冻干静注人免疫球蛋白(pH=4)HCV、HIV检测方法的抗干扰能力验证

目的:对冻干静注人免疫球蛋白(pH=4)丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)、人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)检测方法的抗干扰能力进行验证。方法:对冻干静注人免疫球蛋白(pH=4)进行酶联免疫法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测HCV、HIV抗体以及聚合酶链式反应法(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测HCV-RNA、HIV-RNA的抗干扰能力验证。结果:ELISA法检测HCV、HIV抗体抗干扰能力验证中,B、C厂家的抗HCV试剂盒适合产品的HCV抗体的检测;C厂家的抗HIV试剂盒适合产品的HIV抗体的检测。PCR法检测产品HCV-RNA、HIV-RNA抗干扰能力验证中,在不加入HCV、HIV的情况下,样品检测均为阴性,加入HCV、HIV至每种病毒浓度为3倍检出限的情况下,用盐水稀释5倍的样品检测均为阳性,质控和阴、阳对照有效,符合验证可接受标准。结论:选择适用于人血清或血浆样本病毒检测的诊断试剂盒用于冻干静注人免疫球蛋白(pH=4)病毒检测,应进行抗干扰能力验证,以保证方法的适用性。

静注人免疫球蛋白(pH 4)中IgA残留量的不确定度分析

目的:紫外-可见分光光度法测定静注人免疫球蛋白中IgA残留量,并对其进行不确定度评定。方法:采用紫外-可见分光光度法,测定波长340 nm,比色皿狭缝1 nm,依据操作过程及测定环节引入的影响因素,对各个分量进行评估。结果:静注人免疫球蛋白(pH 4)中的IgA残留量结果为103μg·mL^(-1),扩展不确定度为10μg·mL^(-1)(k=2)。结论:本实验首次对静注人免疫球蛋白(pH 4)中的IgA残留量不确定度分量进行分析和评定,为血液制品检验提供了影响因素来源分析,为提高检验结果准确性提供了数据分析。

两种阿司匹林减量方式用于川崎病的疗效观察

目的:探讨两种阿司匹林减量方式用于川崎病的疗效。方法:选取2014年1月—2016年1月东莞东华医院收治的川崎病患儿84例作为研究对象,以随机数字表法分为A组和B组,每组42例。所有患儿均给予阿司匹林联合静注人免疫球蛋白(p H4)治疗,A组患儿于退热3~5 d后逐渐减少阿司匹林剂量,2周后减至3~5 mg;B组患儿于退热3~5 d后直接减少阿司匹林剂量至3~5 mg。观察两组患儿白细胞计数、血小板计数、红细胞沉降率、C反应蛋白水平及天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶等肝功能指标水平,比较两组患儿再次发热率及静注人免疫球蛋白(p H4)再次应用率。结果:治疗后,两组患儿白细胞计数、血小板计数、红细胞沉降率、C反应蛋白及天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶水平明显低于本组治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05),但两组间的差异无统计学意义(P>0.05);A组患儿再次发热率和静注人免疫球蛋白(p H4)再次应用率分别为2.38%(1/42)、4.76%(2/42),明显低于B组的14.29%(6/42)、21.43%(9/42),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:两种阿司匹林减量方式均可缓解川崎病的临床症状,但逐渐减少阿司匹林剂量能有效降低患儿再发热率和静注人免疫球蛋白(p H4)的再次应用率,有助于患儿早日康复。

静注人免疫球蛋白(pH4)中未知组分的生物质谱分析

采用分子排阻色谱(SEC)法测定静注人免疫球蛋白(pH 4)分子大小分布时,在Ig G二聚体和多聚体峰之间发现一未知组分。本研究采用质谱技术分析该未知组分的蛋白质信息。以SEC法分离收集来自4个厂家样品中的该未知组分,经除盐、浓缩和酶解,将获得的肽段采用nano-LC-MS/MS法鉴定蛋白质。结果显示,3个企业样品中的未知组分除含有Ig G外还含有其他杂蛋白,另1企业样品中的未知组分主要为Ig G亚类。将nano-LC-MS/MS获得的未知组分蛋白质信息建立杂蛋白谱数据库,可为药品监管服务。

