期刊文献+
共找到54篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
Preparation, characterization and radiolabelling of antigranulocyte monoclonal antibody
1
作者 GUZhaoxiang LINXiangtong 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期193-196,共4页
The human granulocytes were isolated.Using hybridoma techniques,a hybridoma cell line (HSN) producing monoclonal antibody(McAb) against human granulocyte was obtained.The antibody belonged to IgG1 subclass.It was conf... The human granulocytes were isolated.Using hybridoma techniques,a hybridoma cell line (HSN) producing monoclonal antibody(McAb) against human granulocyte was obtained.The antibody belonged to IgG1 subclass.It was confirmed by immunohistochemical tests that HSN reacted selectively not only with human granulocytes.but also with their bone marrow precursors.Whereas human lymphocytes and red blood cells retained negative in the tests.No cross-reaction was observed with the peripheral blood cells in other animals.Its affinity constant was 5.7×10^8 L/mol,and the number of epitopes per granulocyte was 4.7×10^5.Monoclonal antibody displayed no loss of immunoreactivty after labelled with ^99mTc. 展开更多
关键词 人体克隆抗体99mTc 辐照示踪 备制
下载PDF
THE DEVELOPMENT OF MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST rhTNF AND ITS CURATIVE EFFECTSON E.Coli INFECTED MICE
2
作者 郭小清 王爱霞 +1 位作者 陈实平 邱志峰 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1997年第4期229-231,共3页
Fifteen hybridoma cell lines producing monoclonal antiboclies (McAb) against recombinant human tu-mor necrosis factor a (rhTNFa) have been established by fusing SP 2/0 cells with spleen cells from aBALB/c mouse immuni... Fifteen hybridoma cell lines producing monoclonal antiboclies (McAb) against recombinant human tu-mor necrosis factor a (rhTNFa) have been established by fusing SP 2/0 cells with spleen cells from aBALB/c mouse immunized with rhTNFa. Following J M Davis’s Works, semi-solid medium was usedfor initial cloning. Five of them were studied further. Their main chromosome- numbers range were 96 to105, all of them were IgG1 subclass. The affinities of these McAbs were estimated to be 1. 