骨髓间充质干细胞来源外泌体通过ERK1/2信号通路调控子痫前期滋养层细胞侵袭和增殖相关机制研究

目的探究骨髓间充质干细胞(human bone mesenchyma stem cell,BMSCs)来源外泌体通过ERK1/2信号通路调控子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭的机制。方法以大鼠来源的BMSCs为种子细胞,采用超速离心法进行收集BMSCs来源外泌体。将子痫前期滋养层细胞分成3组,即实验组,抑制剂组和对照组,其中实验组滋养层细胞与外泌体共培养,抑制剂组滋养层细胞与外泌体共培养后,加入ERK1/2的抑制剂AZD0364,对照组滋养层细胞与PBS溶液共培养。应用CCK-8试剂盒和Transwell试剂盒检测细胞的增殖和侵袭能力。应用RT-PCR和Western blot检测各组细胞的ERK1/2和核因子NF-κB的相对表达量。结果透射电镜结果显示,BMSCs来源外泌体为直径50~150 nm的双层膜囊泡状结构。外泌体与子痫前期滋养层细胞共培养的过程中,可见MEG-01细胞可以摄取并内化PKH67标记的外泌体。CCK-8试剂盒结果显示,实验组细胞增殖率要明显高于对照组,而抑制剂组细胞的增殖率明显低于实验组(P<0.05)。Transwell试剂盒检测结果显示,实验组细胞的侵袭明显强于对照组(P<0.05),抑制剂组细胞的侵袭明显弱于实验组(P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,实验组ERK1/2和NF-κB的相对表达量明显高于对照组(P<0.05),抑制剂组ERK1/2和NF-κB的相对表达量明显低于实验组(P<0.05)。结论BMSCs来源外泌体可以提高ERK1/2信号通路表达,进而促进子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭。