回回甘松饮含药血清对高糖诱导的肾小球系膜细胞外基质堆积的影响

目的探讨回回甘松饮(Hui-hui Gan-song Yin,HGY)含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cells,MCs)外基质堆积的影响。方法健康雄性SD大鼠40只随机分为正常对照组(蒸馏水)、格列喹酮组(10 mg/kg)、HGY(5、10 g/kg)组,每组各10只,每天给药2次,连续3 d后制备含药血清用于体外培养大鼠MCs,分为正常对照组(10%正常对照组大鼠血清)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清)、格列喹酮组(30 mmol/L葡萄糖+10%格列喹酮组大鼠血清)、HGY高剂量组(30 mmol/L葡萄糖+10%HCY高剂量组大鼠血清)、HGY低剂量组(30 mmol/L葡萄糖+10%HCY低剂量组大鼠血清)。细胞培养结束后,采用Western blot方法检测纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)及Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)含量。结果与空白对照组比较,高糖组FN、ColⅠ及ColⅣ表达量上调(P<0.01);HGY含药血清可降低在高糖诱导的MCs中FN、ColⅠ及ColⅣ表达量(P<0.05)。结论 HGY含药血清可降低MCs在高糖环境下的FN、ColⅠ及ColⅣ蛋白表达水平,从而减少了ECM堆积,保护肾小球,延缓糖尿病肾病进程。

回回甘松饮对糖尿病肾病大鼠miR⁃192及TGF⁃β1/Smads的调控作用

目的探究回回甘松饮(Hui⁃hui Gan⁃song Yin,HGY)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小球的保护作用。方法随机选取10只大鼠作为空白对照组(NC)。选用高脂饲料喂养SD大鼠联合链脲佐菌素的方法复制大鼠早期DN模型,DN模型复制成功的大鼠随机分为:DN模型组(DN)、格列喹酮组(DN+Gli,10 mg/kg)及回回甘松饮高剂量组(DN+HH,10 g/kg)、回回甘松饮低剂量组(DN+HL,5 g/kg),每组10只。采用实时荧光定量PCR方法检测肾组织中miR⁃192、靶基因Zeb2及TGF⁃β1/Smads信号通路中TGF⁃β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达,采用Western blot方法检测所对应蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠肾组织TGF⁃β1、Smad3蛋白及miR⁃192、TGF⁃β1、Smad3 mRNA表达水平显著升高(P<0.01),而Smad7、SIP1蛋白及Zeb2和Smad7 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,给予HGY及格列喹酮干预后,大鼠TGF⁃β1及miR⁃192、TGF⁃β1、Smad3 mRNA水平显著下降(P<0.01),Smad7、S1P1蛋白及Zeb2、Smad7 mRNA表达水平显著升高。结论HGY在DN大鼠肾脏中可能通过调控miR⁃192介导的TGF⁃β1/Smads信号通路改善肾脏细胞外基质堆积,从而起到保护早期DN大鼠肾脏的作用。

回回甘松饮含药血清调控高糖诱导的肾小球系膜细胞TGF-β1/Smads信号通路的研究

目的探讨回回甘松饮(HGY)含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法体外培养大鼠MCs,分为正常对照组、高糖组、格列喹酮(阳性)组、HGY高、低剂量组。除正常对照组给外,其余各组分别给予30 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清、格列喹酮(10 mg/kg)组大鼠血清、HGY(5、10 g/kg)组大鼠血清干预。细胞培养结束后,采用实时荧光定量PCR方法检测TGF-β1、Smad3、Smad7的基因表达水平。结果高糖(30 mmol/L)使MCs中TGF-β1、Smad3基因表达量升高(P<0.01或P<0.05),使Smad7基因表达量下降(P<0.01);HGY含药血清可下调高糖诱导的MCs中TGF-β1、Smad3的基因表达量(P<0.01),上调Smad7基因表达量下降(P<0.01),且与格列喹酮含药血清的调控结果接近,无显著差异。结论 HGY含药血清可调控MCs在高糖环境下的TGF-β1、Smad3、Smad7的基因表达水平,这可能是其延缓糖尿病肾病进程的机制之一。