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Influencing factors of rat small intestinal epithelial cell cultivation and effects of radiation on cell proliferation 被引量:1
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作者 Xin Ze Ran Yong Ping Su +3 位作者 Yong Jiang Wei Guo Ping Ai Tian Min Cheng Yuan Lin Institute of Combined Injury, PLA, School of Preventive Medicine, Third Military Medical University. Chongqing 400038, China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第1期140-142,共3页
INTRODUCTIONCrypt epithelial cells in normal small intestineproliferate at a high speed. But they are verydifficult to culture in vitro and passage stably. A lotof studies have been done[1-16]. Some domestic labsisola... INTRODUCTIONCrypt epithelial cells in normal small intestineproliferate at a high speed. But they are verydifficult to culture in vitro and passage stably. A lotof studies have been done[1-16]. Some domestic labsisolated and cultured crypt cells from embryonalintestines and aseptic animal intestine, but failed.We introduced normal rat epithelial cell line-IEC-6from the USA and its living condition for stablepassage was successfully established after trials. Thecell line was testified to be the small intestinalepithelial cell by electron microscopy,immunihistochemistry and enzymatic histoch-emistry. It has been applied to some relatedresearch work[17-21]. It was found that manyfactors were involved in the culture system. Ourpresent study focuses on the culture method and theinfluencing factors on IEC-6. 展开更多
关键词 intestine small intestinal epithelial cell RADIATION cells cultured RADIATION DOSAGE immunohistochemistry microscopy electron
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Individual and Combined Effects of Nucleotides and Human Milk Oligosaccharides on Proliferation, Apoptosis and Necrosis in a Human Fetal Intestinal Cell Line 被引量:2
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作者 Shelly N. Hester Sharon M. Donovan 《Food and Nutrition Sciences》 2012年第11期1567-1576,共10页
Nucleotides (NT) and human milk oligosaccharides (HMO) individually affect epithelial cell growth, but their combined effects had not been studied. Herein, the impact of NT and HMO on cell proliferation, apoptosis, ne... Nucleotides (NT) and human milk oligosaccharides (HMO) individually affect epithelial cell growth, but their combined effects had not been studied. Herein, the impact of NT and HMO on cell proliferation, apoptosis, necrosis and cell cycle in the fetal epithelial cell line (FHs-74 Int) was determined. Cells were incubated with media containing 2.5% FBS and no epidermal growth factor (Control);fucosyllactose (FL) mix [85% 2’FL/15% 3’FL], sialyllactose (SL) mix [40% 6’SL/10% 3’SL/50% sialic acid (SA)] or LNnT at 125, 250, 500 or 1000 μg/mL with and without 250 μg/mL NT (43% CMP, 18.5% UMP, 16.4% AMP, and 22.0% GMP) for 24 or 72 h. NT alone significantly increased proliferation, but did not affect cell cycle or apoptosis/necrosis. All HMO treatments at 1000 μg/mL significantly decreased proliferation and some were also