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一种新的中性粒细胞活化因子—NAP—1/IL-8
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作者 陈红清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期318-319,共2页
中性粒细胞在组织中的聚集现象是炎症反应的典型特征之一。在某些病理状态如感染、损伤、缺血及肿瘤等,也可见到此类现象,尤其是在细菌性感染时,中性粒细胞可选择性地被吸引至组织以吞噬并消灭入侵的病原菌。
关键词 中性 粒细胞 活化因子 nap-1 il-8
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直组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的纯化与鉴定
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作者 周圆 金冬雁 +1 位作者 徐荣辉 侯云德 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第6期719-723,共5页
本文利用SDS-PAGE及蛋白质电泳印迹技术,从带有相应表达质粒的重组大肠杆菌裂解液中,将所表达的重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)转移至聚偏二氟乙烯膜上,直接进行N-末端15个氨基酸的序列分析,从而确证该目标蛋... 本文利用SDS-PAGE及蛋白质电泳印迹技术,从带有相应表达质粒的重组大肠杆菌裂解液中,将所表达的重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)转移至聚偏二氟乙烯膜上,直接进行N-末端15个氨基酸的序列分析,从而确证该目标蛋白得到高效表达和正确加工。随后采用Bio-Gel P30凝胶过滤层析和Mono-S阳离子交换层析对重组人NAP-1/IL-8进行了分离纯化,纯化产品达到SDS-PAGE纯。利用琼脂糖平板法测定了纯化产品的嗜中性白细胞趋化活性,推算其比活为2.8×10~5U/mg蛋白。又利用SDS-PAGE测出重组NAP-1/IL-8的分子量约为8.5kD,但根据凝胶过滤层析的洗脱时间推定,在溶液中确实存在分子量稍大于14.4kD的NAP-1/IL-8二聚体。 展开更多
关键词 nap-1/il-8 提纯 鉴定
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人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因的修正及修正基因在大肠杆菌中的表达
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作者 徐荣辉 金冬雁 +4 位作者 王平 袁劲松 吴淑华 侯云德 梁希若 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第5期535-540,共6页
本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果... 本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果符合设计要求。在此基础上,利用原核高效表达载体pBV220在P_RP_L串联启动子的控制下在大肠杆菌中对该基因进行了表达,并测定了重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的嗜中性白细胞趋化活性。本工作为开展人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因工程及蛋白质工程的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞因子 nap-1/il-8 大肠杆菌
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Establishment and Application of A Human Primary Keratinocyte Inflammation Model for Cosmetic Raw Material Screening
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作者 Sun Fanghui Song Xiaojie Huo gang 《China Detergent & Cosmetics》 CAS 2023年第3期58-62,共5页
Using inducers to induce cells to produce inflammatory response is a common in vitro experimental method to study inflammation.However,there are relatively few inflammatory models developed for the cosmetic industry,a... Using inducers to induce cells to produce inflammatory response is a common in vitro experimental method to study inflammation.However,there are relatively few inflammatory models developed for the cosmetic industry,and there are also great differences in the control of model induction,the selection of inflammatory indicators,and the concentration of inducers.Therefore,in this paper,by systematically studying the effects of Lipopolysaccharide(LPS)on the cell viability,the levels of IL-1α,IL-8 and ROS of human primary keratinocytes,a skin inflammation model based human primary keratinocyte was developed.The results showed that 0.01~100μg/mL LPS had no significant effect on the cell viability of human primary keratinocytes,while 100μg/mL LPS could simultaneously induce human primary keratinocytes to produce large amounts of IL-1αand IL-8,and 0.01μg/mL LPS could induce plentiful ROS.Therefore,a skin inflammation model for differential induction of different inflammatory indicators was established,and the sample OSM2021041301 was tested with this model,it was found that sample OSM2021041301 could significantly inhibit LPS-induced elevated IL-1αand IL-8 levels,the inhibitory effect on LPS-induced elevated ROS level was weak.The results indicated that OSM2021041301 has certain anti-inflammatory effect on inflammation caused by the increase of IL-1α,IL-8 and ROS induced by LPS and its analogues. 展开更多
关键词 LPS human primary keratinocytes inflammation model il-1Α il-8 ROS
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人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因的半化学半酶促合成及在大肠杆菌的表达 被引量:1
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作者 金冬雁 徐荣辉 +2 位作者 周圆 王平 侯云德 《中国科学(B辑)》 CSCD 北大核心 1992年第9期951-957,共7页
本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP... 本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP-1/IL-8的表达量可占菌体可溶性蛋白的18.5%,而在实验室规模的发酵试验中,其表达量则占可溶性蛋白的10.9%.经凝胶过滤层析和阳离子交换层析两个简单的纯化步骤,得到SDS-PAGE纯的重组NAP-1/IL-8,采用琼脂糖平板法进行测定,表明所得NAP-1/IL-8纯品在<10ng/ml的水平上显示出强烈的嗜中性白细胞趋化活性,家兔皮肤试验的结果显示,重组人NAP-1/IL-8可在家兔体内引起早发型超敏反应,采用Edman降解法测定重组人NAP-1/IL-8纯品N末端36个氨基酸的序列,与天然人NAP-1/IL-8的成熟分子完全符合。 展开更多
关键词 nap-1 il-8 基因 化学合成
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