25 ×108 mol/L, 1. 12×108 mol/L, 2. 34×108 mol/L, 8. 55 × 107 mol/L, 1. 04×108 mol/L, respectively.Two groups of mice challenging with E Coli (107 organisms), one group treated with 2mg/kg anti-TNF monoclonal antibody, the other did not. There was a higher survival rate in treated group, the serumTNF level was significantly lower too, and the untreated mice had severe pathologic changes in vlscera. 展开更多
关键词 recombinant human tumor necrosis factor α hybridoma cell monoclonal antibody (McAb )
全文增补中
抗TREM2抗体的制备及生物学活性的初步研究 被引量:1
3
作者 胡钰清 冯艳平 +3 位作者 梁家蓓 郝锋 宁金鹰 李莉 《中南药学》 CAS 2024年第6期1429-1434,共6页
目的制备抗髓系细胞触发受体2(TREM2)抗体并初步探究其生物学活性。方法采用杂交瘤筛选的方法,获得稳定分泌抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,并对杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行筛选,选择结合效果最佳的单克隆抗体进行人源化改造得到嵌合... 目的制备抗髓系细胞触发受体2(TREM2)抗体并初步探究其生物学活性。方法采用杂交瘤筛选的方法,获得稳定分泌抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,并对杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行筛选,选择结合效果最佳的单克隆抗体进行人源化改造得到嵌合抗体;对嵌合抗体进行进一步的人源化改造,采用酶联免疫吸附法(ELISA)及流式细胞术(FACS)检测人源化抗体的抗原抗体结合活性;采用生物膜干涉技术(BLI)检测人源化抗体与人TREM2结合动力学;通过基于报告基因的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)生物学活性测定方法,检测人源化抗体的依赖细胞介导的细胞毒效应;使用免疫缺陷小鼠对人源化抗体进行体内药效实验。结果利用杂交瘤技术成功筛选到稳定表达抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,对杂交瘤细胞株进行进一步人源化改造,获得纯度高于95%的人源化抗体h7B6-11,抗体h7B6-11与TREM2-His蛋白具有高度亲和性,且对293T-TREM2细胞的ADCC活性明显强于对照抗体。体内药效实验结果显示,h7B6-11与程序性死亡受体1(PD1)抗体联合用药抑制肿瘤生长效果明显。结论抗体h7B6-11具有高度亲和力和良好的生物学活性,有望开发成为新一代肿瘤免疫治疗的抗体药物。 展开更多
关键词 髓系细胞触发受体2 杂交瘤 单克隆抗体 人源化抗体 生物学活性
下载PDF
EB病毒转化的人外周血淋巴细胞与SHM—D33细胞系融合制备人单克隆抗体 被引量:5
4
作者 崔运昌 朱勇 +3 位作者 高磊 孙忱 米力 董帮权 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期133-136,共4页
用EB病毒转化人外周血淋巴细胞,因克隆化不成功,分泌不稳定而失败。将转化的细胞与KR—12细胞融合,因融合率低而未成功。将转化细胞与SHM—D33细胞融合,成功地建立了3株稳定分泌人单抗的杂交瘤细胞,均产生IgMλ型抗体,30~50μg/ml上清... 用EB病毒转化人外周血淋巴细胞,因克隆化不成功,分泌不稳定而失败。将转化的细胞与KR—12细胞融合,因融合率低而未成功。将转化细胞与SHM—D33细胞融合,成功地建立了3株稳定分泌人单抗的杂交瘤细胞,均产生IgMλ型抗体,30~50μg/ml上清。其中1株(86—2)已连续传代18个月,未经克隆化仍稳定分泌抗体,已适应低血清培养,抗体分泌量不变;可用裸鼠制腹水。 展开更多
