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Roscovitine synergizes with conventional chemo-therapeutic drugs to induce efficient apoptosis of human colorectal cancer cells 被引量:1
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作者 Mohamed Salah I Abaza Abdul-Majeed A Bahman Rajaa J Al-Attiyah 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第33期5162-5175,共14页
AIM: To examine the ability of cyclin-dependent kinase inhibitor (CDKI) roscovitine (Rosco) to enhance the antitumor effects of conventional chemotherapeutic agents acting by different mechanisms against human colorec... AIM: To examine the ability of cyclin-dependent kinase inhibitor (CDKI) roscovitine (Rosco) to enhance the antitumor effects of conventional chemotherapeutic agents acting by different mechanisms against human colorectal cancer. METHODS: Human colorectal cancer cells were treat-ed, individually and in combination, with Rosco, taxol, 5-Fluorouracil (5-FU), doxorubicine or vinblastine. The antiproliferative effects and the type of interaction of Rosco with tested chemotherapeutic drugs were de-termined. Cell cycle alterations were investigated by fluorescence-activated cell sorter FACS analysis. Apop-tosis was determined by DNA fragmentation assay. RESULTS: Rosco inhibited the proliferation of tumor cells in a time-and dose-dependent manner. The ef-ficacies of all tested chemotherapeutic drugs were markedly enhanced 3.0-8.42 × 103 and 130-5.28 × 103 fold in combination with 5 and 10 μg/mL Rosco, re-spectively. The combination of Rosco and chemothera-peutic drugs inhibited the growth of human colorectal cancer cells in an additive or synergistic fashion, and in a time and dose dependent manner. Rosco induced apoptosis and synergized with tested chemothera-peutic drugs to induce efficient apoptosis in human colorectal cancer cells. Sequential, inverted sequential and simultaneous treatment of cancer cells with combi-nations of chemotherapeutic drugs and Rosco arrested the growth of human colorectal cancer cells at various phases of the cell cycle as follows: Taxol/Rosco (G2/M-and S-phases), 5-FU/Rosco (S-phase), Dox/Rosco (S-phase) and Vinb/Rosco (G2/M-and S-phases). CONCLUSION: Since the eff icacy of many anticancer drugs depends on their ability to induce apoptotic cell death, modulation of this parameter by cell cycle inhibi-tors may provide a novel chemo-preventive and chemo-therapeutic strategy for human colorectal cancer. 展开更多
关键词 直肠癌 化学敏感作用 细胞凋亡 细胞周期 协同作用
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Pro-apoptotic Effects of OSNQ on Human Colon Cancer SW480 Cells
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作者 Yu ZHANG Jiaru WANG +11 位作者 Yuchao FENG Yi ZHANG Wanting XU Tong ZHANG Shinong WANG Hui XUE Cheng LU Wenzhong WANG Meng NI Hongxing WANG Yinghua LUO Chenghao JIN 《Medicinal Plant》 CAS 2018年第6期46-50,共5页
