IL-6、IL-1β、TNF-ɑ、G6PD、NF-κB蛋白及mRNA水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论化瘀祛痰方能够减小主动脉斑块大小,延缓AS进展,其机制可能与其调控G6PD/NF-κB表达,降低G6PD、NF-κB蛋白水平、抑制炎症反应有关。

潜阳化瘀方治疗肝阳上亢视网膜静脉阻塞93例临床观察

目的观察潜阳化瘀方对肝阳上亢视网膜静脉阻塞的临床疗效。方法将确诊为肝阳上亢视网膜静脉阻塞患者93人(93只眼)按就诊先后给予潜阳化瘀方治疗,30天为1疗程,连续3个疗程。观察治疗前后远视力、眼底出血及中医症状积分的情况。结果患者对数视力由治疗前3.68±0.78增进到4.27±0.364(P<0.01);眼底出血由治疗前4.178±0.146减少到2.731±0.236(P<0.05);全身症状改善总有效率81.7%(P<0.05)。结论潜阳化瘀方治疗肝阳上亢视网膜静脉阻塞有一定的治疗作用。

益气化瘀补肾方联合西药治疗肾虚血瘀型腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松临床观察

目的 探讨益气化瘀补肾方联合西药对腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松患者血清炎性因子、骨代谢标志物、骨密度、定量CT(QCT)的影响及临床疗效。方法 选取2018年10月—2021年10月温岭市中医院门诊及住院的120例肾虚血瘀型腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松患者,随机分为两组,对照组予塞来昔布胶囊、硫酸氨基葡萄糖胶囊、阿法骨化三醇胶囊、碳酸钙D3片、阿仑膦酸钠片治疗,研究组在对照组药物基础上加用益气化瘀补肾方治疗。1个月为1个疗程,共3个疗程。分别在治疗前、后观察患者中医证候评分、视觉模拟(VAS)评分、日本骨科协会评估治疗分数(JOA)评分、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、骨代谢标志物、骨密度、QCT,同时评定患者临床疗效。结果 治疗后,研究组临床疗效优于对照组(P<0.05);研究组TNF-α、IL-6指标低于对照组(P<0.05);研究组β-胶原特殊序列(β-CTX)、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(PINP)、N-端骨钙素(N-MID)指标低于治疗前(P<0.05),低于对照组(P<0.05);研究组BMD、QCT测量值高于对照组(P<0.05)。结论 益气化瘀补肾方联合西药治疗腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松患者安全有效,具有改善炎性反应、抑制骨吸收、改善骨密度等作用。

益气化瘀解毒方辅助化疗对胃癌Ⅳ期脾胃气虚、瘀毒内阻证患者血清炎症因子及生活质量的影响

目的观察益气化瘀解毒方辅助化疗治疗胃癌Ⅳ期脾胃气虚、瘀毒内阻证的疗效及安全性,并探讨其作用机制。方法将70例胃癌Ⅳ期脾胃气虚、瘀毒内阻证患者随机分为治疗组及对照组各35例。对照组患者仅给予常规化疗,21天为1个化疗周期;治疗组患者在化疗基础上给予益气化瘀解毒方口服,每日1剂。两组均治疗2个化疗周期。治疗前后检测血清炎症因子[包括白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素12p70(IL-12p70)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)]水平、肿瘤标志物[包括癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)]水平,进行中医证候(胃痛、胃胀、纳少、嗳气、泛酸、进食梗阻、呕吐、腹泻、便结、乏力10项症状)评分、Karnofsky功能状态评分(KPS评分);治疗后判定肿瘤客观疗效、中医证候疗效及生活质量疗效,记录两组患者治疗过程中不良事件发生情况判定安全性。治疗后采用Pearson相关性分析评价治疗组患者血清炎症因子、肿瘤标志物水平与KPS评分的相关性。结果与本组治疗前比较,治疗组治疗后IL-1β、IL-2、IL-12p70、TNF-α及IFN-γ水平均明显升高,IL-4、IL-6、IL-10表达水平均明显降低,除便结外其余各项中医症状评分以及总分均明显降低(P<0.05或P<0.01)。治疗后两组患者血清CEA、CA199水平均较本组治疗前明显降低(P<0.05)。治疗组肿瘤客观疗效客观缓解率为34.29%,与对照组的20.59%比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组中医证候疗效总有效率为65.71%,生活质量疗效改善率为65.71%,均分别高于对照组的26.47%、32.35%(P<0.05)。两组患者在白细胞减少、血小板减少、贫血、肝功能异常、肾功能异常发生情况方面差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果显示,治疗组患者KPS评分与IL-1β、TNF-α和IFN-γ之间呈正相关(相关系数分别为0.78、0.88、0.77),而与IL-12p70、IL-8、IL-10呈负相关(相关系数分别为-0.82、-0.95、-0.88)。结论益气化瘀解毒方辅助化疗能够明显改善胃癌Ⅳ期脾胃气虚、瘀毒内阻证患者临床症状,提高生活质量,且安全性好,其机制可能与调节失衡的免疫炎性因子、改善免疫微环境有关。