inhibitory at 250 or 500 μg/mL. When NT and HMO were simultaneously added, NT ameliorated the anti-proliferative effect of HMO. FL significantly increased cells in S phase and SL and LNnT treatments significantly increased cells in G2/M and S phases, which concomitantly decreased cells in G0/G1. HMO with NT significantly decreased the percent of cells in the G2/M phase compared to HMO alone. Higher HMO doses significantly increased the percentage of apoptotic and necrotic cells compared to control. In conclusion, HMO reduced cell proliferation and this effect is partially ameliorated by NT. It appears that HMO initially induced apoptosis/necrosis, which was later evidenced by G2/M cell cycle arrest and decreased proliferation. 展开更多
关键词 epithelial cells human Milk OLIGOSACCHARIDES NUCLEOTIDES INTESTINE PROLIFERATION
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Life and death at the mucosal-luminal interface: New perspectives on human intestinal ischemia-reperfusion 被引量:11
3
作者 Joep Grootjans Kaatje Lenaerts +2 位作者 Wim A Buurman Cornelis HC Dejong Joep PM Derikx 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2016年第9期2760-2770,共11页
Intestinal ischemia is a frequently observed phenomenon. Morbidity and mortality rates are extraordinarily high and did not improve over the past decades. This is in part attributable to limited knowledge on the patho... Intestinal ischemia is a frequently observed phenomenon. Morbidity and mortality rates are extraordinarily high and did not improve over the past decades. This is in part attributable to limited knowledge on the pathophysiology of intestinal ischemia-reperfusion(IR) in man, the paucity in preventive and/or therapeutic options and the lack of early diagnostic markers for intestinal ischemia. To improve our knowledge and solve clinically important questions regarding intestinal IR, we developed a human experimental intestinal IR model. With this model, we were able to gain insight into the mechanisms that allow the human gut to withstand short periods of IR without the development of severe inflammatory responses. The purpose of this review is to overview the most relevant recent advances in our understanding of the pathophysiology of human intestinal IR, as well as the(potential) future clinical implications. 展开更多
关键词 small intestinal ISCHEMIA Colon ISCHEMIA epithelial LINING ISCHEMIA-REPERFUSION human models
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富马酸与肉桂醛联用调节产肠毒素型大肠杆菌诱导猪肠上皮细胞氧化应激的分子机制
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作者 刘禹彤 杨冠华 +3 位作者 张菊 李玉鹏 乔家运 李海花 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1904-1915,共12页