[Objectives] The aim was to elucidate the pro-apoptosis mechanism of naphthoquinone derivative 2-octyl sulfoxide-1,4-naphthoquinone(OSNQ) on human colon cancer SW480 cells.[Methods]The cytotoxic effect of OSNQ on colo... [Objectives] The aim was to elucidate the pro-apoptosis mechanism of naphthoquinone derivative 2-octyl sulfoxide-1,4-naphthoquinone(OSNQ) on human colon cancer SW480 cells.[Methods]The cytotoxic effect of OSNQ on colon cancer SW480 cells was detected by MTT colorimetry.The pro-apoptotic effect of OSNQ on human colon cancer SW480 cells was detected by Annexin V-FITC/PI double staining.The changes in expression of apoptosis-related proteins were detected by Western blot.[Results]The results of MTT assay showed that OSNQ had a significant cytotoxic effect on colon cancer SW480 cells.The results of Western blot showed that OSNQ induced the apoptosis in colon cancer SW480 cells through promoting the expression of pro-apoptotic caspase-3 and inhibiting the expression of apoptosis-inhibiting protein Bcl-2.[Conclusions] OSNQ has a significant cytotoxic effect on colon cancer SW480 cells,and it induces the apoptosis of colon cancer SW480 cells by AKT signaling pathway. 展开更多
关键词 OSNQ human COLON cancer sw480 cells Apoptosis AKT SIGNALING PATHWAY
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Anti-proliferation effect of zoledronic acid on human colon cancer line SW480
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作者 Fu-Shi Han Mou-Bin Lin +3 位作者 Hui-Yuan Zhu Ying-Qun Chen Wei Shui Jin-Ming Xu 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2016年第2期164-168,共5页
Objective: To investigate the anti-proliferation effect and mechanism of zoledronic acid(ZOL) on human colon cancer line SW480. Methods: SW480 cells were treated with 0, 12.5, 25, 50, 100 and 200 μmo L/L of ZOL for 4... Objective: To investigate the anti-proliferation effect and mechanism of zoledronic acid(ZOL) on human colon cancer line SW480. Methods: SW480 cells were treated with 0, 12.5, 25, 50, 100 and 200 μmo L/L of ZOL for 48 h, and CCK-8 assay was employed to obtain the survival rate of SW480 cells. SW480 cells were treated with 25 μmo L/L of ZOL for 0, 12, 24, 48 and 72 h, and then the survival rate was obtained. SW480 cells of the ZOL group were treated with 25 μmo L/L of ZOL for 48 h, while cells of the Cs A+ZOL group were pretreated with 10 μmo L/L of Cs A for 0.5 h and then treated with 25 μmo L/L of ZOL for 48 h. Then the survival rates of SW480 cells of the control group, ZOL group and Cs A+ZOL group were determined. Flow cytometry was employed to detect the apoptosis rate and the mitochondrial transmembrane potential(△ψm) of the three groups and Western blot was used to detect the expressions of cyt C in the cytosol of the three groups. Results: ZOL inhibited the proliferation of SW480 cells, and the inhibition rate positively correlated with the concentration of ZOL and the action time(P< 0.01). The cell survival rate and the △ψm of the ZOL group were greatly lower than those of the control group, while the apoptosis rate and the expression of cyt C in the cytosol were obviously higher than those of the control group. All the differences showed distinctly statistical significances(P< 0.01). The cell survival rate and the △ψm of the Cs A+ZOL group were all lower than those of the control group, but substantially