血液制品中间样品的微生物限度检查待检有效期探讨

目的 确认人血白蛋白和静注人免疫球蛋白（pH4）中间样品的微生物限度检查存放条件和待检有效期.方法 取两种血液制品的中间样品,除菌过滤后接种一定浓度的荧光假单胞菌菌悬液,将其放置于不同温度,定时抽取供试品进行微生物限度检查,并对结果进行分析.结果 放置在2～8℃,人血白蛋白和静注人免疫球蛋白（pH4）中间样品的待检有效期均为24h;放置在20-25℃,人血白蛋白和静注人免疫球蛋白（pH4）中间样品的待检有效期分别为10h和8h.结论 存放温度和储存时间均对中国药典中两种非规定灭菌的血液制品中间样品微生物真实含量有重要影响.严格按照待检有效期要求存放样品,能够使微生物限度检查结果更真实.

静注人免疫球蛋白(pH 4)成品中人类免疫缺陷病毒检测(ELISA法)pH条件的摸索

目的 对静注人免疫球蛋白(pH 4)[human immunoglobulin(pH 4)for intravenous injection,IVIG,简称静丙]成品中人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)检测(ELISA法)的pH条件进行摸索,以期控制静丙HIV的残余风险,保证血液制品的安全性。方法 使用不同pH缓冲液稀释HIV抗体标准物质及抗原标准物质至检测限水平,观察试剂盒对不同pH、检测限水平HIV标准物质的检出情况,进而得出试剂盒适宜pH检出范围。使用不同浓度的Tris-HCl溶液调节静丙成品至试剂盒适宜pH范围,然后稀释HIV抗体标准物质及抗原标准物质至检测限水平,获得静丙适宜的pH检出范围。结果 HIV抗体标准物质和HIV抗原标准物质检测缓冲液pH 7.0~9.0组的A450/630值与生理盐水(NS)组相近,所用HIV试剂盒适宜pH范围为7.0~9.0。0.1 mol/L Tris-HCl溶液稀释静丙4.0至试剂盒适宜pH范围作为稀释液,抗体0.25 NCU/mL水平在静丙pH 7.0~8.0组检测A450/630值高于cutoff值,且明显高于静丙pH 4.0组,0.1 mol/L Tris-HCl溶液加入量占静丙体积1/5以上。1 mol/L Tris-HCl溶液稀释静丙4.0至试剂盒适宜pH范围作为稀释液,抗体0.25 NCU/mL和抗原1.5 U/mL水平在静丙pH 7.0~9.0组检测A450/630值高于cutoff值,1 mol/L Tris-HCl溶液加入量仅为检测总体积的1/28~1/37,对待检样品的有效检测含量几乎不产生影响。结论 相较于pH 4.0的检测条件,pH 7.5~8.0更适用于静丙的HIV检测。确定采用1 mol/L Tris-HCl溶液调节静丙pH至7.5~8.0用于静丙HIV检测(ELISA法)。有效解决了静丙成品pH偏酸不利于HIV检出的问题,同时未对静丙成品的检测体积产生影响,显著提升了检测结果的准确性和可靠性。

静注人免疫球蛋白(pH 4)工艺优化后产品的稳定性

目的评价静注人免疫球蛋白(pH 4)[human immunoglobulin(pH 4)for intravenous injection,IGIV,简称静丙]工艺优化后产品的稳定性。方法在多批次规模化生产中,采用A滤板和B滤膜分别对不同分离阶段蛋白组分进行过滤,以降低产品中免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)残留量。对成品进行物理(外观、可见异物、不溶性微粒检查及热稳定性试验)、化学检定[蛋白质含量、纯度、分子大小分布、抗-HBs、白喉抗体、激肽释放酶原激活剂(prokallikrein activator,PKA)、抗补体活性(anti-complement activity,ACA)及抗-A和抗-B血凝素抗体效价、IgA残留量]及加速和长期稳定性试验。结果采用优化工艺生产的静丙关键质量指标与正常工艺生产批次相比,均无明显差异,IgA残留量明显下降(t分别为3.992和11.215,P均<0.05)。加速稳定性和长期稳定性试验工艺优化后的静丙各项检测结果均合格,符合《中国药典》三部(2020版)中相关规定。结论工艺优化后的静丙在有效降低IgA残留量的基础上,稳定性良好,对于血液制品生产企业提升静丙产品质量具有重要意义。