基于Stroop测试探讨益气养阴解毒化瘀方加减联合西药治疗轻微型肝性脑病的临床疗效

目的 评价益气养阴解毒化瘀方加减联合西药治疗轻微型肝性脑病的临床疗效及安全性。方法 纳入经Stroop测试诊断为轻微型肝性脑病患者100例,采用随机对照试验方法,以1∶1比例分为益气养阴解毒化瘀方加减联合西医治疗组(中西医结合治疗组)和西医治疗组进行治疗,记录两种疗法对轻微型肝性脑病患者治疗前及治疗4周后的Stroop测试时间(包括总关闭阶段时间、正确完成关闭阶段的次数、总开放阶段时间、正确完成开放阶段的次数、总开放阶段时间+总关闭阶段时间)和中医证候积分,并评价疗效;分别于治疗前及治疗1、2、4周后记录患者终末期肝病模型(MELD)评分,并检测肝功能[包括血氨(BA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、血清总胆红素(TBiL)]、凝血功能[包括凝血酶原活动度(PTA)、国际标准化比值(INR)]及粒淋比(NLR),并观察患者生命体征,检测血常规及电解质肾功能,记录不良事件。结果 治疗后,中西医结合治疗组Stroop测试结果的总关闭阶段时间[97.01(85.61,110.98)s]、总开放阶段时间[106.47(93.82,125.89)s]、总开放阶段时间+总关闭阶段时间[201.63(180.72,231.34)s]较本组治疗前缩短,且分别较西医治疗组的109.53(97.56,140.37)s、127.46(106.66,148.02)s、234.40(212.19,283.68)s缩短更明显(P<0.05或P<0.01)。中西医结合治疗组有效率94%,优于西医治疗组的72%(P<0.01)。中西医结合治疗组治疗1、2、4周后ALT、AST、TBiL、BA、INR、NLR、MELD评分及中医证候积分逐渐下降,ALB、PTA上升,且除ALT外,其余指标改善均优于西医治疗组(P<0.05或P<0.01)。中西医结合治疗组1例患者在治疗2周后出现腹泻,调整方药后好转。结论 益气养阴解毒化瘀方加减联合西药治疗轻微型肝性脑病能改善患者认知能力,提高治疗有效率,且安全性好。

