回回甘松饮含药血清对高糖诱导的肾小管上皮细胞的影响及相关机制

目的 研究回回甘松饮（HGY）对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、细胞周期以及Ⅰ型胶原（ColⅠ）和纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法 采用中药血清药理学方法制备含药血清。实验共分为6组：5%空白血清组（NG）、高糖＋5%空白血清组（HG）、高糖＋5%福辛普利钠含药血清组（3 mg/kg）、高糖＋5%HGY含药血清组（20,10,5 g/kg）。细胞以4×10~4个/ml接种于96孔细胞培养板上,分别于药物处理后24,48,72 h时,采用CCK-8法检测NRK-52E增殖情况;细胞以4×10~4个/ml接种于25 cm2细胞培养瓶中,于药物干预48 h时收集细胞,分别采用流式细胞术检测细胞周期变化,免疫酶联吸附法检测ColⅠ和FN蛋白的表达。结果 与NG组比较,高糖（30 mmol/L）能够诱导NRK-52E增殖（P〈0.01）,并能使G_0/G_1期细胞比例减少（P〈0.01）,S期比例增加（P〈0.01）,能够使NRK-52E中ColⅠ和FN蛋白表达量明显升高（P〈0.01）。在上述含药血清干预的24,48,72 h,各含药血清组NRK-52E均受到一定程度抑制,发生G_1/S期阻滞,并可降低高糖条件下NRK-52E中ColⅠ及FN蛋白表达量,与HG组比较有显著差异（P〈0.01或P〈0.05）。结论 HGY含药血清可抑制NRK-52E细胞在高糖环境下的细胞增殖,调控细胞周期,其机制可能与调控ColⅠ和FN蛋白表达有关。

回回甘松饮含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖、周期及FN，Col1α1，Col4α1基因表达的影响

目的:探讨回回甘松饮(HGY)含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖、细胞周期、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原α1多肽链(Col1α1)、Ⅳ型胶原α1多肽链(Col4α1)基因表达的影响。方法:采用中药血清药理学方法制备含药血清,将大鼠随机分为空白对照组(给予蒸馏水10 mL·kg-1)、格列喹酮(10 mg·kg-1)组、HGY(10,5 g·kg-1)组,每组各10只,每日灌胃给药2次,连续3 d后取大鼠血清。选取HBZY-1细胞株进行实验,共分为5组:10%空白血清组、高糖+10%空白血清组、高糖+10%格列喹酮含药血清组(10 mg·kg-1)、高糖+10%HGY含药血清组(10,5 g·kg-1)。细胞以2×104/mL接种于96孔细胞培养板上,分别于药物处理后24,48,72 h时,采用CCK-8法检测MCs增殖情况;细胞以2×104/mL接种于25 cm2细胞培养瓶中,于药物干预48 h时收集细胞,分别采用流式细胞术检测细胞周期变化,real-time PCR方法检测FN、Col1α1及Col4α1 mRNA的表达。结果:与10%空白血清组比较,高糖(30 mmol·L-1)能够诱导MCs增殖(P<0.01),并能使G0/G1期细胞比例减少(P<0.01),S期比例增加(P<0.01),能够使MCs中FN,Col1α1,Col4α1 mRNA表达量明显升高(P<0.01)。在上述含药血清干预的48,72 h时,各含药血清组MCs均受到一定程度抑制,发生G1/S期阻滞,并可降低高糖条件下MCs中FN,Col1α1,Col4α1 mRNA表达量,与高糖+10%空白血清组比较,具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:HGY含药血清可使大鼠MCs在高糖环境下发生G1/S期阻滞,抑制其增殖,其机制可能与调控FN,Col1α1及Col4α1 mRNA表达有关。

回回甘松饮对早期糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用

目的:明确回回甘松饮(Huihui Gansong Yin,HGY)对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法:采用高脂饲料联合链脲佐菌素诱导大鼠实验性糖尿病肾病模型,设正常对照组、模型组、格列喹酮组(10 mg·kg-1)和HGY组(5,10 g·kg-1)。比较给药干预后各组大鼠血清胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)及高、低密度脂蛋白(HDL,LDL)含量;采用酶联免疫吸附方法,检测大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)及尿微量白蛋白(MAU);分别采用HE染色及PASM染色,光镜下观察肾脏组织的病理变化。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠的CHO,TG,LDL,GHbA1c,MAU水平显著上升(P<0.01),HDL水平显著下降(P<0.01)。格列喹酮组和HGY组大鼠血脂水平较模型组明显改善(P<0.01或P<0.05),GHbA1c及MAU水平均明显低于模型组(P<0.01),且在降低MAU方面HGY优于格列喹酮(P<0.01),肾脏病理变化较模型组明显减轻。结论:HGY可改善早期DN大鼠血脂、降低GHbA1c及MAU水平,减轻肾脏病理改变,对早期DN大鼠的肾脏具有一定的保护作用。