higher than those of the ZOL group; while the apoptosis rate and the expression of cyt C in the cytosol were higher than those of the control group, but distinctly lower than those of the ZOL group. All the differences were statistically significant(P < 0.01). Conclusions: ZOL can induce the apoptosis in human colon cancer line SW480 and then inhibit the proliferation of SW480 cells directly by opening the mitochondrial permeability transition pore abnormally, decreasing △ψm, and releasing the cyt C into the cytosol. And the effect enhances with the increases of the concentration of ZOL and the action time. 展开更多
关键词 Zoledronic acid colorectal cancer human COLON cancer line sw480 Apoptosis MITOCHONDRIA
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Growth Inhibition Effect of DL-Lysine Acetylalicylate on sw480 Colon Carcinoma Cells
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作者 王澍 田晓峰 王立明 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2007年第1期18-21,共4页
Objective: To investigate the effect of DL-lysine acetylsalicylate on proliferation of colon carcinoma cells line sw480. Methods: After treatment of DL-lysine acetylsalicylate, the study was performed by observing s... Objective: To investigate the effect of DL-lysine acetylsalicylate on proliferation of colon carcinoma cells line sw480. Methods: After treatment of DL-lysine acetylsalicylate, the study was performed by observing sw480 colorectal cancer cells with phase contrast microscope, making growth curve, and examining the inhibition rate of sw480 cells with MTT assay. Results: The morphology of sw480 cells showed characteristics of apoptosis, the cell growth curve showed inhibited proliferation of sw480 cells when treated with DL-lysine acetylsalicylate (P〈0.05). The rate of inhibition was upward when the drug concentration increased. Conclusion: DL-lysine acetylsalicylate for injection can inhibit the growth of sw480 colorectal cancer cells obviously in a dose dependent manner. 展开更多
关键词 DL-lysine acetylsalicylate MTT sw480 colorectal cancer cells
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Chinese Herb Formulae Inhibit the Proliferation of Human Colon Cancer SW480 Cells by Inducing Cell Apoptosis
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作者 Su Fu Shao-Lin Qin Wolf-Dieter Rausch 《World Journal of Traditional Chinese Medicine》 CAS CSCD 2023年第3期348-354,共7页
Objective:This study aimed to reveal the antitumor effects of Chinese herbal formulae and the underlying mechanisms in treating colorectal cancer,with a focus on developing traditional Chinese medicine(TCM)as a supple... Objective:This study aimed to reveal the antitumor effects of Chinese herbal formulae and the underlying mechanisms in treating colorectal cancer,with a focus on developing traditional Chinese medicine(TCM)as a supplement and alternative therapeutic method for cancers.Materials and Methods:Human colon cancer SW480 cells were treated with three Chinese herbal formulae,Bu Zhong Yi Qi Decoction,Fuzi Lizhong Decoction,and Pulsatilla Decoction at different concentrations(50–600μg/mL)for 24,36,and 48 