化瘀通阳方对溃疡性结肠炎模型大鼠肠道菌群和氨基酸代谢的影响

目的探讨化瘀通阳方治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能作用机制。方法24只Wistar大鼠随机分为空白组8只和模型复制组16只。模型复制组采用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液诱导UC大鼠模型。造模成功的10只大鼠随机分为化瘀通阳组和模型组,每组5只。化瘀通阳组予浓度为0.54g/ml化瘀通阳方2ml保留灌肠,空白组和模型组大鼠用等量的生理盐水灌肠,连续10天。干预结束后观察结肠组织病理,并采集大鼠粪便,进行肠道菌群宏基因测序分析。结果模型组大鼠结肠黏膜充血水肿,结构紊乱,黏膜下层可见炎性细胞浸润;化瘀通阳组大鼠结肠黏膜结构恢复正常,可见个别炎性细胞浸润,腺体增生活跃。与空白组比较,模型组大鼠结肠组织损伤指数(TDI)评分升高、属水平和种水平普雷沃氏菌属减少(P<0.01);与模型组比较,化瘀通阳组大鼠结肠TDI评分降低、属水平普雷沃氏菌属及种水平鼠乳杆菌增加、苯丙氨酸降解减少、赖氨酸生物合成增加(P<0.05或P<0.01)。Lefse分析模型组差异菌为梭菌属、Turicibacter、Faecalibaculum,化瘀通阳组差异菌群主要为乳杆菌属和Akkermansia。结论化瘀通阳方可以促进UC大鼠肠黏膜愈合,调节肠道菌群的丰度变化,其机制可能与乳杆菌属和Akkermansia的富集有关。

补肾泄浊化瘀通络方调控膜性肾病足细胞转分化保护肾功能机制研究

目的:研究补肾泄浊化瘀通络方对阳离子化牛血清白蛋白(Cationized Bovine Serum Albumin,C-BSA)诱导的膜性肾病(Membranous Nephropathy,MN)大鼠肾保护作用及对MN足细胞转分化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的调节作用。方法:SD大鼠采用C-BSA尾静脉注射法制备MN大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、盐酸贝那普利10 mg/kg组、补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组,另设正常对照组,各组灌胃给药相应药物或蒸馏水,1次/d,给药4 w后取材检测。采用光镜(MASSON染色、PAS染色)、电镜、IgG免疫荧光进行肾组织病理观察;记录大鼠24 h尿蛋白定量(24-UTP)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;应用免疫组化及Real-time PCR法检测肾组织突触足蛋白(Synaptopodin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠出现较为明显的肾组织病理损伤,肾小球基底膜不均匀增厚,上皮下免疫复合物沉积伴特有的“钉突”样改变,IgG弥漫性、条带状沉积于基底膜区;24-UTP、TG、TC含量明显升高(P<0.05),血清TP、ALB含量明显降低(P<0.05),肾组织足细胞标志物Synaptopodin蛋白及mRNA表达下调,EMT相关标志物TGF-β1蛋白及mRNA表达上调(P<0.05);与模型对照组比较,补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组明显减轻MN模型大鼠肾组织损伤程度,明显降低24-UTP、TG、TC含量(P<0.05),增加血清TP、ALB含量(P<0.05),上调肾组织Synaptopodin蛋白及mRNA表达,下调TGF-β1蛋白及mRNA表达。结论:补肾泄浊化瘀通络方对C-BSA致MN大鼠具有肾保护作用,可能与其能够上调肾组织中Synaptopodin表达,下调TGF-β1表达,抑制足细胞EMT、修复足细胞损伤有关。