关键词 EB病毒 杂交瘤 单克隆抗体
下载PDF
人酸性成纤维细胞生长因子单克隆抗体的制备 被引量:3
5
作者 王芳 薛沿宁 +4 位作者 王会信 徐秀英 刘农乐 邵宁生 周廷冲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期267-270,共4页
以纯化的重组人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,获得一株稳定分泌抗haFGF的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其DNA含量为脾细胞与SP2/0细胞DNA含量之和,所分泌抗体为小鼠IgG_1亚类。免疫印迹显... 以纯化的重组人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,获得一株稳定分泌抗haFGF的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其DNA含量为脾细胞与SP2/0细胞DNA含量之和,所分泌抗体为小鼠IgG_1亚类。免疫印迹显示:此单抗只与大肠杆菌中的haFGF有结合,与牛aFGF则没有结合反应。 展开更多
关键词 细胞生长因子 杂交瘤 单克隆抗体
下载PDF
人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定 被引量:2
6
作者 戴楠 曹晓静 +4 位作者 杨宇馨 李梦侠 易维今 王东 胡川闽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期255-259,共5页
目的制备人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(hAPE1)单克隆抗体(mAb)并对其生物学特性进行鉴定。方法以hAPE1融合蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用细胞融合、克隆化技术和间接ELISA法获得并筛选针对hAPE1的杂交瘤细胞,以体内诱生法产生腹水,并用Pro... 目的制备人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(hAPE1)单克隆抗体(mAb)并对其生物学特性进行鉴定。方法以hAPE1融合蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用细胞融合、克隆化技术和间接ELISA法获得并筛选针对hAPE1的杂交瘤细胞,以体内诱生法产生腹水,并用Protein G柱亲和纯化得到hAPE1 mAb。采用秋水仙素阻断法、Western blot和间接ELISA法鉴定mAb的染色体核型、特异性、种属交叉反应、亚类、效价和亲和力,并应用于免疫荧光、免疫细胞化学和免疫组化实验中评价mAb性能。结果获得2株分泌稳定、高特异性的hAPE1 mAb的杂交瘤细胞株2-G1和4-F6,其效价均超过1:107,Ig亚类分别是IgG2b和IgG3,亲和常数分别为1.8×10-7和3.4×10-5,与兔、小鼠、大鼠无种属交叉性。2-G1mAb可应用于免疫细胞化学、免疫细胞荧光和免疫组织化学等实验技术中。结论成功获得2株稳定分泌抗hAPE1mAb的杂交瘤细胞株,产生的mAb具有高纯度、高效价和高特异性的特性,能特异性识别hAPE1天然蛋白和融合蛋白,为开展多种免疫学实验及研究提供必要的物质基础。 展开更多
关键词 人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶 杂交瘤 单克隆抗体
下载PDF
抗人IgG-抗HRP双特异性单克隆抗体细胞株的建立与鉴定 被引量:3
7
作者 徐青 汪厚平 +1 位作者 巫山 邓伟吾 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期225-227,238,共4页
目的制备人 Ig G检测用双特异性单克隆抗体诊断试剂。方法用人 Ig G免疫 BAL B/c小鼠脾细胞与抗HRPMc Ab杂交瘤细胞 HAT敏感株进行第 2次融合。结果获得 5株能稳定分泌抗人 Ig-抗 HRP的双特异性单克隆抗体的杂交-杂交瘤细胞 ,分泌的抗... 目的制备人 Ig G检测用双特异性单克隆抗体诊断试剂。方法用人 Ig G免疫 BAL B/c小鼠脾细胞与抗HRPMc Ab杂交瘤细胞 HAT敏感株进行第 2次融合。结果获得 5株能稳定分泌抗人 Ig-抗 HRP的双特异性单克隆抗体的杂交-杂交瘤细胞 ,分泌的抗体亚类其中 1株为 Ig G2 a/Ig G1,余为 Ig G1 /Ig G1 。培养上清与腹水效价分别为 2 - 7,10 - 5以上 ,经 HRP亲和层析有 2个蛋白吸收峰 ,Bs Mc Ab存在于第 2峰。用 EL ISA法及免疫印迹试验证明 :Bs Mc Ab只与人 Ig G有特异性反应。杂交 -杂交瘤细胞连续 3月培养和反复冻存 ,复苏后仍能稳定保持分泌 Bs Mc Ab的能力。结论该方法制备简单 ,灵敏高度 。 展开更多