本试验旨在研究富马酸(FA)与肉桂醛(CA)联用调节产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)K88诱导猪肠上皮细胞IPEC⁃J2氧化应激的分子机制。试验选用IPEC⁃J2细胞建立氧化损伤模型,用不同浓度FA和CA处理IPEC⁃J2细胞12和24 h,并用CCK⁃8法检测细胞活力,确... 本试验旨在研究富马酸(FA)与肉桂醛(CA)联用调节产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)K88诱导猪肠上皮细胞IPEC⁃J2氧化应激的分子机制。试验选用IPEC⁃J2细胞建立氧化损伤模型,用不同浓度FA和CA处理IPEC⁃J2细胞12和24 h,并用CCK⁃8法检测细胞活力,确定最佳处理浓度和时间;以最佳处理浓度的FA和CA预处理细胞,ETEC K88感染细胞3、6、12和24 h,检测其活菌黏附率,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞因子含量和抗氧化指标,并用实时荧光定量PCR(RT⁃qPCR)测定热休克蛋白70(Hsp70)和核因子-κB(NF⁃κB)信号通路相关基因mRNA相对表达量。结果表明:1)FA和CA的最佳处理浓度分别为1.00 mg/mL和1.00μL/mL,最适培养时间为12 h。2)添加FA和CA可有效抑制ETEC K88黏附IPEC⁃J2细胞,当ETEC K88感染细胞3 h时其黏附率显著下降(P<0.05),6、12和24 h时极显著下降(P<0.01)。3)添加FA和CA可极显著降低ETEC K88感染细胞中促炎性细胞因子白细胞介素-8(IL⁃8)和肿瘤坏死因子-α(TNF⁃α)含量(P<0.01),极显著提高抗炎性细胞因子白细胞介素-10(IL⁃10)和转化生长因子-β(TGF⁃β)含量(P<0.01)。4)ETEC K88通过激活NF⁃κB信号通路诱导IPEC⁃J2细胞氧化损伤,添加FA和CA可上调Hsp70 mRNA相对表达量并抑制NF⁃κB信号通路缓解IPEC⁃J2细胞氧化应激。5)添加FA和CA可显著提高ETEC K88感染细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)活性(P<0.05),极显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0.01)。综上所述,FA与CA联用可调节炎性细胞因子和氧化应激蛋白平衡并抑制ETEC K88黏附IPEC⁃J2细胞,其可能是通过上调Hsp70抑制NF⁃κB信号通路,增强IPEC⁃J2细胞的抗氧化和抗炎能力,从而缓解ETEC K88诱导的IPEC⁃J2细胞氧化应激。 展开更多
关键词 肉桂醛 富马酸 猪肠上皮细胞 产肠毒素型大肠杆菌 氧化应激
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Effects of recombinant human growth hormone on enterocutaneous fistula patients 被引量:7
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作者 Guo-Sheng Gu Jian-An Ren Ning Li Jie-Shou Li 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第44期6858-6862,共5页
AIM:To explore the effects of recombinant human growth hormone (rhGH) on intestinal mucosal epithelial cell proliferation and nutritional status in patients with enterocutaneous fi stula. METHODS:Eight patients with e... AIM:To explore the effects of recombinant human growth hormone (rhGH) on intestinal mucosal epithelial cell proliferation and nutritional status in patients with enterocutaneous fi stula. METHODS:Eight patients with enterocutaneous fi stulas received recombinant human growth hormone (10 μg/d) for 7 d. Image analysis and immunohisto-chemical techniques were used to analyse the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in intestinal mucosal epithelial cells in biopsy samples from the patients who had undergone an endoscopic biopsy through the fi stula at day 0,4 and 7. Body weights,nitrogen excretion,serum levels of total proteins,albumin,prealbumin,transferrin and fi bronectin were measured at day 0,4 and 7. RESULTS:Significant improvements occurred in the expression of PCNA in the intestinal mucosal epithelial cells at day 4 and 7 compared to day 0 (24.93 ± 3.41%,30.46 ± 5.24% vs 12.92 ± 4.20%,P < 0.01). These changes were accompanied by the significant improvement of villus height (500.54 ± 53.79 μm,459.03 ± 88.98 μm vs 210.94 ± 49.16 μm,P < 0.01),serum levels of total proteins (70.52 ± 5.13 g/L,74.89 ± 5.16 g/L vs 63.51 ± 2.47 g/L,P < 0.01),albumin (39.44 ± 1.18 g/L,42.39 ± 1.68 g/L vs 35.74 ± 1.75 g/L,P < 0.01) and f ibronectin (236.3 ± 16.5 mg/L,275.8 ± 16.9 mg/L vs 172.5 ± 21.4 mg/L,P < 0.01) at day 4 and 7,and prealbumin (286.38 ± 65.61 mg/L vs 180.88 ± 48.28 mg/L,P < 0.05),transferrin (2.61 ± 0.12 g/L vs 2.41 ± 0.14 g/L,P < 0.05) at day 7. Nitrogen excretion was signifi cantly decreased at day 7 (3.40 ± 1.65 g/d vs 7.25 ± 3.92 g/d,P < 0.05). No change was observed in the body weight. CONCLUSION:Recombinant human growth hormone could promote intestinal mucosal epithelial cell proliferation and protein synthesis in patients with enterocutaneous fi stula. 展开更多
