人γδT细胞能够识别肿瘤相关蛋白AGR2

目的筛选人外周血γδT细胞识别的肿瘤相关蛋白配体,为阐明γδT细胞的抗原识别机制及抗肿瘤免疫效应机制奠定基础。方法以3种特异性结合肿瘤的CDR3δ序列合成肽为探针,通过人类全蛋白质组芯片筛选CDR3δ合成肽相互作用的蛋白;流式细胞术检测蛋白在肿瘤细胞系的表达;原核表达纯化肿瘤相关蛋白AGR2(前梯度2蛋白),ELISA验证其与探针肽的结合;固相化包被蛋白,检测人外周血单个核细胞中γδT细胞的活化相关分子的表达;乳酸脱氢酶释放法检测蛋白对γδT细胞体外细胞毒活性的作用。结果生物素标记的CDR3δ肽,共筛选到与蛋白质组芯片结合的候选蛋白配体共6种,分别是PHF21A、LDB3、SYF2、PPP1R14A、AGR2和SYAP1;流式结果显示AGR2在几种肿瘤细胞系细胞中均有表达,但表达水平不一致;ELISA结果显示GST-AGR2能特异性地结合CDR3δ肽OT3;固相包被GST-AGR2,能显著促进γδT细胞活化相关分子CD69、CD25的表达;与GST-AGR2预孵育能在体外显著促进γδT细胞对MDA-MB-231和MCF-7细胞的细胞毒作用。结论肿瘤相关蛋白AGR2能够在体外促进γδT细胞的活化,增强γδT细胞对乳腺癌细胞的细胞毒活性,可能是γδT细胞识别的肿瘤相关蛋白配体。

人前梯度蛋白2在垂体腺瘤中的表达及其与细胞内增殖抗原Ki-67和基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子的相关性

目的研究人前梯度蛋白2(AGR2)在垂体腺瘤组织中的表达及其与细胞内增殖抗原Ki-67、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法收集2013年5月至2015年7月在新疆维吾尔自治区人民医院神经外科经手术切除的垂体腺瘤新鲜标本117例。行免疫组织化学染色观察AGR2在垂体腺瘤细胞中的表达,采用Pearson相关分析AGR2表达与Ki67、MMP-9、VEGF的相关性。结果 AGR2在垂体腺瘤不同分泌类型中的表达阳性率差异无统计学意义(x^2=6.537,P>0.05)。在117例垂体腺瘤组织标本中,AGR2表达阳性60例,AGR2在非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达明显高于在侵袭性垂体腺瘤中的表达[30.8%(36/47)比20.5%(24/70)],差异有统计学意义(P<0.01);AGR2表达与Ki-67、MMP-9、VEGF表达呈负相关(r=-0.252、-0.883、-0.921,均P<0.05)。结论 AGR2在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤组织中含量有明显差异。AGR2表达量与Ki-67、MMP-9、VEGF表达量呈负相关,AGR2不仅可以作为研究垂体腺瘤侵袭性的一个靶标,还可以作为垂体腺瘤诊断、靶向治疗以及预后判断的一个重要的潜在指标。