人免疫球蛋白联合更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎的临床研究

目的探讨静注人免疫球蛋白(pH 4)联合注射用更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎的临床疗效。方法选择2014年6月—2016年12月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院收治的腺病毒肺炎患儿90例,所有患儿按随机数字表法随机分为对照组和治疗组,每组各45例。对照组静脉滴注注射用更昔洛韦,5 mg/kg,滴注时间>1 h,2次/d。治疗组在对照组基础上静脉滴注静注人免疫球蛋白(pH 4),400 mg/kg,1次/d。两组患儿均连续治疗14 d。观察两组的临床疗效,比较两组的临床症状、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、克拉拉细胞分泌蛋白(CCSP)和白细胞介素-1(IL-1)水平情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为71.11%、95.56%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组退热时间、咳嗽停止时间、咽痛消失时间、肺部湿啰音消失时间和住院时间均明显短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清TNF-α、sPLA2、CCSP和IL-1水平均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论静注人免疫球蛋白(pH 4)联合注射用更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎具有较好的临床疗效,可改善临床症状,降低TNF-α、sPLA2、CCSP和IL-1水平,具有一定临床推广应用价值。

血必净注射液联合人免疫球蛋白治疗重症病毒性肺炎的临床研究

目的观察血必净注射液联合人免疫球蛋白治疗重症病毒性肺炎的临床疗效。方法选取2012年1月—2015年12月在南京市第一医院住院治疗的重症病毒性肺炎患者92例,随机分为对照组和治疗组,每组各46例。对照组患者静脉注射静注人免疫球蛋白(p H 4),10 g/次,1次/d;治疗组在对照组的基础上静脉注射血必净注射液,50 m L/次,2次/d。两组患者均连续治疗7 d。治疗后,比较两组患者临床疗效、临床症状体征改善及高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平改变。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为82.61%和91.30%,两组总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组患者退热时间、咳嗽和气喘消退时间明显短于对照组,两组临床症状体征改善情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者hs-CRP、IL-6、TNF-α水平均明显降低,同组治疗前后比较具有统计学意义(P<0.05);且治疗组上述炎症因子降低程度更明显,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血必净注射液联合人免疫球蛋白治疗重症病毒性肺炎临床疗效显著,能有效改善患者的症状体征和炎症因子,具有一定的临床推广应用价值。

人免疫球蛋白联合哌拉西林钠他唑巴坦钠治疗重症肺部感染的临床研究

目的探讨人免疫球蛋白联合哌拉西林钠他唑巴坦钠治疗重症肺部感染的临床效果。方法选取2016年6月—2017年10月北京市昌平区医院收治的60例重症肺部感染患者,随机分为对照组(30例)和治疗组(30例)。对照组患者静脉滴注注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠3.75 g/次,12次/h,30~40 min滴完;治疗组患者在对照组的基础上静脉滴注静注人免疫球蛋白(pH4),400 mg/kg,1次/d,两组患者均治疗7 d。观察两组患者的临床疗效,比较治疗前后两组患者临床指标改善时间、肺功能、血清学指标和病情严重程度标志物水平。结果治疗后,对照组临床有效率为86.67%,显著低于治疗组的93.33%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组咳嗽消失时间、体温恢复正常时间、肺部啰音消失时间、白细胞恢复时间、住院时间均显著短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.01);且治疗后治疗组血清指标水平均显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清血管紧张素转换酶(ACE)、一氧化氮(NO)水均显著降低,胆碱酯酶(ChE)水平显著升高,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.01);且治疗后治疗组病情严重程度标志物水平显著优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论人免疫球蛋白联合哌拉西林钠他唑巴坦钠治疗重症肺部感染效果显著,在改善肺功能、抑制炎症反应、抑制病情促进因子等方面均有积极作用,具有一定的临床推广应用价值。