关键词 IGG 抗人IgG-抗HRP 双特异性单克隆抗体 诊断
下载PDF
抗人肝癌单克隆抗体HL_2的制备及鉴定 被引量:2
8
作者 林苹 肖远康 +1 位作者 曹皆仙 罗德元 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期33-36,共4页
用肝癌细胞株QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721以贯序法免疫BALB/c小鼠,获得一株分泌肝癌单抗的杂交窟株HL_2,其染色体数目为97—105。单抗HL_2系IgG_2b亚类。吸收实验及阻断实验证明HL_2抗原与CEA、AFP、HBsAg、HBcAg及HBeAg无免疫同源性... 用肝癌细胞株QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721以贯序法免疫BALB/c小鼠,获得一株分泌肝癌单抗的杂交窟株HL_2,其染色体数目为97—105。单抗HL_2系IgG_2b亚类。吸收实验及阻断实验证明HL_2抗原与CEA、AFP、HBsAg、HBcAg及HBeAg无免疫同源性。ABC法和ELISA法说明单抗HL_2与四株肝癌细胞、六例肝癌组织均呈明确阳性反应,除与SGC-7901、H_(128)、K_(562)、Hela细胞株及部分胚胎肝脏,胚胎结肠有较弱性反应外,与肝癌旁组织、正常肝脏、其它肿瘤组织和细胞株、二种正常人细胞及其它胚胎组织无反应。显示了单抗HL_2的特异性较好、阳性率较高,是一个有应用前景的单抗。 展开更多
关键词 肝细胞癌 杂交瘤 单克隆抗体 HL2
下载PDF
人促甲状腺激素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:2
9
作者 罗敏 陈淑菁 +3 位作者 姬秋和 曹文俊 赵萸 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1996年第3期159-161,共3页
以进口纯人促甲状腺激素(h—TSH)作免疫原,经用Galfre等杂交瘤制备法,分别制备成13B4、13C4、8H10、3E4四株具有抗h—TSH特异性,与促黄体素、促卵泡素、绒毛膜促性腺素无明显交叉反应。具有稳定分泌... 以进口纯人促甲状腺激素(h—TSH)作免疫原,经用Galfre等杂交瘤制备法,分别制备成13B4、13C4、8H10、3E4四株具有抗h—TSH特异性,与促黄体素、促卵泡素、绒毛膜促性腺素无明显交叉反应。具有稳定分泌功能的杂交细胞株。经亚型鉴定均为IgG1。液相中与125I—hTSH的最大结合率依次为13B4、3E4、8H10和13C4,分别为61%、59%、56%和34%。表位分析表明,4株单抗主要针对两个不同表位。在此基础上已成功地建立h—TSH固相免放和酶免吸附超敏测定法。 展开更多
关键词 垂体 促甲状腺激素 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
下载PDF
抗重组人乳腺珠蛋白单克隆抗体的制备及其特异性鉴定 被引量:1
10
作者 刘秀娜 郭建秀 +1 位作者 罗羽 胡川闽 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第6期603-604,607,I0001,F0002,共5页
目的通过杂交瘤技术获得特异性抗hMAM单克隆抗体,为进一步研制基于hMAM的乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法以纯化的重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用杂交瘤技术制备、间接ELISA法及免疫组化法筛选出能稳定分泌特异性抗hMAM的单克... 目的通过杂交瘤技术获得特异性抗hMAM单克隆抗体,为进一步研制基于hMAM的乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法以纯化的重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用杂交瘤技术制备、间接ELISA法及免疫组化法筛选出能稳定分泌特异性抗hMAM的单克隆抗体细胞株。结果通过杂交瘤技术获得了2株能分泌特异性抗hMAM单克隆抗体的杂交瘤细胞株hMAM-A2及hMAM-B7,其分泌的单克隆抗体亚类均属于IgG1,Western blotting结果显示2株细胞分泌的单克隆抗体特异性强能与34kDa处的hMAM抗原形成单一的蛋白质显色条带,免疫组化结果显示其仅与乳腺癌组织呈阳性反应,与其他肿瘤组织不发生交叉反应。结论利用鼠-鼠杂交瘤技术成功的制备了2株稳定分泌高效价、高特异性抗hMAM的杂交瘤细胞株。 展开更多
