HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测方法的建立及应用

目的建立HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测的酶免疫检测方法,用于HIV感染的实验室诊断,缩短HIV感染的检测窗口期。方法制备抗HIVP24单克隆抗体和多克隆抗体,联合使用基因工程HIV1/2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的HIV1/2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物,建立联合检测HIV1/2抗体和P24抗原的ELISA方法,并对其特异性、敏感性和稳定性进行鉴定。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0.2ng/ml;检测187份HIV阳性血清、210份其他疾病患者血清和520份正常人血清,其敏感性和特异度分别为100%和99.62%。同时重复12次检测4份HIV阳性血清,变异系数均小于10%。结论本方法可以在1.5h内一步同时检出特异性HIV-1/2抗体和HIVP24抗原,缩短了HIV感染的检测窗口期,具备快速、简便、特异、敏感等优点,适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。

HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。

常见理化因素对HIV抗体检测稳定性的试验研究

目的 研究血浆样品在保存、运输过程中环境温度、反复冻融及防腐剂等理化因素对HIV抗体检测的影响。方法进行热稳定性、冻融试验和添加防腐剂等一系列对比试验,观察常规检测工作中遇到的理化条件改变对HIV抗体滴度的影响。结果因素不影响样品抗体的检测结果。结论 在临床样品送检、实验室质量评价和试剂临床评估样品发放等实际应用中,可以排除以上因素的干扰影响。

未随访到第2份血样的成年HIV-1抗体阳性不确定样本的核酸检测

目的探讨应用HIV-1核酸定量和套式RT-PCR检测技术,对未随访到第2份血样的成年HIV-1抗体阳性不确定样本的检测可行性,及其在艾滋病感染实验室诊断中的作用。方法选取2016年1月—2018年7月经确证实验室Western Blot(WB)法检测为HIV-1不确定样本,2~4周后随访但未获得第2份血浆,无法进行进一步确证实验的11份成年人血浆样品,采用荧光定量PCR法和RT-PCR法进行检测,并计算直接诊断阳性率,与WB法结果进行比较。结果11份未随访到第2份血样的HIV-1成年抗体阳性不确定样本,经WB法确证均为阴性;荧光定量PCR法直接诊断阳性率为63.6%(7/11),CT值为18.8~40.9,病毒载量为5.14×10^7~26.73IU/mL,其中6份>5000IU/mL,占54.5%。对7份荧光定量PCR阳性样本进行RT-PCR扩增,直接诊断阳性率为54.5%(6/11);6份病毒载量>5000IU/mL的标本均获得特异扩增片段,1份病毒载量为26.73IU/mL样品未获得RT-PCR扩增片段。荧光定量PCR法、RT-PCR法直接诊断率均远高于WB(0),且第1份血样就可以做出诊断。结论荧光定量PCR和RT-PCR法检测HIV-1核酸敏感度高于传统WB法,可应用于无法获得第2份随访血样的HIV-1不确定者,尤其是病毒载量>5000IU/mL的标本的检测。

人类免疫缺陷病毒感染抗体检测窗口期血清的检出

目的 搜索高危人群中HIV抗体“窗口期”样品。方法 使用HIV抗体检测、HIV 1 p2 4抗原检测和病毒载量检测等多种方法对 1 580份高危人群血清和血浆进行筛查。结果 发现 1份样品抗体检测为阴性 ,p2 4抗原检测为阳性 ,病毒载量HIV 1RNA含量极高 ,拷贝数为每毫升 41万 (RT PCR法 )和 76万 (NASB法 )。结论 该份样品HIV抗体水平极低 ,用国内目前使用的进口和国产HIV抗体检测试剂均不能检出 ,确定其为

2012～2014年无锡市锡山区艾滋病抗体检测分析

目的了解无锡市锡山区艾滋病流行情况和特征,为以后的艾滋病防治工作提供科学依据。方法采用酶联免疫法对2012~2014年锡山区10 290份血清标本进行HIV抗体检测,并对结果进行统计分析。结果 10 290份血清中共检出并确认为HIV抗体阳性标本50份,检出率0.49%;各年度阳性率分别为0.46%、0.47%、0.53%,呈逐年上升趋势。男性阳性率（0.57%）高于女性（0.29%）。HIV感染率以阳性者配偶最高为14.00%,其次依次为男男同性恋者（5.49%）、其他就诊者（4.88%）、自愿咨询检测者（2.49%）、其他（0.66%）、卖淫嫖娼者（0.27%）、羁押人员（0.20%）,不同人群检测阳性率差异有统计学意义（P〈0.01）。50例感染者中,男性41例,女性9例,男性高于女性;年龄主要集中在21~40岁;户籍以外省外市为主;婚姻状况以已婚为最多;文化程度多集中在初中及以下。结论 AIDS疫情不断扩展,应加大健康教育和高危人群行为干预的力度,遏止AIDS的流行和蔓延。