改良后Hulth法和Ⅱ型胶原酶注射法建立兔膝骨关节炎模型的比较研究

目的对比分析兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型两种常用造模方法的差异,为不同类型膝骨关节炎动物模型的选择提供参考。方法将9只健康新西兰大白兔随机分为3组:空白组、改良后Hulth组、胶原酶组。改良后Hulth组和胶原酶组分别给予改良后Hulth法、关节腔内注射胶原酶干预,1周后每日促使其活动,6周后进行Lequesne MG评分、X-ray、Micro-CT、Pelletier评分、Mankin评分、ELISA检测,观察膝关节大体及病理改变。结果与空白组相比,两种造模方法的兔膝关节软骨表面均出现缺损;病理结果显示软骨层出现裂隙,番红O染色减退,潮线扭曲并伴有血管通过;ELISA结果显示空白组、改良后Hulth组和胶原酶组血清内TNF-α含量分别为(624.99±17.82),(1140.56±129.81)和(1480.69±492.08)pg/mL,血清内IL-1β含量分别为(30.23±0.25),(46.67±0.71)和(46.82±1.04)pg/mL,改良后Hulth组和胶原酶组与空白组相比,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。另外,改良后Hulth组膝关节伴有骨赘生成,股骨内髁软骨损伤更为严重,而胶原酶组损伤部位主要为胫骨内髁。结论两种造模方法均能构建理想的KOA模型。改良后Hulth法的损伤程度更严重;胶原酶诱导的模型损伤方式更接近人KOA进程与发病机制。

改良Hulth法结合戊二醛注射建立大鼠膝骨关节炎模型

目的 探讨改良Hulth法结合戊二醛注射建立大鼠膝骨关节炎模型的可行性与有效性。方法 将32只SD大鼠按照随机数字表法分为模型组和对照组,每组16只。模型组采用手术切除膝关节内侧副韧带、前交叉韧带及内侧半月板并在关节腔内注射4%戊二醛0.5μl建立膝骨关节炎动物模型;对照组不做任何干预。两组于第4周取大鼠膝关节进行Masson染色组织病理学观察,并记录膝关节软骨组织的改良Mankin评分。结果 模型组大鼠术后1周手术切口均愈合良好,活动基本正常。第4周,对照组关节软骨表面光滑平整,厚薄一致,层次清晰,滑膜未见明显炎症细胞,未见毛细血管增生、充血,以脂肪组织为主;模型组关节软骨表面明显粗糙、凹凸不平整,关节软骨层厚薄不一致,部分软骨剥脱、碎裂,细胞明显增多,滑膜组织中有中性粒细胞以及单核巨噬细胞浸润,毛细血管增多并充血,胶原纤维增多,部分增粗伴玻璃样变性。第4周大鼠膝关节软骨组织改良Mankin评分模型组明显高于对照组(P <0.05)。结论 改良Hulth法结合戊二醛注射能在4周内快速、有效地建立大鼠早中期膝骨关节炎模型。

独活寄生汤对改良Hulth法造模大鼠膝骨关节炎软骨形态的影响

目的观察独活寄生汤对改良Hulth法造模大鼠膝骨关节炎软骨形态的影响,从形态学角度探讨独活寄生汤治疗膝骨关节炎的作用机制。方法2月龄SD大鼠66只,适应性喂养1周后,随机分为正常组(18只)和造模组(48只)。应用改良Hulth法复制大鼠膝骨关节炎模型,造模2周后,从正常组和造模组中随机抽取3只大鼠进行小动物MRI观察,鉴定造模是否成功。造模成功后,采用抽签法分为模型组、对照组和治疗组各15只。正常组和模型组给予0.9%生理盐水,治疗组给予独活寄生汤,对照组给予盐酸氨基葡萄糖胶囊灌胃。治疗12周后,切取左侧胫骨平台内侧软骨组织,固定、脱钙、石蜡包埋,行HE染色与番红O-固绿染色,并分别采用Mankin软骨组织学评分、OARSI关节病理评分评价染色结果。结果MRI显示:正常组可见关节间隙正常,关节面平整、光滑;造模组关节间隙增宽,关节软骨面不平整、软骨层变薄、局部缺损,结缔组织增生,骨赘形成,关节肿胀积液明显。与正常组比较,模型组软骨形态病变严重,Mankin评分、OARSI评分显著增高(P<0.01);治疗组与对照组软骨形态病变较轻;与对照组比较,治疗组软骨形态病变较轻,Mankin评分、OARSI评分明显降低(P<0.01)。结论改良Hulth法可成功复制大鼠膝骨关节炎模型。独活寄生汤能延缓软骨退变,促进软骨生长与修复,保护膝骨关节炎大鼠软骨形态。