h,respectively.Cell viability was determined using the resazurin reduction assay,and cell survival rate was evaluated using a colony formation assay.After treatment with different concentrations(50–600μg/mL)of these three formulae for 48 h,the effects of the Chinese herbal formulae on cell apoptosis were investigated using Hoechst/propidium iodide(PI)staining.The positive PI-stained cells were investigated using an EnSpire multilabel plate reader and the positive Hoechst-stained cells were observed under a fluorescence microscope for morphological changes.Results:Bu Zhong Yi Qi Decoction,Fuzi Lizhong Decoction,and Pulsatilla Decoction inhibited SW480 cell proliferation in a dose-and time-dependent manner and induced cell apoptosis.Conclusion:Chinese herbal formulae with a special prescription form of TCM with antitumor effects bring a new perspective in line with the principles of TCM in cancer treatment. 展开更多
关键词 Apoptosis cell proliferation Chinese herbal formulae colorectal cancer sw480 cells
原文传递
SOX7靶向ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠癌血管生成
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作者 武雪亮 王立坤 +3 位作者 马洪庆 路永刚 李少东 惠志龙 《解剖学研究》 CAS 2024年第3期208-215,共8页
目的探讨性别决定区Y框蛋白7(SOX7)对结直肠癌血管生成的影响及潜在作用机制。方法应用免疫荧光检测结直肠癌患者组织样本中SOX7表达水平,之后通过裸鼠、转染SOX7 mimic的人结直肠癌细胞系SW480细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养进... 目的探讨性别决定区Y框蛋白7(SOX7)对结直肠癌血管生成的影响及潜在作用机制。方法应用免疫荧光检测结直肠癌患者组织样本中SOX7表达水平,之后通过裸鼠、转染SOX7 mimic的人结直肠癌细胞系SW480细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养进一步研究。用Western-blot验证SOX7与ERK1/2/PD-L1对结直肠癌细胞的相关蛋白表达的影响。用CCK8检测SOX7与ERK1/2/PD-L1对HUVEC增殖的影响。通过体外内皮细胞成管实验测定SOX7与ERK1/2/PD-L1对肿瘤血管生成的影响。结果SOX7在人结直肠癌组织中表达被抑制(P<0.01),同时SOX7的过表达抑制了小鼠体内肿瘤生长(P<0.01)。SW480细胞中SOX7的过表达抑制了ERK1/2、c-Jun的表达,并在ERK1/2的激动剂Senkyunolide I的作用下上调了SW480细胞的ERK1/2、c-Jun蛋白表达(P<0.01),逆转了SOX7对SW480细胞中ERK1/2、c-Jun蛋白表达的影响(P<0.01)。HUVEC中SOX7抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,Senkyunolide I上调了HUVEC的PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,并逆转了SOX7对HUVEC中上述相关蛋白表达的影响(P<0.01)。PD-1/PD-L1 Inhibitor 3抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,SOX7过表达在PD-1/PD-L1 Inhibitor 3的影响下并没有表现出抑制作用。CCK8实验结果显示SOX7过表达显著抑制了HUVEC的增殖能力,Senkyunolide I作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显上升,PD-1/PD-L1 Inhibitor 3作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显下降,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。成管实验结果显示SOX7过表达抑制了HUVEC的血管生成,Senkyunolide I强烈加速了血管生成,而PD-1/PD-L1 Inhibitor 3血管生成则被显著抑制,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。结论SOX7通过ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠肿瘤的增殖和血管生成,SOX7可能是晚期CRC患者临床治疗中潜在的抗血管生成靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 性别决定区Y框蛋白7(SOX7) 细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2) 细胞程序性死亡-配体1(PD-L1) 增殖 血管生成 人结直肠癌细胞系sw480细胞
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奥沙利铂对人结肠癌细胞LoVo和SW480/M5作用的实验研究 被引量:2
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作者 吕会增 魏波 +4 位作者 陈图峰 苏雁甜 叶小勇 陈新岐 卫洪波 《消化肿瘤杂志(电子版)》 2012年第1期34-39,共6页