免疫球蛋白联合头孢吡肟治疗新生儿感染性肺炎的临床研究

目的探讨静注人免疫球蛋白(pH4)联合注射用盐酸头孢吡肟治疗新生儿感染性肺炎的临床疗效。方法选取2017年10月-2019年1月天津市宝坻区人民医院收治的120例新生儿感染性肺炎患儿作为研究对象,随机将患者分为对照组和治疗组,每组各60例。对照组患儿静脉滴注头孢吡肟注射液60 mg/(kg·d),分两次给药。治疗组在对照组基础上给予静注人免疫球蛋白(pH4)400mg/kg,1次/d。两组患者治疗7~14d。观察两组的临床疗效,比较两组的临床症状、血气指标、免疫球蛋白、炎性因子。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为81.7%、96.7%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组退热时间、肺部湿啰音消失时间、咳嗽消失时间、住院时间均明显短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组动脉氧分压(p O2)水平显著升高,二氧化碳分压(pCO2)水平显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.05);且治疗组血气指标水平明显优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组免疫球蛋白水平明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.05);且治疗组炎性因子水平明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论静注人免疫球蛋白(pH4)联合注射用盐酸头孢吡肟治疗新生儿感染性肺炎具有较好的临床疗效,能改善患儿临床症状,增强机体免疫力,降低血清炎性因子,具有一定的临床推广应用价值。

静注人免疫球蛋白质量评价与研究

目的评价国内上市不同企业生产的静注人免疫球蛋白(pH4)的质量状况及发现存在的问题。方法对20家生产企业115批次静注人免疫球蛋白(pH4)依据法定质量标准进行检验。同时开展了不良反应影响因素(IgA残留量、促凝血物质残留)、病毒残留风险及Fc段生物学活性等3个方面的探索性研究。对检验及探索性研究所得的结果进行统计分析,综合评价静注人免疫球蛋白(pH4)的质量现状。结果 115批样品合格率为100.0%。IgA含量分布为(1~571)μg·mL;,活化的人凝血因子Ⅺ(FⅪa)活性分布为(0.4~120.7) mIU·mL;,不同企业产品的IgA含量与FⅪa活性差异较大。59批样品Fc活性结果分布78%~319%,均高于药典要求的60%的限度。115批样品均无艾滋病毒、乙肝病毒、丙肝病毒及人细小病毒B19残留。结论本品的总体质量状况较好。但不同企业间产品的IgA残留量、FⅪa活性、抗补体活性及Fc段生物活性等指标上有较大差异,不同企业间产品质量仍有一定的差距。质量标准可进一步完善,可增订IgA含量项。企业应定期对产品开展Fc段生物学活性检测。

甘露聚糖肽口服液联合人免疫球蛋白治疗特发性血小板减少性紫癜的临床研究

目的探讨甘露聚糖肽口服液联合人免疫球蛋白治疗特发性血小板减少性紫癜的临床疗效。方法选取2014年8月—2015年8月在上海市浦东医院接受治疗的特发性血小板减少性紫癜患者74例,随机分为对照组和治疗组,每组各37例。对照组iv静注人免疫球蛋白(pH4),0.4 g/kg,1次/d。治疗组在对照基础上口服甘露聚糖肽口服液,1支/次,3次/d。两组患者均治疗4周。观察两组的临床疗效,比较治疗前后两组T淋巴细胞亚群、血小板相关抗体、血小板计数(PLT)、白细胞介素-4(IL-4)、止血时间和血小板数量达正常时间的情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为78.38%、94.59%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者CD^(3+)和CD^(4+)的水平及CD^(4+)/CD^(8+)的比值均显著升高,而CD^(8+)的水平显著下降,同组治疗前后差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标的改善程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血小板相关免疫球蛋白G(PA IgG)、血小板相关免疫球蛋白A(PA IgA)和血小板相关免疫球蛋白M(PA IgM)的水平均明显降低,同组治疗前后差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标的改善程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者PLT及IL-4水平均明显升高,同组治疗前后差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标的改善程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组止血时间和血小板数量达正常时间均早于对照组,两组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论甘露聚糖肽口服液联合人免疫球蛋白治疗特发性血小板减少性紫癜具有较好的临床疗效,可提高患者机体免疫功能,加快止血,具有一定的临床推广应用价值。