关键词 人乳腺珠蛋白 乳腺癌 杂交瘤技术 单克隆抗体
下载PDF
体外免疫建立分泌卵巢癌反应性单克隆IgG人-鼠杂交瘤 被引量:1
11
作者 邬淑云 温淦升 +3 位作者 徐方云 刘秋如 龚文华 余鹰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期182-184,共3页
用正丁醇提取的人卵巢癌细胞ao10/17抗原,置于含免疫反应剂的无血清培基中免疫人脾细胞。经融合、筛选和克隆化,建立了9株分泌人源性单克隆IgG抗体(HmAb)的人-鼠杂交瘤细胞系AF1~AF9。酶标抗体竞争抑制试验... 用正丁醇提取的人卵巢癌细胞ao10/17抗原,置于含免疫反应剂的无血清培基中免疫人脾细胞。经融合、筛选和克隆化,建立了9株分泌人源性单克隆IgG抗体(HmAb)的人-鼠杂交瘤细胞系AF1~AF9。酶标抗体竞争抑制试验表明,其中HmAbAF5和AF8能识别卵巢癌抗原分子上的不同表位;杂交瘤细胞系所分泌的HmAb的效价高。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 单克隆抗体 体外免疫 人鼠杂交瘤
下载PDF
抗人BPI_(23)单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:1
12
作者 胡智颖 万云霞 +4 位作者 郭素娟 李蕴 何秀娟 龙军 安云庆 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第10期1097-1101,共5页
目的采用杂交瘤技术制备抗人BPI23单克隆抗体,并对其应用进行初步分析。方法免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按常规方法融合;用间接ELISA法和Western-blot筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株;阳性克隆用有限稀释法亚克隆3次获得稳定分泌抗人BP... 目的采用杂交瘤技术制备抗人BPI23单克隆抗体,并对其应用进行初步分析。方法免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按常规方法融合;用间接ELISA法和Western-blot筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株;阳性克隆用有限稀释法亚克隆3次获得稳定分泌抗人BPI23单克隆抗体的杂交瘤细胞株;扩增杂交瘤细胞注入小鼠腹腔后制备腹水;纯化腹水中的单抗并对抗体类型进行鉴定;用Western-blot分析抗体的特异性;用间接ELISA法测抗体效价;将分离纯化的正常人外周血中性粒细胞和单个核细胞制成涂片,用抗人BPI23单克隆抗体进行免疫染色。结果获得3个(1B4、9C12和2H11)稳定分泌抗人BPI23单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型分别为κ型IgM、κ型IgG1和κ型IgG1;抗体效价分别为1.28×105、1.28×105和4.1×106,纯化后抗体含量分别为0.208g/L、2.03g/L和3.88g/L;3种纯化抗体均能与本实验制备的人BPI23和市售人BPI55标准品特异性结合,而不能与小鼠BPI25和人LBP结合;在免疫组化实验中,1B4、9C12和2H11单抗均能与人中性粒细胞中的BPI特异性结合。结论成功制备了人BPI23特异性单克隆抗体,为BPI检测试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 人BPI23 杂交瘤细胞 单克隆抗体
下载PDF
人骨髓间充质干细胞表面抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定 被引量:1
13
作者 王晓东 王明海 +3 位作者 张亚 张德强 张锡庆 王科文 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第1期10-12,73,共4页