目的探讨体外实验奥沙利铂对人结肠癌LoVo和SW480/M5细胞的抑制作用及其可能机制。方法 MTT法检测不同剂量奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪检测1/2GI_(50)和GI_(50)浓度奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞周期和早... 目的探讨体外实验奥沙利铂对人结肠癌LoVo和SW480/M5细胞的抑制作用及其可能机制。方法 MTT法检测不同剂量奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪检测1/2GI_(50)和GI_(50)浓度奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞周期和早期凋亡的影响。原子光谱吸收仪检测GI_(50)浓度奥沙利铂作用4、8、24h后LoVo和SW480/M5细胞DNA含铂量。结果奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞增殖的抑制作用呈量效依赖;其GI_(50)浓度:LoVo细胞为6.5mg/L,SW480/M5细胞为58.0mg/L。自然对数增殖周期,LoVo细胞中G_1期细胞比例高于、G_2期细胞比例低于SW480/M5细胞(P<0.05)。奥沙利铂浓度GI_(50)时,降低肿瘤细胞G_1期比例,升高LoVo细胞S期比例较SW480/M5细胞明显,升高SW480/M5细胞而降低LoVo细胞G_2/M期比例。1/2GI_(50)、GI_(50)奥沙利铂均可诱导两种肿瘤细胞发生早期凋亡,但1/2GI_(50)L-OHP促凋亡作用两种肿瘤细胞间无统计学差异,GI_(50)L-OHP对LoVo细胞的促凋亡作用高于SW480/M5细胞。GI_(50)L-OHP奥沙利铂使两种肿瘤细胞DNA含铂量显著升高,并呈时效依赖。LoVo细胞DNA交联铂原子能力高于SW480/M5细胞。结论奥沙利铂主要通过阻滞细胞于S期或(和)G_2/M期并诱导细胞凋亡而抑制两种肿瘤细胞增殖。LoVo细胞对奥沙利铂敏感性明显高于SW480/M5细胞。 展开更多
关键词 奥沙利铂 人结肠癌细胞LoVo 细胞亚系sw480/M5 药物敏感性
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白藜芦醇对人结肠癌SW480瘤株作用的研究 被引量:11
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作者 刘敏 孟勇 +1 位作者 马清涌 刘衍晟 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第5期524-526,共3页
目的研究白藜芦醇对人结肠癌细胞株SW480生长和细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法采用光镜及电子显微镜观察用药前后细胞形态结构的改变;采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,采用流式细胞术测定细胞周期。结果白藜芦醇呈时间和剂... 目的研究白藜芦醇对人结肠癌细胞株SW480生长和细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法采用光镜及电子显微镜观察用药前后细胞形态结构的改变;采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,采用流式细胞术测定细胞周期。结果白藜芦醇呈时间和剂量依赖性抑制人结肠癌细胞株SW480的生长并诱导凋亡,IC50为80μmol/L;白藜芦醇使SW480处于S期细胞增多。结论白藜芦醇能有效的抑制人结肠癌细胞株SW480的生长并诱导其凋亡;白藜芦醇对结肠癌可能是一种有效的化学治疗和化学预防药物。 展开更多
关键词 白藜芦醇 结肠癌 凋亡 细胞周期 sw480细胞
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DLC-1基因表达对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响 被引量:2
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作者 商延芳 金月玲 +2 位作者 徐佳佳 李楠 黄培林 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第1期19-21,26,共4页
目的:研究DLC-1基因对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将DLC-1 shRNA(短发夹状RNA,short hairpin RNA)序列克隆到质粒pGCsi-U6/Neo载体,采用脂质体介导的转染方法将构建的DLC-1 shRNA表达质粒转入结肠癌细胞系LoVo细胞。采用RT-PC... 目的:研究DLC-1基因对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将DLC-1 shRNA(短发夹状RNA,short hairpin RNA)序列克隆到质粒pGCsi-U6/Neo载体,采用脂质体介导的转染方法将构建的DLC-1 shRNA表达质粒转入结肠癌细胞系LoVo细胞。采用RT-PCR技术和Western Blot技术分别检测LoVo细胞中DLC-1mRNA和蛋白表达水平的变化。Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验观察LoVo细胞侵袭迁移能力的改变。结果:结肠癌细胞系LoVo细胞表达DLC-1分子。所构建质粒表达载体能有效地干扰LoVo细胞DLC-1 mRNA和蛋白质表达水平;Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验结果显示,转染后LoVo细胞侵袭转移能力明显增强(p<0.05)。结论:结肠癌细胞系LoVo细胞表达DLC-1基因,应用RNAi技术可特异性降低其表达。DLC-1的表达水平与结肠癌细胞侵袭转移相关。 展开更多
关键词 结肠癌细胞株 RNAI LOVO细胞 DLC-1
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青藤碱对BALB/c-nu/nu裸小鼠高侵袭性人结肠癌SW 480移植瘤增殖及环氧合酶-2表达的影响 被引量:4
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作者 朱红玲 王秋荣 何华琼 《中国中医急症》 2017年第4期591-593,603,共4页
