七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞的抑制作用及可能机制

目的探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞的抑制作用及可能机制。方法用生理盐水将七方胃痛颗粒稀释并配制成浓度为2 g/mL的七方胃痛颗粒混悬溶液,对20只SD大鼠连续灌胃5 d后获取七方胃痛颗粒含药血清。将AGS细胞分为空白对照组、顺铂组、10%含药血清组、20%含药血清组、30%含药血清组,各组细胞给予相应药物干预48 h。采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,采用Western blot检测人表皮生长因子受体(HER)信号通路相关蛋白及其下游磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白的表达水平,采用实时荧光定量PCR检测上述蛋白对应基因的mRNA表达水平。结果与空白对照组相比,20%含药血清组AGS细胞的中晚期凋亡率升高,30%含药血清组AGS细胞的中晚期凋亡率及总凋亡率升高,4个给药组AGS细胞的G_(0)/G_(1)期比例提高,S期比例降低(均P<0.05)。与空白对照组比较,10%含药血清组AGS细胞的HER4蛋白表达水平下降,20%含药血清组AGS细胞的表皮生长因子受体(EGFR)、HER4蛋白表达水平均下降,顺铂组和30%含药血清组AGS细胞的EGFR、HER2、HER3、HER4、AKT、PI3K蛋白表达水平均下降(均P<0.05)。与空白对照组比较,4个给药组AGS细胞的EGFR、HER2、HER3、HER4、PI3K、AKT的mRNA表达水平下降(均P<0.05)。结论七方胃痛颗粒能促使AGS细胞发生中晚期凋亡,使细胞周期阻滞在G_(0)/G_(1)期,其可能通过抑制HER信号通路及下游PI3K/AKT信号通路的激活,起到抑制AGS细胞增殖的作用。

VEGF和β-HCG与输卵管妊娠滋养细胞侵入管壁深度的关联性研究

目的评估输卵管壶腹部妊娠患者滋养细胞浸润输卵管壁深度与血管内皮生长因子（VEGF）及β-人绒毛膜促性腺激素（B—HcG）血清浓度之间的关联性。方法选择输卵管壶腹部妊娠且已行患侧输卵管切除术患者80例。手术当天检测血清YEGF和B～HCG浓度。血清YEGF含量的测定采用EUSA法。留取切除的患侧输卵管及妊娠组织，输卯管肌纤维用Masson染色，滋养细胞用人胎盘催乳素（HPL）免疫组织化学染色。依据术后病理结果中滋养细胞浸入输卵管壁的深度，将80例患者分为I-Ⅲ期。血清B—HCG采用双抗体夹心光化学测定法。结果I期血清VEGF和B—HCG浓度的平均值明显低于Ⅱ期，而Ⅱ期明显低于Ⅲ期（P〈0．05）。I期和Ⅱ期临界值VEGF浓度为308．6ng／L，敏感度100．0％，特异度92．6％，Ⅱ期和Ⅲ期临界值VEGF浓度为431．9ng／L，敏感度79．3％，特异度79．2％；I期和Ⅱ期临界值p—HCG浓度为2509．6IU／L，敏感度91．7％，特异度81．5％，Ⅱ期和Ⅲ期临界值p—HCG浓度为13142．6IU/L，敏感度72．4％，特异度95．8％。结论输卵管妊娠患者血清中的VEGF和B—HCG浓度与滋养细胞浸润输卵管壁深度有关，可作为妊娠滋养细胞浸润输卵管管壁深度组织学分期的评估指标。

青蒿琥酯对人胃腺癌MKN45细胞株增殖抑制和诱导凋亡作用

目的研究青蒿琥酯(ART)对人胃腺癌MKN45细胞株的体外增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法以不同浓度的ART作用于体外培养的人胃腺癌MKN45细胞株,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞生长抑制率;应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;用Western Blotting法检测不同浓度的ART作用于MKN45细胞株时凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬蛋白酶9(caspase-9)和半胱天冬蛋白酶3(caspase-3)等表达情况。结果 MTT实验显示,ART作用48 h后对MKN45细胞增殖有显著抑制作用,抑制作用随着药物浓度的增加而递增(P<0.05),IC50值为13.41μmol.L-1。13.41μmol.L-1ART对MKN45细胞增殖存活有明显的抑制作用,且对细胞抑制作用与药物作用时间和浓度呈正相关(P<0.05)。随着ART浓度的增加,ART对MKN45细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05)。ART使MKN45细胞Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax、caspase-9及caspase-3蛋白表达明显增高,并随药物浓度的增加,其对凋亡相关蛋白表达的调控作用也明显增强。结论 ART能体外抑制人胃腺癌MKN45细胞株的生长并诱导细胞发生凋亡。

TGF-β1对AGS细胞上皮-间充质转化及体外侵袭的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人胃癌细胞株AGS发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及体外侵袭的影响。方法将体外培养的AGS用TGF-β1干预后,倒置显微镜下观察细胞形态学的变化,MTT比色法检测TGF-β1对AGS增殖的影响,细胞划痕试验和Transwell侵袭试验检测细胞运动和侵袭力的改变;免疫荧光和Western blot检测snail、E-cadherin(上皮钙粘蛋白)、和N-cadherin(神经钙粘蛋白)表达的变化。结果TGF-β1诱导AGS向间充质细胞形态转化,低浓度促进细胞增殖,而高浓度时细胞增殖率逐步降低,且snail和间充质细胞表型N-cadherin表达上调,而上皮细胞表型E-cadherin表达下调,同时细胞运动和侵袭能力大大增强。结论TGF-β1可诱导AGS发生EMT,从而增加其侵袭、转移的能力。