益气化瘀解毒复方联合超低频电磁场处理水对内毒素诱发大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨益气化瘀解毒复方联合超低频电磁场处理水(简称频谱水)对内毒素诱发大鼠急性肺损伤的影响及可能作用机制。方法 104只SD大鼠随机分为13组,每组8只。预防实验:预防频谱水组、预防频高组、预防频低组、预防普通水组、预防普高组、预防普低组分别给予相应水溶液2 ml灌胃,每日1次。14天后,除预防对照组外各组以5 mg/kg内毒素腹腔注射制备急性肺损伤模型。治疗实验:除对照组外,其余各组造模同预防实验,造模后频高组、普高组分别给予高剂量中药频谱水和普通水2 ml灌胃1次,血必净组予血必净注射液4.5 ml/kg腹腔注射1次。两个实验均进行大鼠肺大体病理、病理组织学光镜观察,并检测血清白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果预防实验中,与预防对照组比较,预防模型组IL-8、TNF-α水平升高(P<0.05);与预防模型组比较,预防普低组、预防普高组、预防频谱水组、预防频低组、预防频高组IL-8、TNF-α水平均降低(P<0.05);与预防频低组比较,预防频高组IL-8、TNF-α水平均降低(P<0.05)。治疗实验中,与对照组比较,模型组IL-8、TNF-α水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,频高组、普高组、血必净组IL-8、TNF-α水平均降低(P<0.05);与频高组比较,普高组IL-8、TNF-α水平均升高(P<0.05)。结论益气化瘀解毒复方对内毒素致急性肺损伤具有一定的防治作用,可能与降低大鼠血清中IL-8、TNF-α水平有关,并且高剂量效果好;频谱水与中药复方合用有增强抗炎、抗肺损伤作用的趋势。

化瘀解毒方对缺血性中风瘀毒互结证模型大鼠脑细胞自噬及血脑屏障通透性的影响

目的探讨化瘀解毒方预防缺血性中风瘀毒互结证的可能作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组及化瘀解毒方低、高剂量组,每组15只。化瘀解毒方低、高剂量组大鼠分别给予9.5、28.5 g/(kg·d)化瘀解毒方灌胃,假手术组及模型组大鼠给予3 ml生理盐水灌胃,均连续7天。除假手术组外,其余各组大鼠均于灌胃第4天开始给予角叉菜胶腹腔注射,连续3天,灌胃第7天给予大鼠1次背部皮下注射干酵母悬液。末次灌胃24 h后采用大脑中动脉闭塞(MCAO)线栓法制备缺血性中风瘀毒互结证病证结合模型。造模24 h后进行神经功能缺损评分;各组大鼠随机选取5只大鼠采用TTC染色法观察脑组织梗死率;伊文思蓝(EB)渗透法检测脑组织血脑屏障(BBB)通透性;Western blot法检测脑组织自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、选择性自噬接头蛋白(p62)和咬合蛋白(Occludin)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑梗死率和神经功能缺损评分增加,脑组织Beclin1蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值增加,p62、Occludin蛋白表达降低,EB含量上升(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,化瘀解毒方低剂量组脑梗死率、神经功能缺损评分、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值降低,Occludin蛋白表达上升,化瘀解毒方高剂量组脑梗死率、神经功能缺损评分、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值、EB含量、Beclin1蛋白表达下降,p62蛋白和Occludin蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。与化瘀解毒方低剂量组比较,化瘀解毒方高剂量组大鼠脑梗死率、EB含量、Beclin1蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论化瘀解毒方可明显预防缺血性中风瘀毒互结证脑损伤,以高剂量较佳,其作用机制可能是抑制脑细胞自噬,从而保护BBB功能。

化瘀通阳方对溃疡性结肠炎模型大鼠肠道菌群和氨基酸代谢的影响

目的探讨化瘀通阳方治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能作用机制。方法24只Wistar大鼠随机分为空白组8只和模型复制组16只。模型复制组采用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液诱导UC大鼠模型。造模成功的10只大鼠随机分为化瘀通阳组和模型组,每组5只。化瘀通阳组予浓度为0.54g/ml化瘀通阳方2ml保留灌肠,空白组和模型组大鼠用等量的生理盐水灌肠,连续10天。干预结束后观察结肠组织病理,并采集大鼠粪便,进行肠道菌群宏基因测序分析。结果模型组大鼠结肠黏膜充血水肿,结构紊乱,黏膜下层可见炎性细胞浸润;化瘀通阳组大鼠结肠黏膜结构恢复正常,可见个别炎性细胞浸润,腺体增生活跃。与空白组比较,模型组大鼠结肠组织损伤指数(TDI)评分升高、属水平和种水平普雷沃氏菌属减少(P<0.01);与模型组比较,化瘀通阳组大鼠结肠TDI评分降低、属水平普雷沃氏菌属及种水平鼠乳杆菌增加、苯丙氨酸降解减少、赖氨酸生物合成增加(P<0.05或P<0.01)。Lefse分析模型组差异菌为梭菌属、Turicibacter、Faecalibaculum,化瘀通阳组差异菌群主要为乳杆菌属和Akkermansia。结论化瘀通阳方可以促进UC大鼠肠黏膜愈合,调节肠道菌群的丰度变化,其机制可能与乳杆菌属和Akkermansia的富集有关。

化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化模型小鼠肠道菌群驱动TMA/FMO3/TMAO通路的影响

目的探讨化瘀祛痰方抗动脉粥样硬化(AS)的可能作用机制。方法24只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组和化瘀祛痰组,每组8只。8只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。除空白对照组外,其余各组给予高脂饲料喂养制备AS模型。造模后辛伐他汀组给予辛伐他汀2.275mg/(kg·d)灌胃,化瘀祛痰组给予化瘀祛痰方20g/(kg·d)灌胃,空白对照组和模型组给予等体积(0.5ml)生理盐水灌胃。每日1次,灌胃4周。观察肝脏病理组织形态,检测盲肠内容物肠道菌群,血浆三甲胺(TMA)、氧化三甲胺(TMAO)含量,肝脏黄素单加氧酶3(FMO3)mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,化瘀祛痰组细胞肿胀明显减轻,脂肪空泡显著减少,脂滴沉积减少。与空白对照组比较,模型组血浆TMA、TMAO含量,肝脏FMO3蛋白及mRNA水平升高(P<0.05);与模型组比较,辛伐他汀组和化瘀祛痰组血浆TMA、TMAO含量,肝脏FMO3蛋白及mRNA水平降低P<0.05);辛伐他汀组和化瘀祛痰组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。肠道菌群Beta多样性分析,各组样本能够显著区分。基于属水平,与空白对照组比较,模型组拟普雷沃菌属、拟杆菌属、大肠杆菌科志贺菌、副拟杆菌属相对丰度下降,gLachnospiraceaeUCG-006、罗氏菌属相对丰度升高(P<0.05);与模型组比较,化瘀祛痰组厌氧棍状菌属、gEubacteriumxylanophilumgroup、gLachnospiraceaeUCG-006、gRikenellaceaeRC9gutgroup、罗氏菌属相对丰度下降,拟杆菌属、柠檬酸杆菌属、大肠杆菌科志贺菌属、副拟杆菌属、葡萄球菌属相对丰度升高(P<0.05)。拟杆菌属、副拟杆菌属与TMA呈负相关,拟普雷沃菌属、拟杆菌属、副拟杆菌属与TMAO呈负相关(P<0.05)。结论化瘀祛痰方可能通过改变肠道菌群结构,减少TMA生成,降低肝FMO3表达,抑制TMAO合成,从而抑制AS发生发展。

补肾泄浊化瘀通络方调控膜性肾病足细胞转分化保护肾功能机制研究

目的:研究补肾泄浊化瘀通络方对阳离子化牛血清白蛋白(Cationized Bovine Serum Albumin,C-BSA)诱导的膜性肾病(Membranous Nephropathy,MN)大鼠肾保护作用及对MN足细胞转分化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的调节作用。方法:SD大鼠采用C-BSA尾静脉注射法制备MN大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、盐酸贝那普利10 mg/kg组、补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组,另设正常对照组,各组灌胃给药相应药物或蒸馏水,1次/d,给药4 w后取材检测。采用光镜(MASSON染色、PAS染色)、电镜、IgG免疫荧光进行肾组织病理观察;记录大鼠24 h尿蛋白定量(24-UTP)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;应用免疫组化及Real-time PCR法检测肾组织突触足蛋白(Synaptopodin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠出现较为明显的肾组织病理损伤,肾小球基底膜不均匀增厚,上皮下免疫复合物沉积伴特有的“钉突”样改变,IgG弥漫性、条带状沉积于基底膜区;24-UTP、TG、TC含量明显升高(P<0.05),血清TP、ALB含量明显降低(P<0.05),肾组织足细胞标志物Synaptopodin蛋白及mRNA表达下调,EMT相关标志物TGF-β1蛋白及mRNA表达上调(P<0.05);与模型对照组比较,补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组明显减轻MN模型大鼠肾组织损伤程度,明显降低24-UTP、TG、TC含量(P<0.05),增加血清TP、ALB含量(P<0.05),上调肾组织Synaptopodin蛋白及mRNA表达,下调TGF-β1蛋白及mRNA表达。结论:补肾泄浊化瘀通络方对C-BSA致MN大鼠具有肾保护作用,可能与其能够上调肾组织中Synaptopodin表达,下调TGF-β1表达,抑制足细胞EMT、修复足细胞损伤有关。

