特发性血小板减少性紫癜患儿骨髓巨细胞病毒抗原的检测及临床价值

目的探讨骨髓中人巨细胞病毒(HCMV)感染在小儿特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的作用及机制。方法采用二步法免疫组化检测81例ITP患儿骨髓中HCMV早期抗原,并行外周血血小板计数及ELISA法检测血HCMV-IgM。结果ITP患儿骨髓HCMV阳性率(61.73%)明显高于血HCMV-IgM阳性率(20.99%),P<0.01;慢性ITP骨髓HCMV阳性率(92.31%)高于急性ITP(55.88%),P<0.05;慢性ITP血HCMV-IgM、IgG阳性率与急性ITP相比,差异无统计学意义(P>0.05)。骨髓HCMV阳性组的平均年龄、治疗前血小板数、治疗后血小板上升值与阴性组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),骨髓巨核细胞数及产板型巨核细胞数与阴性组相比,差异无统计学意义(P>0.05);血HCMV-IgM阳性组的平均年龄、治疗前血小板数、治疗后血小板上升值与阴性组相比,差异无统计学意义(P>0.05);血HCMV-IgG阳性组的上述三项指标与阴性组相比,差异亦无统计学意义(P>0.05)。骨髓HCMV阳性细胞数量分级与治疗前血小板计数之间无相关关系(P>0.05)。结论HCMV感染在ITP中广泛存在,骨髓HCMV抗原的检测是评价ITP患儿HCMV感染的敏感、特异的指标;骨髓HCMV感染的ITP患儿存在病情加重、疗效不佳及慢性化的趋势;在骨髓HCMV致ITP的机制中,可能主要是影响外周免疫系统从而破坏成熟的血小板,而不是对血细胞生成的抑制。

定量PCR监测骨髓移植患者人巨细胞病毒感染

目的用定量PCR方法监测骨髓移植患者中人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus,HCMV)活动性感染。 方法用双标记探针水解的荧光定量PCR方法 ,检测 4例骨髓移植患者移植前、后随访的血标本 14 0份 (其中血浆与外周血多形核细胞各 5 0 % )中HCMVDNA拷贝数 ,并作动态分析。血浆标本中HCMVDVA的检出与HCMVIgG和IgM作平行比较。 结果 4例患者除病例 4外 ,均在术后 30～ 5 0d间HCMVDNA拷贝数增加 ,同一时间外周血多形核细胞中HCMVDNA的拷贝数高于血浆。当给予适量更昔洛韦 ,则能抑制其继续升高。 4例患者血清中HCMVIgM始终呈阴性 ,IgG始终呈阳性。 结论荧光定量PCR方法是用以监测骨髓移植患者中HCMV活动情况。

套式PCR检测骨髓移植人巨细胞病毒感染的研究

骨髓移植受体由于免疫抑制或免疫缺陷诱发人巨细胞病毒感染常常造成移植失败。应用套式ＰＣＲ对骨髓移植３３例受体和９８例供体检测发现，受体人巨细胞病毒的感染率（７５．８％，２５／３３）明显高于普通正常人（５７％，５６／９８），移植后４０天可达９３．９％（３１／３３），呈感染上升趋势。结果提示有必要在ＢＭＴ时对供受体进行人巨细胞病毒感染检测，便于ＢＭＴ术前选择和术后治疗，以提高移植的成功率。

