脂氧素A4对TNF-α诱导的内皮细胞炎症反应的影响

目的:探讨脂氧素A4(LXA4)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)炎症相关因子的影响,并初步探讨其可能的机制。方法:实验分为对照组、TNF-α单独刺激组和不同浓度LXA4(5 ng/mL、25 ng/mL、50 ng/mL)预处理组。实时荧光定量PCR检测HPMECs单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、E-选择素(E-selectin)、白介素-6(IL-6)mRNA表达水平;细胞免疫化学方法定位检测核因子-κB/p65(NF-κB/p65);蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测细胞核内和细胞总蛋白中NF-κB/p65的水平。结果:LXA4可以抑制TNF-α诱导的HPMECs MCP-1、E-selectin、IL-6 mRNA表达的上调;LXA4可以抑制TNF-α引起的HPMECs p65由细胞质向细胞核的转位。结论:LXA4可能通过抑制NF-κB细胞信号通路而抑制血管内皮细胞炎症相关因子的表达,发挥抗炎作用。

人脂氧素A4对β淀粉样蛋白所致N2a细胞损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨人脂氧素A4(LXA4)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))损伤小鼠脑神经瘤(N2a)细胞的保护作用及其机制。方法:用Aβ_(25-35)处理N2a细胞建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,同时实验组加入不同质量浓度(50,100,200 nmol·L^(-1))的LXA4,采用MTT法检测N2a细胞的活性,Hoechst 33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR法检测P62和TRAF6基因mRNA表达,Western blot法检测P62和TRAF6蛋白表达。结果:与模型组相比,LXA4高、中、低3个浓度组的细胞活性明显提高(P<0.01);LXA4 100和200 nmol·L^(-1)浓度组减少Aβ_(25-35)引起的核固缩,凝集和破裂;与模型组相比,LXA4 100和200 nmol·L^(-1)浓度组上调P62-mRNA表达以及P62蛋白表达(P<0.05或P<0.01),同时下调TRAF6-mRNA表达以及TRAF6蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:LXA4对Aβ_(25-35)所致N2a细胞损伤具有保护作用,其机制可能与上调P62基因和下调TRAF6基因有关。

脂氧素A_4抑制内毒素诱导的人支气管上皮细胞环氧合酶2及前列腺素E_2的表达

目的:探讨脂氧素A_4对人支气管上皮细胞(HBECs)环氧合酶2(COX-2)表达的影响。方法:应用不同浓度(0.1、1、10 mg/L)的内毒素(LPS)刺激HBECs 9 h,或者用1 mg/L LPS分别刺激HBECs不同时点(3 h、6 h、9 h)后,测定HBECs的COX-2 mRNA表达和细胞上清液前列腺素E_2(PGE_2)水平。应用不同浓度(0、100、400μmol/L)的脂氧素A_4作用于经过LPS(1 mg/L)刺激培养9 h的HBECs,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液PGE_2的水平,同时分别应用RT-PCR和Western blotting分别检测HBECs COX-2 mRNA及蛋白的表达。结果:LPS刺激培养条件下HBECs的COX-2 mRNA表达及其上清液PGE_2水平增加,并呈时间、剂量依赖性。脂氧素A_4能抑制LPS刺激培养HBECs COX-2蛋白和mRNA的表达及上清液PGE_2的水平,并呈剂量依赖性。结论:脂氧素A_4能抑制LPS诱导的HBECs COX-2表达及上清液PGE_2的水平。

脑苷肌肽注射液联合亚低温治疗新生儿缺血缺氧性脑病的疗效研究

目的:探讨脑苷肌肽注射液联合亚低温治疗新生儿缺血缺氧性脑病的疗效。方法:选取70例新生儿缺血缺氧性脑病患儿为研究对象,按照治疗方式不同分观察组和对照组,每组各35例。对照组采用脑苷肌肽注射液治疗,观察组采用脑苷肌肽注射液+亚低温治疗,比较两组患儿治疗效果、症状缓解时间、治疗前后神经元特异性烯醇化酶(NSE)、新生儿神经行为(BNBA)评分、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、人脂氧素A4(LXA4)、内皮素-1(ET-1)的变化及不良反应。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05);观察组患儿肌张力、意识、反射恢复及惊厥停止时间短于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患儿NSE、HIF-1α、LXA4、ET-1水平降低,且观察组低于对照组(P<0.05);观察组NBNA评分高于对照组(P<0.05)。观察组患儿不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:脑苷肌肽注射液联合亚低温治疗新生儿缺血缺氧性脑病,可有效改善症状,促进神经功能恢复,调节血清NSE、HIF-1α、LXA4、ET-1水平,且疗效优于单用脑苷肌肽注射液,安全性高,可在临床推使用。

脂氧素 A4对尿酸诱导的人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响

目的：探讨脂氧素A4对尿酸诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVECs）炎症相关因子的影响及其可能的机制。方法实验分为对照组、尿酸单独刺激组和不同浓度脂氧素A4（5、25、50 ng/ml）预处理组。ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素（ IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α（ TNF-α）的浓度；实时荧光定量PCR检测HUVECs TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA 表达水平；Western 印迹法检测 p38丝裂原活化蛋白激酶（ MAPK）和NF-κB/p65磷酸化水平。结果12 mg/dl的尿酸刺激HUVECs 24 h,细胞培养上清中的TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高（P〈0.01）,脂氧素A4呈浓度依赖性地抑制尿酸诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6产生（P〈0.01）。尿酸刺激的TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达也被5、25、50 ng/ml脂氧素A4显著下调（P〈0.05）。 Western印迹法证实12 mg/dl的尿酸可诱导HUVECs p38 MAPK和NF-κB/p65蛋白磷酸化水平增加（P〈0.05）,而50 ng/ml脂氧素A4预处理后能够显著降低HUVECs的p38 MAPK和NF-κB/p65磷酸化水平（P〈0.01）。结论脂氧素A4可通过降低p38 MAPK和NF-κB/p65蛋白磷酸化水平而抑制尿酸诱导的血管内皮细胞炎症相关因子的表达,发挥抗炎作用。