关键词 人类 生长激素 重组体 上皮细胞 细胞核心抗原
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HMGB1小干扰RNA对鼻黏膜上皮细胞HMGB1/TLR4信号通路的影响
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作者 刘洋 鲍羿岐 +1 位作者 崔娜 朱学伟 《中国实验诊断学》 2023年第3期346-349,共4页
目的研究采用小干扰RNA(si-RNA)沉默高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人鼻黏膜上皮细胞(HNECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号通路的影响。方法体外培养人鼻黏膜上皮细胞,分为空白对照组、si-HMGB1组、脂多糖(LPS)组和LPS+si-HMGB1组。RT-PCR检... 目的研究采用小干扰RNA(si-RNA)沉默高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人鼻黏膜上皮细胞(HNECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号通路的影响。方法体外培养人鼻黏膜上皮细胞,分为空白对照组、si-HMGB1组、脂多糖(LPS)组和LPS+si-HMGB1组。RT-PCR检测HNECs中HMGB1 mRNA的表达。Western blot检测4组细胞HMGB1、TLR4表达以及通路下游核因子-κB(NF-κB)和白介素1β(IL-1β)的表达水平。观察siRNA干扰HMGB1蛋白表达后鼻黏膜上皮细胞的相应变化。结果RT-PCR结果显示,LPS组细胞中HMGB1的转录水平显著高于空白对照组(P<0.05)。LPS+si-HMGB1组HMGB1的mRNA转录水平显著低于LPS组(P<0.05)。Western blot检测结果显示,LPS+si-HMGB1组的TLR4,HMGB1蛋白表达水平明显低于LPS组,结果具有统计学意义(P<0.05)。LPS+si-HMGB1组细胞的NF-κB以及IL-1β水平明显低于LPS组(P<0.05)。结论鼻黏膜上皮细胞表达HMGB1蛋白,通过siRNA沉默手段可以下调HMGB1的表达。LPS可以激活炎症性的HMGB1,TLR4,通路下游信号NF-κB及IL-1β。siRNA可以下调HMGB1蛋白表达水平,进而抑制TLR4-NF-κB以及IL-1β信号传导通路。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1 小干扰RNA 鼻黏膜上皮细胞 TLR4 细胞信号传导通路
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益气养阴散结方对A549裸鼠肿瘤脂滴相关蛋白与脂代谢相关蛋白的影响
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作者 杨雪飞 张志娣 +4 位作者 黄挺 傅晓青 叶知锋 郭俊华 刘冰 《浙江中西医结合杂志》 2023年第3期205-210,共6页
目的探讨益气养阴散结方对A549裸鼠肿瘤脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的影响。方法取4~6周龄BALB/c裸鼠30只,皮下接种A549细胞株以复制肺腺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为五组,模型组、顺铂组和益气养阴散结方低、中、高剂量组,每组6... 目的探讨益气养阴散结方对A549裸鼠肿瘤脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的影响。方法取4~6周龄BALB/c裸鼠30只,皮下接种A549细胞株以复制肺腺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为五组,模型组、顺铂组和益气养阴散结方低、中、高剂量组,每组6只。接种次日起给药,模型组给予生理盐水0.3 mL/d;顺铂组给予顺铂4 mg/kg,每周2次;益气养阴散结方低、中、高剂量组给予5、10、20 g/(kg·d)益气养阴散结方,连续给药8周。采用免疫印迹、免疫组化检测脂周素-1(perilipin-1)、脂滴蛋白5(LSDP5)、47kDa尾连蛋白(TIP47)、脂肪分化相关蛋白(ADRP)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)、Delta样因子-1(DLK-1)、小窝蛋白-1(caveolin-1)等脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白在肿瘤中的表达。结果30只裸鼠成瘤,成瘤率100%。在实验期内,模型组和益气养阴散结方中剂量组各死亡裸鼠1只。免疫印迹结果表明,与模型组比较,益气养阴散结方低、高剂量组显著下调脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的表达[perilipin-1:(0.76±0.23)、(0.58±0.18)比(0.93±0.22);LSDP5:(0.79±0.23)、(0.38±0.11)比(1.06±0.30);TIP47:(0.49±0.19)、(0.24±0.06)比(0.71±0.25);ADRP:(0.48±0.15)、(0.27±0.08)比(0.61±0.17);A-FABP:(0.52±0.14)、(0.31±0.09)比(0.59±0.19);DLK1:(0.75±0.23)、(0.64±0.08)比(1.07±0.21);caveolin-1:(0.60±0.25)、(0.41±0.09)比(1.09±0.31),P<0.05或P<0.01]。免疫组化结果表明,与模型组比较,益气养阴散结方中、高剂量组显著下调脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的表达[perilipin-1:(4.17±0.32)、(3.90±0.57)比(5.70±0.97);TIP47:(5.13±0.50)、(3.73±0.31)比(5.67±0.70);ADRP:(4.67±1.01)、(4.17±0.61)比(6.13±0.81);AFABP:(4.02±0.40)、(3.40±0.23)比(5.67±0.75);caveolin-1:(5.03±0.50)、(4.23±0.35)比(6.33±0.93),P<0.05或P<0.01],高剂量组下调DLK1表达[(5.10±0.40)比(7.93±0.91),P<0.01]。结论高剂量益气养阴散结方可显著降低perilipin-1、LSDP5、TIP47、ADRP、A-FABP、DLK1、caveolin-1等脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白在A549裸鼠肿瘤中的表达。 展开更多