目的观察青藤碱对高侵袭性人结肠癌细胞株SW 480移植瘤细胞周期及结肠瘤体组织中环氧合酶-2(COX-2)表达的影响,研究青藤碱防治结肠癌的机制。方法先用5只免疫功能正常的BALB/c-nu/nu裸小鼠建立高侵袭性人结肠癌瘤源,3周后取直径约2 mm... 目的观察青藤碱对高侵袭性人结肠癌细胞株SW 480移植瘤细胞周期及结肠瘤体组织中环氧合酶-2(COX-2)表达的影响,研究青藤碱防治结肠癌的机制。方法先用5只免疫功能正常的BALB/c-nu/nu裸小鼠建立高侵袭性人结肠癌瘤源,3周后取直径约2 mm的瘤块移植于20只免疫缺陷的BALB/c-nu/nu2裸小鼠回盲浆膜凹龛部,1周后再随机分为结肠癌组和青藤碱组。青藤碱组按10 m L/(kg·d)灌10%青藤碱治疗30 d,结肠癌组灌0.9%氯化钠注射液对照。测量BALB/c-nu/nu裸小鼠结肠瘤体积、瘤质量并计算肿瘤抑制率;流式细胞仪检测结肠瘤体组织SW 480细胞在G1、G2、M和S期的细胞周期比例;免疫组化法检测结肠瘤体组织COX-2的表达,RT-PCR法检测COX-2 m RNA表达。结果与结肠癌组比较,青藤碱组结肠瘤体积、瘤质量及S期细胞比值明显降低、G1、G2期细胞比值提高,肿瘤抑制率为(39.75%)(P<0.05);COX-2和COX-2 m RNA低表达(P<0.05)。结论青藤碱可能在G1、G2和S期诱导SW 480细胞阻滞、抑制结肠癌细胞株SW 480细胞的有丝分裂,并通过下调COX-2表达而间接影响癌细胞的增殖,具有抗高侵袭性人结肠癌的作用。 展开更多
关键词 青藤碱 高侵袭性人结肠癌 环氧合酶-2 结肠癌细胞株SW 480 细胞增殖周期
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白头翁皂苷体外抗肿瘤试验研究 被引量:8
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作者 姜成 申晓慧 +5 位作者 李春丰 赵永勋 吴恒梅 庄树文 江清林 王长平 《黑龙江农业科学》 2012年第10期125-127,共3页
为研究白头翁皂苷体外抗肿瘤活性,从白头翁中提取有效成分皂苷,对大肠癌HT29细胞和人胃癌细胞株BGC823进行体外培养,用MTT法测定白头翁皂苷对2种肿瘤细胞增殖反应的影响。结果表明:白头翁皂苷对两种肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用,并表... 为研究白头翁皂苷体外抗肿瘤活性,从白头翁中提取有效成分皂苷,对大肠癌HT29细胞和人胃癌细胞株BGC823进行体外培养,用MTT法测定白头翁皂苷对2种肿瘤细胞增殖反应的影响。结果表明:白头翁皂苷对两种肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用,并表现一定的剂量关系,白头翁皂苷浓度为6μg.mL-1时,对人胃癌细胞株BGC823细胞生长的抑制率达到了80.71%,效果较好。因此,白头翁皂苷作为抗肿瘤药物有效成分的开发和利用有待于进一步深入研究。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 大肠癌HT29 人胃癌细胞株BGC823 抗肿瘤
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靶向hTERT的RNAi载体的构建及其对大肠癌SW-480细胞增殖的影响
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作者 孙彦 孟永亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期423-427,共5页
目的:构建靶向人大肠癌细胞端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的RNAi载体,探讨其对人大肠癌SW480细胞增殖的影响。方法:设计3条靶向hTERT的shRNA序列和阴性对照序列,分别克隆入pGPU6/GFP/Neo载体,构建R... 目的:构建靶向人大肠癌细胞端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的RNAi载体,探讨其对人大肠癌SW480细胞增殖的影响。方法:设计3条靶向hTERT的shRNA序列和阴性对照序列,分别克隆入pGPU6/GFP/Neo载体,构建RNAi载体pGPU6-hTERT-1、2、3和阴性对照载体pGPU6-hTERT-NC,转染SW480细胞。RT-PCR检测各组载体对hTERT mRNA表达的影响,MTT法检测下调hTERT mRNA表达对SW480细胞增殖的影响。结果:成功构建3个携带hTERT mRNA序列的重组载体,3种RNAi载体均能明显抑制SW480细胞hTERT mRNA的表达,pGPU6-hTERT-3组SW480细胞hTERT mRNA表达水平较空白对照组下调最为显著(0.347±0.028 vs 0.513±0.032,P<0.01)。转染3种RNAi载体均能明显抑制SW480细胞增殖,pGPU6-hTERT-3组细胞增殖抑制率较空白对照组、脂质体对照组和pGPU6-hTERT-NC组升高最为显著[(50.08±0.43)%vs(4.11±0.39)%、(3.88±0.35)%、(3.38±0.35)%,P<0.05]。结论:转染RNAi载体pGPU6-hTERT-3能够抑制SW480细胞的增殖,其机制可能与降低hTERT基因的表达从而抑制端粒酶活性有关。 展开更多
关键词 大肠癌 RNA干扰 人端粒酶逆转录酶 SW-480细胞 增殖
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Runt相关转录因子3在人结肠癌HCT-116/5-FU耐药细胞株中的表达及其与耐药的相关性 被引量:2
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作者 范爽 武雪亮 +4 位作者 薛军 徐丹丹 韩艳君 李源睿 屈明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期706-715,共10页
目的建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116... 目的建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116及耐药株HCT-116/5-FU的半数抑制浓度(IC_(50)值),绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间(TD);qRT-PCR和Western blot法检测亲本株HCT-116细胞及耐药株HCT-116/5-FU细胞中RUNX3、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)的mRNA和蛋白表达。采用siRNA技术敲低HCT-116细胞中RUNX3的表达,分为RUNX3敲低组(si-RUNX3-1组、si-RUNX3-2组)和阴性对照组(si-NC组),qRT-PCR和Western blot法分别在mRNA水平和蛋白水平验证RUNX3的敲低效率;CCK-8法测定si-RUNX3组和si-NC组的IC_(50)值,Western blot法测定两组中P-gp、MRP1和LRP的表达情况。