再生障碍性贫血患儿骨髓内人巨细胞病毒活动性感染对造血功能的影响

目的探讨再生障碍性贫血(再障)患儿骨髓内人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染与骨髓CD34+细胞/有核细胞的百分比之间的关系,了解骨髓HCMV活动性感染对再障患儿骨髓造血功能的影响。方法收集23例再障初诊患儿(再障组),5例非血液病患儿作为对照。所有患儿均于治疗前抽取骨髓液标本,一部分骨髓液采用Trizol法抽提骨髓液RNA,然后进行反转录聚合酶链反应,扩增后通过琼脂糖凝胶电泳检测患儿骨髓内是否存在HCMV活动性感染;将再障组和对照组患儿另一部分骨髓液进行多参数流式细胞术检测,分别检测二组患儿骨髓CD34+细胞/有核细胞百分比。结果23例再障患儿中9例患儿骨髓标本内可检测到HCMV RNA表达,阳性率为39.1%;5例对照组患儿骨髓标本内均未检测到HCMV RNA表达。流式细胞术检测显示再障患儿骨髓CD34+细胞/有核细胞为(0.27±0.21)%,明显低于对照组[(1.57±0.45)%](P<0.05)。骨髓HCMV RNA阳性再障患儿的CD34+细胞/有核细胞为(0.13±0.07)%,显著低于HCMV RNA阴性患儿[(0.36±0.22)%](P<0.05)。结论HCMV可感染再障患儿的骨髓组织,其活动性感染可导致骨髓CD34+细胞/有核细胞的百分比明显减少,提示骨髓内HCMV活动性感染对骨髓造血功能有抑制作用。

人巨细胞病毒感染对人骨髓粒-单系祖细胞生长的影响

目的 探讨人巨细胞病毒 (HCMV)对人骨髓粒 -单系祖细胞 (GM -CFUc)集落形成能力的影响。方法 采用造血祖细胞培养技术 ,以HCMVAD169持续攻击骨髓GM -CFUc ,观察计数GM -CFUc集落、簇的产率及集落的大小和维持的时间。结果 ①HCMV感染组GM -CFUc集落和簇的产率明显低于对照组 (P <0 0 1) ;②HCMV感染GM -CFUc后 ,大集落的产率明显低于对照组 ;③集落维持的时间缩短 ,而集落出现峰值的时间无明显差异。结论 在体外HCMV对GM -CFUc生长、集落的形成有明显抑制作用 ,提示HCMV感染患儿粒细胞减少可能与HCMV损伤GM

宁波地区血液病患者中人巨细胞病毒和 EB病毒的流行病学研究

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)和EB病毒(EBV)在不同血液系统疾病中的感染流行情况。方法回顾性分析宁波市第一医院血液科各类血液病患者451例,按照疾病类型对所有患者分类,采用实时荧光定量PCR对患者的血液进行HCMV和EBV DNA检测。结果451例血液病患者HCMV和EBV总阳性率分别为16.41%和25.28%。血液病患者中HCMV感染率前三位依次为慢性髓系白血病(50.00%)、再生障碍性贫血(29.41%)和骨髓异常增生综合征(27.08%)。肿瘤患者HCMV感染率(20.50%)高于非肿瘤患者(11.79%),差异有统计学意义(χ~2=5.595,P=0.015)。肿瘤组与非肿瘤组HCMV DNA拷贝数之间差异无统计学意义(P=0.172)。血液病患者中EBV感染率前三位依次为急性淋巴细胞白血病(36.36%)、骨髓增生异常综合征(35.42%)和再生障碍性贫血(35.29%)。EBV在肿瘤患者(25.94%)和非肿瘤患者(24.53%)中的感染率差异无统计学意义(P=0.746)。非霍奇金淋巴瘤与急性淋巴细胞白血病组中EBV DNA拷贝数高于其他良性血液疾病组(Z=2.034,P=0.042,Z=-2.284,P=0.021),肿瘤组与非肿瘤组EBV拷贝数之间差异有统计学意义(Z=-2.762,P=0.006)。此外,骨髓移植患者移植后HCMV和EBV DNA拷贝数(23.75和7.85×10~3拷贝/ml)均明显高于移植前(8.03和3.71×10~3拷贝/ml),差异有统计学意义(t=-2.351,P=0.026,t=-3.996,P=0.001)。骨髓移植后EBV再激活时间长于HCMV的再激活时间(Z=-2.393,P=0.017)。结论HCMV和EBV在ALL、急性髓系白血病、骨髓异常增生综合征及再生障碍性贫血中有较高的感染率,肿瘤患者HCMV感染率较非肿瘤患者更高,HCMV和EBV在骨髓移植后患者中具有较高的活动性,骨髓移植后EBV再激活时间明显长于HCMV的再激活时间。