关键词 裸鼠 非小细胞肺癌 人肺腺癌细胞株A549 益气养阴散结方 脂滴相关蛋白 脂代谢相关蛋白
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抗氧化乳酸菌的筛选及其对小肠上皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量:2
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作者 王小鹏 崔文明 +7 位作者 王子卓越 杨文月 黄宇琪 李静蕊 陈水燕 郭培培 赵改名 闫爽 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第4期387-394,共8页
从36株分离自长寿老人粪便的乳酸菌中筛选高抗氧化活性菌株,利用过氧化氢(H_(2)O_(2))建立大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)氧化损伤模型,探究所筛选菌株对IEC-6细胞氧化应激的影响。结果表明,菌株HN-04、HN-05、HN-15有较强的体外抗氧化能力,其... 从36株分离自长寿老人粪便的乳酸菌中筛选高抗氧化活性菌株,利用过氧化氢(H_(2)O_(2))建立大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)氧化损伤模型,探究所筛选菌株对IEC-6细胞氧化应激的影响。结果表明,菌株HN-04、HN-05、HN-15有较强的体外抗氧化能力,其DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力分别为52.18%~57.16%、47.44%~52.38%、37.11%~43.31%,菌株对IEC-6细胞的黏附率分别为6.77%、6.92%和5.82%。在3株乳酸菌的干预作用下,氧化损伤细胞的存活率提高了5.31%~11.19%,细胞中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)分别提升12.03%~32.39%、21.20%~47.42%、36.10%~87.14%和23.55%~48.69%,丙二醛含量(MDA)降低20.98%~48.80%。所筛选的3株乳酸菌具有缓解细胞氧化应激损伤的作用,可作为天然抗氧化剂应用于功能性食品开发。 展开更多
关键词 乳酸菌 抗氧化活性 小肠上皮细胞 细胞黏附 细胞氧化损伤
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噬菌体展示技术筛选羊小肠上皮细胞穿透肽
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作者 刘思佳 徐晓东 +6 位作者 姜宁 潘春媛 宋军 赵磊 赵芳芳 李沐阳 张爱忠 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期6033-6041,共9页
为解决抗菌药物不能穿透细胞膜杀伤胞内致病菌的问题,本试验以羊小肠(空肠段)上皮细胞为靶细胞,利用噬菌体展示技术4轮体外生物淘洗,系统地筛选羊小肠上皮细胞的特异性穿透肽,将其作为抗菌肽的载体从而提高抗菌肽的穿透能力。试验采用... 为解决抗菌药物不能穿透细胞膜杀伤胞内致病菌的问题,本试验以羊小肠(空肠段)上皮细胞为靶细胞,利用噬菌体展示技术4轮体外生物淘洗,系统地筛选羊小肠上皮细胞的特异性穿透肽,将其作为抗菌肽的载体从而提高抗菌肽的穿透能力。试验采用噬菌体展示技术,经过4轮体外生物淘洗,得到了能与羊小肠上皮细胞结合的多肽;4轮减数筛选后,噬菌体的回收率逐渐提高,特异性的噬菌体克隆得到了有效富集,酶联免疫吸附法(ELISA)测定单克隆噬菌体对羊小肠上皮细胞的亲和力,亲和力≥2的为阳性,筛选阳性噬菌体克隆,提取DNA进行测序,选择高重复率序列,合成细胞穿透肽,同时合成与细胞穿透肽的氨基酸序列及结构相同但组合顺序不同的对照多肽,并与异硫氰酸荧光素(FITC)标签连接。用细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK8)测定细胞穿透肽和对照肽对细胞活力的影响,用荧光显微镜初步观察穿透肽的穿透性,用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测穿透肽在胞内的定位及穿透强度。结果表明:经4轮体外减数筛选噬菌体的回收率增长了226倍,随着第1轮至第4轮筛选轮次增加,与羊小肠上皮细胞结合的噬菌体依次增加;使用ELISA进行检测,结果显示,在随机挑选的30个单克隆噬菌体中,22个检测为阳性克隆(亲合力≥2);提取阳性克隆噬菌体进行DNA测序分析后,得到2条重复率高的氨基酸序列,VLNSLID命名为SCPP1,HSTTAQF命名为SCPP2;细胞活力结果表明,在浓度低于256μmol/mL时2条细胞穿透肽及其对照多肽的细胞活力仍在90%以上,表明对细胞无毒;荧光显微镜下观察及激光共聚焦结果表明,SCPP1和SCPP2可以特异性穿透羊小肠上皮细胞膜,且SCPP1可以穿透细胞核表现出比SCPP2更强的穿透性,2条对照多肽无穿透能力;流式细胞仪结果显示,SCPP1的胞内平均荧光强度明显高于SCPP2,且呈时间剂量依赖。本试验筛选出了安全可特异性穿透羊小肠上皮细胞的穿透肽(SCPP1),可作为治疗羊肠道胞内菌的抗菌肽的载体。 展开更多
关键词 噬菌体展示技术 肽库 羊小肠上皮细胞 细胞穿透肽
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天然小分子保护炎症性肠病中肠上皮紧密连接屏障的研究进展
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作者 钟玉婷 王志斌 张立超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2205-2210,共6页
炎症性肠病作为一种特发性肠道炎症疾病,可累及直肠、结肠和回肠等部位,主要包括克罗恩病和溃疡性结肠炎,其发病机制至今未明。肠黏膜上皮屏障损伤所导致的肠道通透性增加是肠道炎症启动的始动因素。肠黏膜上皮屏障的抗通透性是由肠上... 炎症性肠病作为一种特发性肠道炎症疾病,可累及直肠、结肠和回肠等部位,主要包括克罗恩病和溃疡性结肠炎,其发病机制至今未明。肠黏膜上皮屏障损伤所导致的肠道通透性增加是肠道炎症启动的始动因素。肠黏膜上皮屏障的抗通透性是由肠上皮细胞顶端区域的紧密连接来维持的,紧密连接结构的破坏与炎症性肠病的发生和肠上皮屏障损伤密切相关。因此,以紧密连接为调控靶标寻找炎症性肠病的防治药物意义重大。近年来,大量天然产物来源的小分子被报道具有改善炎症性肠病的作用,该文特别针对其中具有修复肠上皮屏障功能和保护紧密连接的化合物进行综述,以期为炎症性肠病防治新药的设计和开发提供研究思路。 展开更多
关键词 炎症性肠病 肠上皮屏障 紧密连接 天然小分子化合物 肠上皮细胞 肠道通透性
