莪术对人子宫内膜癌作用的光镜及超微结构研究

目的 :研究莪术油注射液在体外对人子宫内膜癌细胞株RL - 95 2生长的抑制作用及其可能机制。方法 :通过MTT法实验观察莪术油注射液在体外对RL - 95 2的抑制作用 ;光镜及透射电镜观察癌细胞的形态学改变。结果 :莪术油注射液对RL - 95 2的抑制率呈时间 -剂量依赖性。光镜下见 :癌细胞核固缩 ,胞浆有大量的空泡出现 ;透射电镜见 :细胞浆内细胞器明显肿胀 ,线粒体嵴增粗 ;细胞染色质断裂、凝集。结论 :莪术油注射液在体外作用于人子宫内膜癌细胞株RL - 95 2 。

青蒿琥酯抑制人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖及诱导其凋亡的机制

目的研究青蒿琥酯对人子宫内膜癌HEC-1B细胞的作用及其抗癌机制。方法 MTT法观察细胞毒作用,流式细胞术测定细胞凋亡率并进行细胞周期分析,RT-PCR法检测人子宫内膜癌HEC-1B细胞用药组与对照组Livin、Caspase-3mRNA表达。结果 MTT检测显示青蒿琥酯抑制HEC-1B细胞生长且生长抑制作用呈剂量-时间依赖性;流式细胞仪检测示青蒿琥酯作用使G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),G2/M期细胞比例下降(P<0.05);对照组、5、20、80mg/L青蒿琥酯组细胞48h凋亡率(%)分别为6.64±0.19、6.92±0.28、36.42±0.77和11.77±0.58。实验组与对照组相比,5mg/L青蒿琥酯组凋亡率无统计学差异,20、80mg/L青蒿琥酯组凋亡率均有统计学差异(P<0.05);RT-PCR结果显示,青蒿琥酯组Livin mRNA表达下调,Caspase-3mRNA表达上调。结论青蒿琥酯体外抑制人子宫内膜癌细胞HEC-1B的生长;青蒿琥酯可能通过抑制Livin mRNA表达、进而增加Caspase-3mRNA表达,诱导子宫内膜癌HEC-1B细胞发生细胞周期阻滞,促进其凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。

线粒体DNA突变与子宫内膜癌紫杉醇耐药相关性研究

目的研究线粒体DNA(mtDNA)突变与子宫内膜癌紫杉醇耐药的关系。方法采用紫杉醇(TAX)大剂量冲击方法建立人子宫内膜癌紫杉醇耐药细胞株;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定耐药指数;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和凋亡率;采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和DNA测序相结合的方法,分析子宫内膜癌细胞株Ishikawa与其耐药株Ishikawa/TAX之间mtDNA的序列突变情况。结果两株细胞中mtDNA的突变热点依次是D-loop区、Cytb基因、ND4基因、ND5基因、CoⅡ基因及ND1基因。但Ishikawa/TAX细胞中mtDNA基因突变次数(72次)明显高于Ishikawa细胞(36次),两者比较,差异有统计学意义(P<0.01);其突变类型主要是G→A、C→A、缺失A/C和插入C等。结论 mtDNA突变可能与子宫内膜癌紫杉醇耐药有关。

人子宫内膜癌耐醋酸甲羟孕酮细胞株的建立

目的建立人子宫内膜癌孕激素耐药细胞株Ishikawa(ISH)/醋酸甲羟孕酮(MPA),为子宫内膜癌耐孕激素的发病机制提供基础。方法采用逐步递增MPA浓度方法进行Ishikawa细胞株耐药体外诱导。采用MTS法测定药物敏感性;绘制细胞生长曲线和计算群体倍增时间。结果 (1)成功建立了MPA诱导的人子宫内膜癌耐MPA细胞株ISH/MPA,其对MPA耐药指数为3.35;(2)ISH/MPA在含MPA 10μmol/L的培养基中的细胞倍增时间与Ishikawa在普通培养基中的倍增时间比较,差异无统计学意义(P>0.05),两者生长曲线比较一致。结论成功建立人子宫内膜癌MPA耐药细胞模型ISH/MPA细胞系,为进一步研究子宫内膜癌耐孕激素机制提供了基础。