益气健脾化瘀祛痰方对脾虚痰浊动脉粥样硬化巴马小型猪探究行为的影响

目的观察益气健脾化瘀祛痰方对脾虚痰浊动脉粥样硬化(AS)巴马小型猪探究行为的影响。方法将26只巴马小型猪随机分为正常组5只、手术组21只,正常组给予基础饲料,手术组给予高脂饲料喂饲。第2周对手术组小型猪行冠状动脉球囊挤压术,术后将21只小型猪随机分为模型组、中药组和西药组,每组7只。第4周开始对除正常组外的各组小型猪加入跑步过劳训练制备脾虚痰浊AS模型,共持续4周。24周后评价模型,评价后中药组给予益气健脾化瘀祛痰方1.625 g/(kg·d),西药组予单硝酸异山梨酯缓释片1.142 mg/(kg·d)。24周后采用监视仪器对各组小型猪咬物品、咬同伴、拱物品、拱同伴、闻物品、闻同伴6项探究行为进行观察。结果与正常组比较,模型组小猪探究行为中咬同伴、拱物品行为频次下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组探究行为频次均呈上升趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05);中药组在咬物品、拱物品、闻物品方面频次多于西药组,其中咬物品差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气健脾化瘀祛痰方可增加脾虚痰浊AS小型猪探究行为活动,且对小型猪探究行为改善作用较单硝酸异山梨酯缓释片更显著。

祛痰化瘀中药复方对心房颤动模型大鼠心肌超微结构及氧化应激的影响

目的 探讨祛痰化瘀中药复方治疗心房颤动(AF)的可能作用机制。方法 60只雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,维拉帕米组及祛痰化瘀高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外其余各组大鼠采用尾静脉注射乙酰胆碱(Ach,66μg/ml)-氯化钙(CaCl2,10 mg/ml)混合液连续7天建立AF大鼠模型。从造模第2天起,祛痰化瘀高、中、低剂量组大鼠分别给予祛痰化瘀中药复方41.25、20.63、10.31 g/(kg·d)灌胃,维拉帕米组给予维拉帕米溶液25 mg/(kg·d)灌胃,空白组和模型组灌服8.93 ml/(kg·d)生理盐水,连续灌胃2周。最后一次灌胃后12 h记录各组大鼠肢体Ⅱ导联心电图,监测AF持续时间;透射电镜下观察各组大鼠心肌超微结构变化;ELISA法检测大鼠血清中晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 空白组大鼠为正常心电图,心房肌细胞的肌小节完整清晰,线粒体结构正常。与空白组相比,模型组大鼠心电图显示为AF心律,血清中AOPP、MDA、ROS含量升高,SOD含量降低(P<0.05或P<0.01),心房肌细胞的肌小节断裂,“Z”带不连续,排列混乱,“I”带模糊不清,线粒体肿胀、增多。与模型组比较,各给药组大鼠AF持续时间明显缩短;祛痰化瘀高、中剂量组大鼠血清AOPP、ROS、MDA含量降低,SOD含量升高(P<0.05或P<0.01),维拉帕米组大鼠血清AOPP、ROS含量降低,SOD含量升高(P<0.05);祛痰化瘀高、中剂量组和维拉帕米组大鼠心房肌细胞的肌小节轻微断裂,排列相对整齐,线粒体稍有肿胀、增多,结构相对完整,而祛痰化瘀低剂量组大鼠心肌超微结果改善不明显。结论 祛痰化瘀中药复方可以缩短心房颤动持续时间,改善心肌损伤,其机制可能与抑制氧化应激有关,且以高中剂量效果为佳。