腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究

目的:建立高灵敏度和特异性的腺激肽释放酶2(hk2)酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法:以hk2单克隆抗体(hk2mAb)为包被抗体,hk2多克隆抗体(hk2pAb)和辣根过氧化酶(HRP)标记抗IgG为检测抗体,建立检测hk2双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、精密度、准确度和稳定性等方法学进行评价。结果:hk2mAb、hk2pAb和HRP标记IgG的最佳稀释工作浓度分别为1∶100、1∶2 000和1∶8 000。该法线性范围为50～800 ng/L、线性良好(R2=0.99)、灵敏度为28 ng/L、批内和批间CV分别为5.78%和7.56%、平均回收率为99.4%。结论:双抗体夹心ELISA法检测人血清hk2,其敏感性高、特异性强、准确度好,可满足人血清和组织细胞培养液中hk2水平的检测。

血清EPCA-2及HK2浓度检测用于早期前列腺癌诊断的研究

目的探讨血清前列腺癌抗原-2(EPCA-2)及人类腺体激肽释放酶2(HK2)浓度检测用于早期前列腺癌诊断的价值。方法选取该院2015年6月至2017年1月收治的前列腺癌患者61例,另选取该院同期体检健康者37例作为对照组。所有入组研究对象均于清晨空腹抽取外周静脉血并分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清EPCA-2和HK2浓度。两组血清EPCA-2和HK2浓度、阳性率和不同临床分期血清EPCA-2和HK2浓度变化及EPCA-2和HK2联合检测特异度和灵敏度进行比较。结果研究组血清EPCA-2和HK2浓度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组EPCA-2和HK2阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者血清EPCA-2和HK2浓度高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);EPCA-2+HK2特异度和灵敏度高于EPCA-2、HK2单项检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论前列腺癌患者血清EPCA-2及HK2联合检测具有较高的特异度和灵敏度,EPCA-2及HK2对前列腺癌患者早期诊断具有重要临床价值。

人体激肽释放酶2与前列腺癌

人体激肽释放酶2(human kallikrein2,hK2)是一种主要在前列腺中表达的丝氨酸蛋白酶,近年作为前列腺癌的血清标记物受到广泛关注。随着对hK2结构特征、组织表达、生物学活性和调节,及其与前列腺癌病理过程的关系的研究更一步深入,hK2在前列腺癌诊断、病理分期及治疗中的潜在应用价值将越加瞩目。

早期前列腺癌抗原-2和人类腺体激肽释放酶2在前列腺癌诊断中的临床意义

目的探讨血清早期前列腺癌抗原-2(EPCA-2)和人类腺体激肽释放酶2(hK2)浓度在前列腺癌早期诊断提供理论依据。方法选择健康对照组58例、前列腺增生症组43例、前列腺癌组34例,用电化学发光法检测血清前列腺特异性抗原(PSA)浓度,用酶联免疫技术分别检测血清EPCA-2和hK2浓度,观察3组患者EPSA、PCA-2和hK2水平的差异和相关性,并探讨对前列腺癌的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果前列腺癌组PSA、EPCA-2、hK2水平明显高于健康对照组和前列腺增生组,差异有统计学意义(q值分别为10.24、8.18、7.87、9.15、7.23、6.41,P<0.01);前列腺增生症组PSA、EPCA-2水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(q值分别为3.61、3.04,P<0.05),但hK2水平2组间差异无统计学意义(q=2.75,P>0.05)。PSA水平与EPCA-2、hK2水平呈正相关(r值分别为0.869,0.792,P<0.01),EPCA-2、hK2水平呈正相关(r=0.780,P<0.01)。以PSA>5 ng/ml为前列腺癌的判定标准,其预测前列腺癌的特异性偏低达60.4%,敏感性高达91.18%,阳性预测值43.66%,阴性预测值95.31%。以EPCA-2>30 ng/ml为前列腺癌的判定标准,其预测前列腺癌的特异性达96.04%,敏感性达94.12%,阳性预测值88.89%,阴性预测值97.98%。以hK2>0.17 ng/ml为前列腺癌的判定标准,其预测前列腺癌的特异性达87.13%,敏感性达88.24%,阳性预测值69.77%,阴性预测值95.65%。PSA、EPCA-2、hK2曲线下面积分别为0.758、0.951、0.877,3项观察指标依次预测前列腺的诊断价值依次为EPCA-2>hK2>PSA。结论前列腺癌患者血清EPCA-2、hK2检测,可以进一步提高诊断的准确性,避免误诊及漏诊,为临床诊疗方案提供有力的参考依据。

前列腺癌组织中人腺体激肽释放酶2基因表达值与Gleason评分的相关性分析

目的探讨人腺体激肽释放酶（hK）2基因表达值与前列腺癌的Gleason评分的相关性及临床意义。方法运用实时荧光定量（FQ）PCR方法检测40例已知Gleason评分前列腺癌病理组织中hK2的基因表达值。结果前列腺癌组织中hK2基因表达值在不同的Gleason评分中有差异，随Gleason评分值升高而升高。结论前列腺癌组织中hK2基因表达值与Gleason评分呈正相关；hK2有望成为前列腺癌早期诊断，恶性程度评估以及预后判断的重要指标。