马兜铃酸对人肾小管细胞分泌性磷脂酶A_2的影响

目的:研究马兜铃酸(aristolochic acid,AA)对人肾小管细胞(human kidney cell,HKC)的损伤与分泌性磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)活性的影响。方法:以体外培养的HKC为研究对象,脂多糖(LPS)和氯化钙(CaCl2)为sPLA2激活剂,将实验分为单用AA组和联用激活剂组两大类,用sPLA2活性检测试剂盒检测上清中sPLA2活性改变。结果:10 mg/L AA刺激HKC 24 h后,引起细胞上清sPLA2活性降低(1.154±0.079 vs 1.389±0.123),与正常对照组比较无统计学意义。随着AA剂量的增大,sPLA2活性升高,40 mg/L时高达5.422±0.091(P<0.05),且40 mg/L AA培养组sPLA2活性表现出与时间呈正相关的变化。2LPS和CaCl2剂量正相关地激活HKC sPLA2,该过程可为10 mg/L AA所抑制,呈浓度依赖性。结论:10 mg/L AA可抑制LPS和CaCl2激活HKC sPLA2,呈浓度正相关性。同时,较高浓度AA可损伤HKC激活sPLA2。据此,推测AA损伤HKC的过程中,sPLA2活性达不到损伤程度应有的水平。

氯化钙拮抗马兜铃酸肾毒性的体外观察

目的:研究分泌性磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)激活剂氯化钙能否减轻马兜铃酸(aristolochic acid AA)对人肾小管细胞(human kidney cell HKC)的损伤。方法:以体外培养的HKC为研究对象,观察CaCl2对AA肾毒性的影响。检测指标包括MTT490nm处OD值和流式细胞议测定的细胞周期。实验分为正常对照组、单用AA组和合用AA和CaCl2组,结果:(1)AA表现出剂量相关和时间相关的肾毒性。40mg/L AA组细胞490nm处OD值明显下降,联用600μmol/L CaCl2,490nm处OD值有所上升(0.631±0.123 vs 0.492±0.076,P<0.05)。(2)AA可将HKC阻滞在S期和G2/M期。联用600μmol/L CaCl2,促进S期细胞进入G2/M期,逆转S期阻滞。结论:CaCl2可在一定程度上减轻马兜铃酸肾毒性,逆转细胞的增殖受抑状况。