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ETEC感染猪小肠上皮细胞初期差异表达cricRNA的筛选
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作者 朱凯晴 朱悦 +3 位作者 刘迎迎 崔亚男 蒋秉妤 李妍 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3490-3498,共9页
【目的】分析产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)初期宿主细胞内环状RNA(circularRNA,circRNA)的表达谱变化,并探究其调控机制。【方法】采用Illumina PE150测序平台对ETEC感染IPEC-J... 【目的】分析产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)初期宿主细胞内环状RNA(circularRNA,circRNA)的表达谱变化,并探究其调控机制。【方法】采用Illumina PE150测序平台对ETEC感染IPEC-J2细胞进行转录组测序,利用生物信息学在线软件筛选出差异表达circRNAs,经过GO功能和KEGG通路富集分析筛选出ETEC感染相关circRNAs,用IRESfinder和PFAM 33.1软件进行circRNAs编码潜能预测;随机挑选5个差异表达circRNAs,用实时荧光定量PCR验证circRNAs表达情况及核糖核酸酶R(RNase R)消化结果。【结果】转录组测序结果显示,共获得201个差异表达circRNAs,其中95个表达上调和106个表达下调。GO功能富集分析表明,ETEC感染初期circRNAs来源基因主要影响细胞形态、细胞代谢和泛素蛋白连接酶活性等功能。KEGG通路富集分析显示,circRNAs可能参与氨基酸代谢途径、泛素介导的蛋白质水解通路、黏合连接和肌动蛋白细胞骨架调节等信号通路。circRNAs编码潜能预测发现4个具有编码潜能的circRNAs,其中novel_circ_0009996和来源基因TNFAIP3共同富集在NF-κB和TNF信号通路。实时荧光定量PCR结果显示,5个circRNAs的表达水平与测序结果一致,差异表达circRNAs均为环状RNA分子,测序结果准确可靠。【结论】ETEC感染IPEC-J2细胞初期差异表达circRNAs和其来源基因主要参与炎症反应、基因表达的转录后调控、细胞免疫过程、细胞骨架、细胞增殖和凋亡等相关生物过程,其中novel_circ_0009996具有编码潜能,主要富集在NF-κB和TNF信号通路。研究结果为深入探究circRNA在ETEC感染初期的调控机制提供理论基础。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌(ETEC) 猪小肠上皮细胞 circRNA 感染
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hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA联合检测对乳腺癌的临床诊断价值
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作者 张旭明 尹伟明 高婧 《检验医学与临床》 CAS 2023年第5期660-663,共4页
目的探讨人乳腺珠蛋白(hMAM)、乳腺上皮小黏蛋白(SBEM)和癌胚抗原相关细胞黏附分子19(CEACAM19)mRNA联合检测对乳腺癌的临床诊断价值。方法选择该院2019年1月至2021年1月收治的73例乳腺癌患者作为乳腺癌组,另选取同期70例乳腺良性病变... 目的探讨人乳腺珠蛋白(hMAM)、乳腺上皮小黏蛋白(SBEM)和癌胚抗原相关细胞黏附分子19(CEACAM19)mRNA联合检测对乳腺癌的临床诊断价值。方法选择该院2019年1月至2021年1月收治的73例乳腺癌患者作为乳腺癌组,另选取同期70例乳腺良性病变患者作为良性病变组,同期70例健康志愿者作为健康对照组。检测并比较3组hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA表达水平;分析乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移情况与hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA表达水平的关系;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA单独及联合检测对乳腺癌的诊断效能。结果乳腺癌组hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA表达水平均高于良性病变组及健康对照组,且良性病变组上述指标表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA表达水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的乳腺癌患者hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA表达水平均高于无淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA联合检测诊断乳腺癌的灵敏度为89.52%,特异度为65.12%,曲线下面积为0.874,高于各项指标单独检测(P<0.05)。结论hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA联合检测诊断乳腺癌的效能较佳,且其表达水平与临床分期及淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 人乳腺珠蛋白 乳腺上皮小黏蛋白 癌胚抗原相关细胞黏附分子19
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吲哚胺2,3-双加氧酶1对急性放射性肠道损伤的保护作用
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作者 蓝燕丽 皮文虎 +2 位作者 梅丹 杨海华 孔凤鸣 《温州医科大学学报》 CAS 2023年第4期269-275,284,共8页