目的制备人骨髓间充质干细胞(MSCs)的特异性细胞表面抗原的单克隆抗体。方法以人骨髓MSCs为抗原,常规方法免疫Balb/c小鼠,细胞融合制备杂交瘤细胞,并用免疫荧光法在流式细胞仪上对杂交瘤产生的抗体进行初测和复测。结果通过分泌的抗体与... 目的制备人骨髓间充质干细胞(MSCs)的特异性细胞表面抗原的单克隆抗体。方法以人骨髓MSCs为抗原,常规方法免疫Balb/c小鼠,细胞融合制备杂交瘤细胞,并用免疫荧光法在流式细胞仪上对杂交瘤产生的抗体进行初测和复测。结果通过分泌的抗体与人MSCs表面抗原特异性结合的鉴定,进行杂交瘤筛选,将复测为阳性的克隆连续克隆化培养,获得两株持续分泌抗人MSCs的杂交瘤细胞株:898、8f9。两株单抗经体外连续传代培养,生长良好,稳定分泌抗体。结论人骨髓MSCs的特异性细胞表面抗原单克隆抗体可望在MSCs的提纯和体外富集、特异性骨病的诊断等方面有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 单克隆抗体 杂交瘤
下载PDF
人O型外周血淋巴细胞制备人单克隆抗-A细胞株 被引量:2
14
作者 郭忠慧 朱自严 +1 位作者 赵俸涌 向东 《中国输血杂志》 CAS 2020年第11期1155-1157,共3页
目的以正常O型人外周血淋巴细胞为实验对象,制备能稳定分泌人单克隆抗-A或抗-B的杂交瘤细胞株,在本实验室建立人血型单克隆抗体制备流程。方法使用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMCs),从狨猴B95-8细胞培养上清收获EB病毒(Epstei... 目的以正常O型人外周血淋巴细胞为实验对象,制备能稳定分泌人单克隆抗-A或抗-B的杂交瘤细胞株,在本实验室建立人血型单克隆抗体制备流程。方法使用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMCs),从狨猴B95-8细胞培养上清收获EB病毒(Epstein-Barr virus),用于转化B淋巴细胞,血清学微量板法筛选能够分泌目标抗体的细胞孔。显微镜下挑选分离单个克隆的细胞团,分泌特异性抗体的转化细胞与SHM-D33瘤细胞进行融合,经HOTD选择性培养,血清学筛选,得到分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。结果从随机O型个体的外周血淋巴细胞,成功构建持续稳定分泌人源IgM单克隆抗-A的细胞株。结论本研究提供一种可行的技术路线,为从人外周血淋巴细胞制备有诊断和筛选价值的人源血型单克隆抗体细胞株奠定基础。 展开更多
关键词 红细胞血型 人单克隆抗体 外周血单个核细胞 杂交瘤技术
下载PDF
人血清白蛋白单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用 被引量:1
15
作者 马政辉 张丽芸 +1 位作者 刘莹 陈政良 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期351-355,共5页
目的制备人血清白蛋白(HSA)单克隆抗体(单抗)并以之制备亲和层析柱去除甘露聚糖结合凝集素(MBL)制剂中污染的HSA。方法采用杂交瘤技术制备单抗,通过ELISA、Western-blotting鉴定其特性;制备亲和层析柱去除MBL制剂中的污染HSA。结果筛选... 目的制备人血清白蛋白(HSA)单克隆抗体(单抗)并以之制备亲和层析柱去除甘露聚糖结合凝集素(MBL)制剂中污染的HSA。方法采用杂交瘤技术制备单抗,通过ELISA、Western-blotting鉴定其特性;制备亲和层析柱去除MBL制剂中的污染HSA。结果筛选出4株稳定分泌HSA单抗的杂交瘤细胞株1C11、2E9、3A5和4H1,单抗亚类均为IgG1,亲和常数分别为7.19×109、1.46×109、6.94×109和2.28×1010;1C11与3A5的识别位点相似或相同,其他单抗识别位点均不同;4H1可与兔血清发生交叉反应,余者与其他种属血清均无交叉反应。结论所制备的HSA单抗1C11、2E9、3A5能特异结合HSA且与其他种属血清无交叉反应,抗HSA单抗亲和层析柱可用于去除人血清蛋白制剂中的污染HSA。 展开更多
关键词 人血清白蛋白 单克隆抗体 亲和层析 杂交瘤细胞株
下载PDF
人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的研制 被引量:2
16
作者 张力 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期338-340,共3页