3种不同膝骨关节炎造模方法比较

目的比较卵巢切除法、木瓜蛋白酶法、改良Hulth法3种方法在不同时间节点血清炎症因子、病理表现及关节软骨胶原蛋白(Collagen)Ⅱ的表达,了解膝骨关节炎不同造模方法的造模效果及特点。方法选取清洁级雌性SD大鼠80只,采用随机数字表法分别设立空白对照组(6 w组、10 w组)、卵巢切除法组(6 w组、10 w组)、木瓜蛋白酶法组(6 w组、10 w组)、改良Hulth法组(6 w组、10 w组),每组10只。除空白对照组外,其余组按照相应方法建立膝骨关节炎模型。分别于建模后第6周、第10周处死相应组别大鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、基质金属蛋白酶(MMP)-3含量,镜下观察大鼠膝关节形态并用改良Mankin标准进行病理评分,免疫组化法检测膝关节软骨CollagenⅡ型胶原表达。结果造模6 w时,与空白对照组对比,卵巢切除法组TNF-α、MMP-3含量、改良Mankin评分及膝关节软骨CollagenⅡ表达未见明显差异(P>0.05)。与空白对照组、卵巢切除法组对比,木瓜蛋白酶法组、改良Hulth法组血清IL-6、TNF-α、MMP-3含量、改良Mankin评分明显增高,关节软骨CollagenⅡ表达明显降低(P<0.05)。造模10 w时,与空白对照组对比,卵巢切除法组血清IL-6、TNF-α、MMP-3含量、改良Mankin评分及关节软骨CollagenⅡ表达未见明显差异(P>0.05)。与空白对照组及卵巢切除法组对比,木瓜蛋白酶法组、改良Hulth法组血清IL-6、TNF-α、MMP-3含量、改良Mankin评分明显增高,关节软骨CollagenⅡ表达明显降低(P<0.05)。与木瓜蛋白酶法组对比,改良Hulth法组血清TNF-α、MMP-3含量、改良Mankin评分明显更高,关节软骨CollagenⅡ表达明显更低(P<0.05)。结论在第10周时,卵巢切除法未能成功建立膝骨关节炎模型。木瓜蛋白酶法和改良Hulth法均可在第6周时快速、有效地建立膝骨关节炎模型。而改良Hulth法随着造模时间增加,在炎症反应表现更加持久和膝关节病理改变严重程度更高。

Spin and pseudospin symmetries of the Dirac equation with shifted Hulthe′n potential using supersymmetric quantum mechanics

In this paper, we obtain approximate analytical solutions of the Dirac equation for the shifted Hulthén potential within the framework of spin and pseudospin symmetry limits for arbitrary spin–orbit quantum number κ using the supersymmetry quantum mechanics. The energy eigenvalues and the corresponding Dirac wave functions are obtained in closed forms.

兔膝骨关节炎模型的制备及鉴定

目的探讨改良Hulth法制备兔膝骨关节炎模型及鉴定方法。方法改良Hulth法将兔膝内侧副韧带及前交叉韧带切断,内侧半月板切除,造模8周后拍片,将兔处死对关节腔软骨及滑膜大体观察;HE染色以及ELISA检查血清及关节液中IL-1、TNF-α的表达。结果 X线显示有明显的关节腔狭窄及骨刺形成。大体观察软骨有缺损,滑膜炎症形成。HE染色软骨缺损,软骨细胞分散、减少,形态不稳定。ELISA检查血清及关节液中IL-1、TNF-α的表达增高(P<0.05)。结论改良Hulth法制备的兔膝骨关节炎模型通过影像及生化指标检查,能准确反映骨关节炎特征性表现,为相关基础研究及临床治疗提供了理论依据。

Ⅱ型胶原注射骨关节炎时C-反应蛋白及类风湿因子的表达

背景:Ⅱ型胶原和硫酸软骨素是关节软骨的重要组成成分,不仅具有保护软骨的作用,还能抑制关节炎的病变。目的:通过检测类风湿因子和C-反应蛋白的表达评价Ⅱ型胶原及Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素注射对骨性关节炎的疗效。方法:采用改良Hulth法制作大鼠膝关节骨性关节炎模型,造模后模型组关节腔注射生理盐水、透明质酸钠组给予透明质酸钠凝胶注射、Ⅱ型胶原组给予单纯Ⅱ型胶原注射、Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素组给予Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素注射治疗。各组动物于术后进行日常观察、称质量、血清抗体及组织病理检查。结果与结论:造模后模型组大鼠血类风湿因子和C-反应蛋白水平均有所升高,炎症加剧;而与模型组相比,各给药组大鼠类风湿因子和C-反应蛋白水平均有所下降,炎症有所减轻,其中Ⅱ型胶原复合硫酸软骨素组大鼠血清中类风湿因子水平显著下降(P<0.01)。结果显示Ⅱ型胶原与透明质酸钠均具有预防和治疗骨关节炎的作用,能缓解骨关节炎病变,Ⅱ型胶原联合硫酸软骨素的疗效更明显。