目的:探讨吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)对急性放射性肠道损伤的作用。方法:使用TCGA和GTEX数据集中结肠癌、直肠癌组织和正常对照组织的测序结果,分析IDO1基因在肠癌组织及正常肠道组织中的表达情况。使用CRISPR/Cas9技术敲除鼠正常肠上皮... 目的:探讨吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)对急性放射性肠道损伤的作用。方法:使用TCGA和GTEX数据集中结肠癌、直肠癌组织和正常对照组织的测序结果,分析IDO1基因在肠癌组织及正常肠道组织中的表达情况。使用CRISPR/Cas9技术敲除鼠正常肠上皮IEC-6细胞中IDO1基因的部分第2、3外显子序列,建立鼠IEC-6的IDO1 KO(IDO1^(-/-))细胞系,并给予两个细胞系(野生型和IDO1^(-/-))放射处理。C57BL/6野生型小鼠和IDO1基因敲除(IDO1^(-/-))小鼠也给予腹部X射线照射以建立细胞和动物急性放射性肠道损伤模型。使用蛋白质印记法(Western blot)检测野生型和IDO1^(-/-)的IEC-6细胞及小鼠肠道组织中上皮紧密连接蛋白在放射前、后的蛋白表达水平。结果:Western blot证实IDO1在鼠IEC-6细胞、肠道组织中均有表达。对TCGA和GTEX数据集分析后也同样看到IDO1基因在结肠癌、直肠癌、正常肠道组织中均有表达,但癌组织中IDO1水平较正常肠道组织高(P<0.05)。体内外的放射照射后,IDO1、Claudin 1、Occludin、ZO-1等出现明显变化:与放射前比,放射后的细胞和小鼠组织中的IDO1的表达水平升高(P<0.05),而紧密连接蛋白Claudin 1、Occludin、ZO-1则下降(P<0.05);与野生型IEC-6细胞和小鼠相比,在IDO1^(-/-)IEC-6细胞和小鼠肠组织中,Claudin 1、Occludin、ZO-1下降更显著(P<0.05)。结论:IDO1在急性放射性肠道损伤中起保护作用,其保护作用可能是通过保护肠上皮细胞间紧密连接功能而实现的。 展开更多
关键词 肠放射性损伤 急性 吲哚胺2 3-双加氧酶1 紧密连接蛋白 肠上皮细胞 小肠
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四逆汤对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞超微结构的影响 被引量:24
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作者 刘克玄 吴伟康 +2 位作者 罗汉川 赵明奇 赵丹洋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期636-639,共4页
目的 :观察四逆汤 (SND)对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞超微结构的影响。方法 :32只SD大鼠随机分为 4组 (n =8) :对照组 (仅作假手术处理 )、模型组 (阻断肠系膜上动脉 1h后再灌注 3h)、SND1组 (SND 0 6g/ 2 0 0g大鼠灌胃 3d后手术 ... 目的 :观察四逆汤 (SND)对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞超微结构的影响。方法 :32只SD大鼠随机分为 4组 (n =8) :对照组 (仅作假手术处理 )、模型组 (阻断肠系膜上动脉 1h后再灌注 3h)、SND1组 (SND 0 6g/ 2 0 0g大鼠灌胃 3d后手术 )及SND 2组 (SND 1 2g/ 2 0 0g大鼠灌胃 3d后手术 )。实验时取回肠末端组织行电镜检查 ,并测量上皮细胞线粒体二维平面形态计量学参数和三维平面形态计量学参数。结果 :电镜下可见对照组上皮细胞柱状排列紧密 ,微绒毛细长、整齐、无水肿 ,线粒体丰富 ,无肿胀 ;模型组细胞间隙增宽 ,可见大量凋亡细胞 ,微绒毛脱落明显 ,线粒体严重肿胀 ,嵴断裂 ,内质网扩张。SND1组与SND2组均可见微绒毛及上皮细胞排列基本整齐 ,有少量上皮细胞脱落 ,线粒体轻度肿胀 ,嵴清。线粒体体视学参数提示模型组上皮细胞单位胞浆内线粒体少 ,肿胀 ;而SND1及SND2组线粒体丰富 ,肿胀轻微。电镜及体视学参数均提示SND对小肠上皮细胞超微结构的影响无明显量效关系。结论 :四逆汤预处理对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞有保护作用。 展开更多
关键词 四逆汤 小肠 再灌注损伤 上皮细胞
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大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响 被引量:16
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作者 林成招 马海田 +2 位作者 邹思湘 陈伟华 王国杰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-75,共5页
分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞, 用3H TdR掺入法分别检测了 0、0 1、1、10、100和 1 000ng·mL-1 2种大豆异黄酮 (大豆黄酮和染料木素) 对该细胞生长的影响, 并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化。同时, 利用翻转的离体小肠囊研究... 分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞, 用3H TdR掺入法分别检测了 0、0 1、1、10、100和 1 000ng·mL-1 2种大豆异黄酮 (大豆黄酮和染料木素) 对该细胞生长的影响, 并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化。同时, 利用翻转的离体小肠囊研究了 0、0 1、0 5、1和 5μg·mL-1大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响, 并检测了小肠黏膜总ATP酶活性的变化。结果显示: 100ng·mL-1的大豆异黄酮 (大豆黄酮、染料木素 ) 能够提高该细胞3H TdR的掺入量和碱性磷酸酶的活性, 提示大豆异黄酮可能有促小肠细胞生长的活性; 0 1和 0 5ng·mL-1的大豆黄酮和 0 5和 1 0ng·mL-1的染料木素对离体小肠葡萄糖的吸收具有促进作用, 而对赖氨酸与色氨酸的吸收以及小肠黏膜总ATP酶的活性没有明显影响。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 大鼠 小肠上皮细胞 葡萄糖 氨基酸 小肠吸收
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小肠黏膜下层复合上皮细胞及成肌细胞构建组织工程食管的初步研究 被引量:18
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作者 岑石强 李万里 +3 位作者 黄富国 杨志明 解慧琪 罗静聪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1040-1043,共4页