目的获得针对人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体。方法hCG蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞NS-1按8∶1比例融合,间接ELISA法筛选阳性克隆,有限稀释法进行克隆化培养;制备腹水抗体;采用间接ELISA法鉴定抗体亚型和测定抗体... 目的获得针对人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体。方法hCG蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞NS-1按8∶1比例融合,间接ELISA法筛选阳性克隆,有限稀释法进行克隆化培养;制备腹水抗体;采用间接ELISA法鉴定抗体亚型和测定抗体效价。结果得到6株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株;抗体经鉴定均为IgG1、κ型,效价均达10-5以上。结论所获得的6株杂交瘤细胞株均有较强稳定分泌抗-hCG单克隆抗体的能力。这为有关hCG的检测、hCG本身相关研究以及避孕疫苗的研制打下了基础。 展开更多
关键词 人绒毛膜促性腺激素 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
下载PDF
利用D--外周血B细胞构建单克隆抗-C杂交瘤细胞株 被引量:1
17
作者 郭忠慧 赵俸涌 +7 位作者 张德梅 向东 张嘉敏 杨颖 李勤 杨启修 王晨 朱自严 《中国输血杂志》 CAS 2022年第4期400-404,共5页
目的以1例稀有的O型D--献血者外周血单个核细胞为实验对象,制备分泌Rh血型系统单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法无菌分离外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞(PBMCs),利用B95-8培养上清中的EB病毒(EBV),转化PBMCs中的B淋巴... 目的以1例稀有的O型D--献血者外周血单个核细胞为实验对象,制备分泌Rh血型系统单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法无菌分离外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞(PBMCs),利用B95-8培养上清中的EB病毒(EBV),转化PBMCs中的B淋巴细胞使其母细胞化。血清学筛选分泌特异性抗体的单一B细胞克隆并扩大培养,与SHM-D33瘤细胞在电刺激下融合,经含有次黄嘌呤(Hypoxantine,H)、氨基蝶呤(Aminopterin,A)、胸腺嘧啶核苷(Thymidine,T)、脱氧胞嘧啶核苷(2-Deoxycytide,D)、毒毛旋花苷(Ouabain,O)的培养基,即HOTD(HATD+Ouabain)选择性培养、微量板抗体筛选以及有限稀释亚克隆,建立分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,血清学和流式细胞试验鉴定抗体特异性。结果从D--外周血转化B淋巴细胞培养上清中,初筛得到与R;R;(DCe/DCe)O型红细胞凝集,与R;R;(DcE/DcE)O型红细胞不凝集的单个细胞克隆3A6-C6,初步鉴定抗体特异性为抗-C,与SHM-D33骨髓瘤细胞杂交后建立了持续稳定分泌IgM抗-C的杂交瘤细胞株。结论本研究从外周血B细胞开始构建单克隆杂交瘤细胞株,为Rh血型系统血清学单克隆试剂的研发和改造奠定了基础。 展开更多
关键词 D--表型 人单克隆抗体 抗-C 杂交瘤技术
下载PDF
用p[Tj(a-)]外周血淋巴细胞建立抗-PP1P^(k)杂交瘤细胞株 被引量:1
18
作者 郭忠慧 朱自严 +2 位作者 向东 赵俸涌 杨颖 《中国输血杂志》 CAS 2023年第4期294-298,共5页