鳞状细胞癌抗原、人绒毛膜促性腺激素及肿瘤特异性生长因子在子宫内膜癌中的表达及临床意义分析

目的探讨子宫内膜癌患者鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)及肿瘤特异性生长因子(TSGF)水平,并分析其意义。方法选取子宫内膜癌患者与子宫良性病变患者各148例分别作为子宫内膜癌组与良性病变组,并取148例健康体检者作为对照组,比较3组研究对象SCC-Ag、HCG、TSGF水平,并分析其与子宫内膜癌临床特征及预后的关系。结果子宫内膜癌组患者SCC-Ag、HCG及TSGF水平均高于良性病变组与对照组,良性病变组患者HCG、TSGF水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移、浸润程度为T3-4的子宫内膜癌患者SCC-Ag、HCG、TSGF高表达率分别高于TNM分期为Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润程度为T1-2的患者,肿瘤直径﹥5.0 cm的子宫内膜癌患者SCC-Ag高表达率高于肿瘤直径≤5.0 cm患者,分化程度为中低分化的子宫内膜癌患者TSGF高表达率高于分化程度为高分化的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。SCC-Ag、HCG、TSGF高表达患者总生存率均低于SCC-Ag、HCG、TSGF低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论SCC-Ag、HCG、TSGF在子宫内膜癌患者中表达升高,且与肿瘤直径、TNM分期、分化程度、淋巴结转移以及浸润程度有关,能够对预后评估起到一定指导作用。

IGF-I和hCG对大鼠Leydig细胞葡萄糖转运蛋白基因表达调控研究

背景与目的:研究胰岛素样生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)和人绒毛膜促性腺激素(humanChorionicGonadotropin,hCG)对成年大鼠Leydig细胞中葡萄糖转运蛋白(Glucosetransporters,GLUTs)基因表达的影响,为进一步探讨Leydig细胞中睾酮的合成与葡萄糖代谢关系提供依据。材料与方法:采用改良的Klinefelter方法从成年大鼠睾丸中分离获得Leydig细胞,并用反转录-聚合酶链技术检测IGF-I和hCG对Leydig细胞中GLUTs基因表达的调控作用。结果:分离得到纯度为98%的Leydig细胞,与空白对照组相比,hCG可显著增加Leydig细胞中GLUT8基因mRNA的表达,并且此作用具有剂量依赖性与时效性。100ng/mlIGF-I可显著增加Leydig细胞中GLUT8基因mRNA表达,并且IGF-I可和hCG协同作用,显著提高GLUT8基因mRNA表达,该结果与100ng/mlIGF-I和10ng/mlhCG协同作用显著增加睾酮合成的结果相吻合。然而,在大鼠Leydig细胞中,无论是10ng/mlhCG或100ng/mlIGF-I单独作用或同时作用于细胞,都不影响GLUT1和GLUT3基因mRNA水平。结论:在成年大鼠Leydig细胞中,IGF-I和hCG对细胞中GLUT8基因表达的调节作用具有特异性,IGF-I和hCG能协同作用显著提高细胞GLUT8基因mRNA水平,从而增强细胞摄取葡萄糖的能力,可为细胞提供更多的代谢能源,最终增加了Leydig细胞睾酮合成与分泌。

胰岛素样生长因子-I和人绒毛膜促性腺激素对成年大鼠Leydig细胞葡萄糖转运蛋白基因表达调控

目的:研究胰岛素样生长因子I(IGF I)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)对成年大鼠睾丸Leydig细胞中葡萄糖转运蛋白(GLUT)基因表达的影响,为进一步探讨Leydig细胞中睾酮的合成、分泌与葡萄糖代谢的关系提供依据。方法:采用改良的Klinefelter方法从成年大鼠睾丸中分离获得Leydig细胞;用反转录聚合酶链技术检测IGF I和hCG对原代培养的Leydig细胞中GLUT基因表达的调控作用。结果:分离得到纯度为98%的大鼠Leydig细胞,并与对照组比较,hCG可显著增加Leydig细胞中GLUT8基因mRNA的表达水平(P<0.001),且此作用具有剂量依赖性与时效性。当在试验组细胞中单独加入IGF I或IGF I和hCG作用于细胞后,发现IGF I(100ng mL)可显著增加Leydig细胞中GLUT8基因mRNA的表达(P<0.01),也可与hCG协同作用显著提高GLUT8基因的mRNA表达,该结果与IGF I(100ng mL)和hCG(10ng mL)能协同作用极显著增加睾酮合成水平(P<0.001)的结果是相吻合的。在大鼠Leydig细胞中,无论10ng mL或100ng mL还是两者同时作用于细胞,都不能影响GLUT1和GLUT3基因的mRNA水平。结论:在成年大鼠Leydig细胞中,IGF I和hCG对细胞中的GLUT8基因表达的调节作用具有特异性,其协同作用能显著提高细胞中GLUT8基因mRNA水平,增强细胞摄取葡萄糖的能力,给细胞提供更多的代谢能源,最终增加Leydig细胞睾酮的合成与分泌。

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞增殖的影响

目的 探讨人绒毛膜促性腺激素 (h CG)对人胃腺癌 SGC- 790 1细胞增殖生长的影响。方法 用 MTT法检测细胞生长率及存活率。结果 h CG在 10 - 1 1～ 10 - 6 mol/ L 范围内 ,对胃腺癌细胞的生长具有促进作用 ,但无明显的时间依赖关系。结论 h CG对胃腺癌细胞的生长具有一定的促进作用 ,提示 h