目的初步探索利用小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)作为支架材料,复合食管鳞状上皮细胞与成肌细胞构建组织工程食管的可行性。方法4周龄无胸腺小鼠20只,体重20.0±2.5g,雌雄不限。体外分离、培养人胚胎食管鳞... 目的初步探索利用小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)作为支架材料,复合食管鳞状上皮细胞与成肌细胞构建组织工程食管的可行性。方法4周龄无胸腺小鼠20只,体重20.0±2.5g,雌雄不限。体外分离、培养人胚胎食管鳞状上皮细胞、成肌细胞,并行5-BrdU标记;制备SIS材料并切割成1cm×lcm大小,在SIS材料同一表面接种两种细胞,待细胞在材料表面贴附后将其植入裸鼠体内深筋膜下,于术后第3天及l、2、3周取材行组织学和抗角蛋白、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)免疫组织化学观察,以了解食管鳞状上皮细胞、成肌细胞在SIS材料上的增殖、分化情况和复合物在裸鼠体内的血管化情况。结果人胚胎食管鳞状上皮细胞、成肌细胞能够渗透、生长于SIS材料中,并形成数层结构。植入体内第3天可见细胞增殖为多层覆盖于材料表面,并分泌大量细胞间基质。第2周时已经形成7~8层细胞,并伴有血管长入。3周时细胞增殖为十几层,大量血管长入。通过5-BrdU标记抗体染色观察,示SIS支架材料上生长的细胞多为所植入细胞。抗角蛋白,SMA免疫组织化学染色示移植细胞能够在体内分化。结论成肌细胞与鳞状上皮细胞在SIS材料上的复合培养物,在体内能继续增殖分化形成多层细胞结构,并能快速血管化,可用于组织工程化食管的构建。 展开更多
关键词 组织工程食管 小肠黏膜下基质 食管鳞状上皮细胞 成肌细胞
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小鼠小肠RNA对人肠上皮细胞辐射损伤修复的研究 被引量:8
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作者 任东青 赵涛 +1 位作者 曾桂英 杨文清 《实用预防医学》 CAS 2001年第3期161-163,共3页
目的 研究小鼠小肠RNA对受照人肠上皮细胞辐射损伤修复的作用。 方法 采用四唑盐 (MTT)比色法和流式细胞仪分析细胞周期。 结果 照后 4d ,随着照射剂量的增加 ,人肠上皮细胞的存活率逐渐降低 ;照后给予小肠RNA组的LD5 0 为 14 2Gy ... 目的 研究小鼠小肠RNA对受照人肠上皮细胞辐射损伤修复的作用。 方法 采用四唑盐 (MTT)比色法和流式细胞仪分析细胞周期。 结果 照后 4d ,随着照射剂量的增加 ,人肠上皮细胞的存活率逐渐降低 ;照后给予小肠RNA组的LD5 0 为 14 2Gy ,照射对照组的LD5 0 为 12 6Gy ,DMF为 1 13;照后 2 4h ,小肠RNA组的G2 期细胞增多 ,而G1 期细胞减少。 结论 小鼠小肠RNA可提高受照人肠上皮细胞存活率 ,其机理可能与调控细胞周期有关。 展开更多
关键词 电离辐射 人肠上皮细胞 小肠RNA 细胞存活率 细胞周期 修复
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鸡胚小肠上皮细胞的分离及原代培养研究 被引量:11
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作者 洪智敏 贾永杰 +2 位作者 瞿明仁 黎观红 刘思国 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1164-1170,共7页
取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱;胶原酶Ⅰ单独消化50... 取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱;胶原酶Ⅰ单独消化50 min或嗜热菌蛋白酶单独消化110 min以及胶原酶Ⅰ、嗜热菌蛋白酶联合消化后均可得到大量隐窝细胞团块,经低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,可获得较纯的上皮细胞。分离的细胞接种培养12~24 h贴壁,48~72 h细胞团中的细胞向四周蔓延,形成一群群的细胞集落,6~7 d细胞汇合成片,成"铺路石样",细胞多呈扁平多角状,椭圆状,单层生长,边界清晰,互不重叠。经形态学观察、扫描电镜鉴定、碱性磷酸酶染色和免疫组化鉴定为上皮细胞。 展开更多
关键词 鸡小肠上皮细胞 分离 原代培养 鸡胚
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鸡肠上皮细胞体外原代培养研究 被引量:18
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作者 杨文平 高峰 +3 位作者 许辉堂 施传信 赵国刚 周光宏 《江西农业学报》 CAS 2007年第5期113-115,118,共4页
取1月龄三黄鸡十二指肠的上皮细胞(intestinal epithelial cell,IEC),经分离纯化进行培养。结果表明:胰蛋白酶-EDTA配合使用、短时间消化收获细胞法可获得大量的健全肠绒毛隐窝单位,进一步培养获得的IEC完全可供相关实验研究之用。
关键词 小肠 上皮细胞 体外原代培养
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大鼠小肠上皮细胞培养体系的建立及其影响因素的探讨 被引量:12
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作者 冉新泽 粟永萍 +2 位作者 程天民 林远 刘晓宏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 1997年第5期8-11,共4页
作者引进并建立了大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的培养传代和活性检测的实验方法,且对几种影响因素进行了探讨,实验发现,IEC-6在一定密度范围内与^3H-TdR参入量呈正相关变化;培养72h以内,参入量随时间延长而增加... 作者引进并建立了大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的培养传代和活性检测的实验方法,且对几种影响因素进行了探讨,实验发现,IEC-6在一定密度范围内与^3H-TdR参入量呈正相关变化;培养72h以内,参入量随时间延长而增加,^3H-TdR,55.5Kbq/孔内,计数值与剂量间呈线性关系,胎牛血清浓度以10%为宜,但不加胰岛素组显著降低,pH值以7.26最好,IEC-6在4~26Gy照射范围内。 展开更多
关键词 上皮细胞 培养方法 大鼠 小肠
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