目的建立分泌抗-PP1P^(k)(又称抗-Tj^(a))的淋巴母细胞样细胞系(lymphoblastoid cell line,LCL)和单克隆杂交瘤细胞株。方法无菌条件下常规方法制备p[Tj(a-)]血型献血者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),用E... 目的建立分泌抗-PP1P^(k)(又称抗-Tj^(a))的淋巴母细胞样细胞系(lymphoblastoid cell line,LCL)和单克隆杂交瘤细胞株。方法无菌条件下常规方法制备p[Tj(a-)]血型献血者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)转化单个核细胞中的B淋巴细胞,使其增殖形成B淋巴母细胞样细胞克隆。用菠萝酶处理的正常AB型和O型红细胞以及p[Tj(a-)]红细胞筛选培养上清,通过显微吸引分离技术获得分泌特异性抗-PP1P^(k)的LCL,与SHM-D33骨髓瘤细胞进行融合。异源杂交瘤细胞经次黄嘌呤(H)-氨基蝶呤(A)-胸腺嘧啶(T)-脱氧胞嘧啶核苷(D)-毒毛旋花苷(O)即HOTD培养基选择性培养、抗体筛选以及有限稀释亚克隆,建立分泌特异性抗体的单克隆杂交瘤细胞株。结果从O型p[Tj(a-)]献血者外周血B淋巴细胞EBV转化细胞培养上清中,初筛得到与正常红细胞全部凝集,与p[Tj(a-)]红细胞不凝集的单个淋巴母细胞样克隆5E1-E5,初步鉴定培养上清具有抗-PP1P^(k)特异性。随后利用杂交瘤技术,将5E1-E5细胞与SHM-D33骨髓瘤细胞进行融合,建立了持续稳定分泌IgM抗-PP1P^(k)的单克隆杂交瘤细胞株。结论本研究通过EBV转化和杂交瘤技术建立了分泌抗-PP1P^(k)的人单克隆细胞株,这项工作使大规模筛选稀有p[Tj(a-)]血型成为可能,对我国稀有血型库的建设具有重要意义。 展开更多
关键词 p[Tj(a-)] 抗-PP1P^(k) 抗-Tj^(a) 杂交瘤技术 人单克隆抗体
下载PDF
抗人重组SCF单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定 被引量:2
19
作者 薛生 孙瑛勋 +1 位作者 朱元晓 沈倍奋 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1993年第4期35-37,共3页
本研究利用PEX31B作为载体,在大肠杆菌表达出重组人SCF融合蛋白。用该蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠。通过鼠-鼠杂交瘤技术,成功地获得4株分泌抗人重组SCF单克隆抗体(下称单抗)的杂交瘤细胞系。经检测,它们所分泌的抗体亚类均为IgG1,免... 本研究利用PEX31B作为载体,在大肠杆菌表达出重组人SCF融合蛋白。用该蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠。通过鼠-鼠杂交瘤技术,成功地获得4株分泌抗人重组SCF单克隆抗体(下称单抗)的杂交瘤细胞系。经检测,它们所分泌的抗体亚类均为IgG1,免疫印迹试验和抗体特异性鉴定证实,4株单抗均能特异性地识别可溶性SCF。抗SCF单抗杂交瘤细胞系的建立,为深入研究SCF的生物学特性、功能以及SCF产品的纯化,提供了有力的工具。 展开更多
关键词 重组融合蛋白 杂交瘤 单克隆抗体
下载PDF
人乳腺珠蛋白单克隆抗体制备及生物特性鉴定 被引量:1
20
作者 杨锡琴 吕晓娟 +6 位作者 王国华 黄焰 宋晓国 陈堃 修冰水 冯晓燕 张贺秋 《中国实验诊断学》 2012年第11期1965-1968,共4页
目的构建重组hMAM蛋白,通过杂交瘤技术获得特异性的抗hMAM的单克隆抗体,并鉴定其生物特性。方法克隆表达hMAM 8-93AA、20-52AA、43-70AA、56-82AA、67-93AA区段的抗原,以纯化的pBV220/hMAM(8-93AA)为免疫原,杂交瘤技术筛选出能稳定分泌... 目的构建重组hMAM蛋白,通过杂交瘤技术获得特异性的抗hMAM的单克隆抗体,并鉴定其生物特性。方法克隆表达hMAM 8-93AA、20-52AA、43-70AA、56-82AA、67-93AA区段的抗原,以纯化的pBV220/hMAM(8-93AA)为免疫原,杂交瘤技术筛选出能稳定分泌抗hMAM单克隆抗体的细胞株。采用Western blotting和免疫组织化学染色方法鉴定其表位和特异性。结果获得6个高纯度的重组抗原,通过pBV220/hMAM(8-93AA)免疫小鼠后,获得2株稳定分泌抗hMAM抗体的杂交瘤细胞株。Western blotting结果显示MAb1、MAb2分别是识别hMAM20-52AA、hMAM52-67AA片段的特异性单克隆抗体。免疫组织化学染色结果显示该抗体仅在乳腺组织中呈阳性反应,在其他肿瘤组织中不反应。结论通过杂交瘤技术成功制备了两株稳定分泌且高特异性的抗hMAM不同位点的单克隆抗体细胞株,为进一步研制高灵敏的乳腺癌早期检测试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 人乳腺珠蛋白 杂交瘤技术 单克隆抗体
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部