结果成功构建稳定的人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,耐药倍数为7.7倍;HCT-116/5-FU耐药细胞株群体TD较HCT-116亲本株明显延长(P<0.001),耐药细胞群体TD是亲本细胞的1.38倍(P=0.002),耐药株细胞形态发生变化。耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3 mRNA表达水平较亲本细胞株HCT-116明显降低(P=0.048),P-gp(P=0.008)、MRP1(P=0.001)和LRP mRNA(P=0.001)表达水平较亲本细胞株HCT-116明显升高;耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3蛋白质相对表达量较亲本细胞株HCT-116明显降低(P<0.001),P-gp、MRP1、LRP蛋白的相对表达量较亲本细胞株明显升高(P均<0.001)。成功构建了RUNX3低表达的HCT-116细胞模型,si-RUNX3-1组RUNX3 mRNA的表达与si-NC组相比差异无统计学意义(P=0.064),si-RUNX3-2组明显低于si-NC组(P=0.034);si-RUNX3-1组和si-RUNX3-2组RUNX3蛋白的表达量均明显低于si-NC组(P均<0.001),si-RUNX3-2组的敲低效率更高。选用si-RUNX3-2组完成后续实验,si-RUNX3组的IC_(50)值较si-NC组明显升高,下调RUNX3的表达能明显降低HCT-116细胞对5-FU的敏感性(P<0.001);si-RUNX3组的P-gp、MRP1和LRP蛋白相对表达量均明显高于si-NC组(P均<0.001)。结论RUNX3表达下调能降低人结肠癌HCT-116细胞对5-FU的敏感性,可能与RUNX3表达的降低上调P-gp、MRP1和LRP等耐药蛋白表达,从而增加细胞的耐药性有关。 展开更多
关键词 RUNT相关转录因子3 耐药细胞株 siRNA 人结直肠癌 HCT-116 5-氟尿嘧啶
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GPP34激活结肠癌细胞Wnt信号通路促进癌细胞增殖的研究 被引量:1
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作者 汪明振 邱成志 +2 位作者 余外市 王春晓 郭延塔 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期15-20,共6页
目的探讨人结肠癌细胞中高尔基相关蛋白34(GPP34)基因高表达,激活经典Wnt信号通路,促进癌细胞增殖的机制。方法将SW620结肠癌细胞株分为4组:对照组、siRNA转染组、Tricinbine组及TWS119组,分别培养;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结肠... 目的探讨人结肠癌细胞中高尔基相关蛋白34(GPP34)基因高表达,激活经典Wnt信号通路,促进癌细胞增殖的机制。方法将SW620结肠癌细胞株分为4组:对照组、siRNA转染组、Tricinbine组及TWS119组,分别培养;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结肠癌细胞转染后的沉默效果;分别用Topflash报告基因活性法、噻唑蓝(MTT)、流式细胞技术检测各组癌细胞Wnt信号通路活性、生长抑制率、细胞凋亡率;Western blot检测各组结肠癌细胞中GPP34、β-catenin、p S9-糖原合酶激酶-3β(p S9-GSK-3β)蛋白的表达。结果转染siRNA后,沉默结肠癌细胞GPP34表达效果佳;与对照组比较,各实验组癌细胞的生长抑制率和凋亡率升高,且Wnt信号通路活性抑制。Western blot检测结果显示,siRNA-GPP34组GPP34蛋白表达下降,其余两组GPP34蛋白表达比较,差异无统计学意义;siRNA转染组、Tricinbine组和TWS119组的β-catenin和p S9-GSK3β蛋白表达降低。结论 SW620结肠癌细胞中GPP34基因的高表达可通过激活经典Wnt细胞信号通路,促进癌细胞增殖并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 人结肠癌细胞 高尔基相关蛋白34 WNT信号通路 增殖 糖原合酶激酶-3Β Β-CATENIN
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EGCG对人结肠癌细胞株HCT116、SW116增殖、凋亡及JAK/STAT3信号通路的影响 被引量:1
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作者 巩露 毛响 王营 《徐州医学院学报》 CAS 2013年第5期338-342,共5页
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCC)对人结肠癌细胞株HCT116、SW116增殖、凋亡及JAK/信号转导子与转录激活子3(STA33)信号通路的影响。方法体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG对其进行干预。分别采用MTT法检测细胞增... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCC)对人结肠癌细胞株HCT116、SW116增殖、凋亡及JAK/信号转导子与转录激活子3(STA33)信号通路的影响。方法体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG对其进行干预。分别采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测磷酸化STAT3(P—STA33)蛋白表达,RT—PCR法检测Bcl-2、Cyclin D1、C—myc mRNA的表达。结果EGCG抑制结肠癌细胞株增殖,促进其凋亡,降低p-STA33蛋白的表达水平,作用呈浓度依赖性;EGCG可以抑制结肠癌细胞株中Bcl-2、Cyclin D1、C-myc mRNA表达水平。结论EGCG抑制结肠癌细胞株增殖、促进其凋亡的机制可能与抑制JAK/STA33信号通路有关。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 人结肠癌细胞株 表没食子儿茶素没食子酸酯 JAK STAT3信号通路 细胞增殖 凋亡
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皂角刺含药血清诱导直肠癌细胞SW-480凋亡及其对Bcl-2/Bax mRNA表达的影响 被引量:11
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作者 何峰 何光志 +5 位作者 张利新 王琴 李志 王开平 邓文玲 符中柱 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第19期217-221,共5页
目的:采用血清药理学方法探讨皂角刺含药血清诱导肠癌细胞凋亡的作用机制。方法:制备皂角刺药液,50只健康SD大鼠分为皂角刺高中低剂量组(每1 mL分别含有生药2 000,1 000,500 mg),环磷酰胺阳性对照组(50 mg·kg-1)和生理盐水空白对照... 目的:采用血清药理学方法探讨皂角刺含药血清诱导肠癌细胞凋亡的作用机制。方法:制备皂角刺药液,50只健康SD大鼠分为皂角刺高中低剂量组(每1 mL分别含有生药2 000,1 000,500 mg),环磷酰胺阳性对照组(50 mg·kg-1)和生理盐水空白对照组5个组,按20 mL·kg-1大鼠体质量给药,以制备含药血清。取含药血清培养液在体外作用于SW-480细胞(密度为1×106/mL),分别在24,48,72 h后,采用MTT法检测含药血清对SW-480增殖的影响;加入药物血清培养液处理细胞24 h后,采用流式细胞仪检测SW-480凋亡率,RT-PCR检测各组含药血清对细胞B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)/Bel-2相关x蛋白(Bax)基因表达的影响。结果:与空白对照组比较,皂角刺含药血清培养液作用细胞的吸光度(A)在20,40,60 h均明显低于空白组(0.370±0.005)%,(0.624±008)%,(1.078±0.038)%(P<0.01);皂角刺高、中、低剂量含药血清培养液诱导SW-480凋亡依次为(37.386±0.163)%,(35.834±0.092 3)%,(27.572±1.193)%显著高于空白对照(5.036±0.378)%(P<0.01);皂角刺含药血清培养液对SW-480细胞的Bcl-2表达(0.258±0.037,0.442±0.024和0.652±0.072)明显低于空白对照组(0.936±0.047)(P<0.01),随灌胃给药的药物剂量增加Bcl-2表达而增加,而Bax表达(1.946±0.017,1.810±0.023和1.810±0.023)明显高于空白对照组(1.260±0.029)(P<0.01),Bax表达反而减少。结论:皂角刺含药血清对能抑制SW-480生长和诱导其凋亡,Bcl-2 mRNA基因表达减少与Bax mRNA基因表达增多可能是皂角刺诱导肠癌细胞凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 皂角刺含药血清 SW-480 抑瘤作用 凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病2基因/Bel-2相关x蛋白基因
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c-Myc和VEGF基因的小分子干扰RNA对人结直肠癌细胞的影响 被引量:3
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作者 邰建东 王广义 +2 位作者 刘铜军 王磊 李峰 《中华胃肠外科杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期502-506,共5页
目的研究靶向c-Myc和血管内皮生长因子(VEGF)基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒对人结直肠癌细胞株的影响。方法设计靶向c-Myc和VEGF的特异性siRNA。应用体内载体表达法合成其表达质粒.转染人结直肠癌细胞株Volo后.以Westernblo... 目的研究靶向c-Myc和血管内皮生长因子(VEGF)基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒对人结直肠癌细胞株的影响。方法设计靶向c-Myc和VEGF的特异性siRNA。应用体内载体表达法合成其表达质粒.转染人结直肠癌细胞株Volo后.以Westernblot检测c-Myc和VEGF的蛋白表达;以MTT、流式细胞术、TUNEL染色分析、基质胶侵袭实验检测细胞增殖活性、凋亡特性、细胞周期分布及侵袭能力的改变。结果酶切及DNA测序证实c—Myc和VEGF的siRNA表达质粒均构建成功。转染细胞后,与对照组相比较。重组质粒组细胞c-Myc和VEGF的蛋白表达水平显著下调明显(均P〈0.01)。重组质粒c—Myc组、VEGF组和c—Myc加VEGF组细胞增殖抑制率分别为(59.20±5.05)%、(32.31±3.48)%和(75.81±7.89)%:细胞凋亡率分别为(40.50±4.37)%、(21.30±2.98)%和(62.59±9.66)%,均显著高于对照组[细胞增殖抑制率(6.80±1.45)%;细胞凋亡率(2.90±0.36)%;均P〈0.05]。重组质粒VEGF组和c—Myc加VEGF组的细胞侵袭率分别为(7.34±3.65)%和(2.80±1.02)%,明显低于对照组的(18.57±7.46)%(P〈0.05)。其中,重组质粒c-Myc加VEGF组细胞增殖、调亡及侵袭性的改变最为显著,明显高于另外两个重组质粒组(均P〈0.05)。结论特异性siRNA有效抑制了人结直肠癌Volo细胞c—Myc和VEGF的表达.从而抑制了肿瘤细胞的增殖活性和侵袭性.并诱导细胞凋亡.两者具有协同作用。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 基因 C-MYC 血管内皮生长因子 小分子干扰RNA 人结直 肠细胞株
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5-氟脲嘧啶与γ-干扰素作用于Lovo细胞的实验观察
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作者 刘宗荣 马淙 +2 位作者 马文松 邵明 苏卓娃 《热带医学杂志》 CAS 2010年第7期812-814,共3页
目的观察5-氟脲嘧啶与γ-干扰素联合应用对人结肠癌Lovo细胞株的影响。方法采用Lovo结肠癌细胞体外培养,流式细胞仪检测细胞生长、增殖和凋亡的变化。结果 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用后,细胞增殖率下降指数为0.82~1.99,而细胞凋亡... 目的观察5-氟脲嘧啶与γ-干扰素联合应用对人结肠癌Lovo细胞株的影响。方法采用Lovo结肠癌细胞体外培养,流式细胞仪检测细胞生长、增殖和凋亡的变化。结果 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用后,细胞增殖率下降指数为0.82~1.99,而细胞凋亡率增加指数为2.48~4.89。结论 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用可降低肿瘤细胞的增殖和提高肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 人结肠癌Lovo细胞株 5-氟脲嘧啶 Γ-干扰素
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