维甲酸对肺鳞癌细胞株增殖分化的影响

用 5× 10 -6mol·L-1浓度的全反式维甲酸 (ATRA)作用于人肺鳞癌细胞株 (TUL细胞 ) ,检测细胞生长曲线 ;用MTT法检测细胞生长抑制率 ;用3H TdR掺入法测细胞DNA合成情况 ;透射电镜下观察细胞超微结构改变 ;并观察裸鼠成瘤情况。结果显示 :与对照组比较 ,经ATRA作用后 ,TUL细胞生长速度减慢 ,细胞生长曲线平坦 ,细胞生长抑制率为 42 3 % ,3H TdR掺入率明显减低 (P <0 .0 1) ,细胞DNA合成减少 ,透射电镜观察发现 ,TUL细胞呈良性分化 ,TUL细胞致瘤性明显降低。提示ATRA能抑制TUL细胞增殖 ,诱导分化 。

肺鳞癌细胞单克隆抗体的建立及鉴定

目的制备出高效价的抗人肺鳞癌单克隆抗体。方法以云南个旧肺鳞癌细胞YTMLC-90免疫的BALB/c小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS-1、SP2/0细胞为亲代细胞,应用鼠-鼠杂交瘤技术建立杂交瘤细胞系。ELISA法筛选,有限稀释法克隆化培养,ELISA法测定抗体效价,双抗体夹心法鉴定Ig亚类,制备染色体,G iemsa染色计数染色体数目,ABC免疫组化法行不同组织细胞的交叉检测。结果获得3株稳定分泌抗YTMLC-90细胞抗体的杂交瘤细胞株S2D1、N2D1及N3C5。培养上清效价分别为1∶512、1∶284及1∶1 024,腹水效价分别为1∶105、1∶104及1∶104;Ig亚类分别为IgG1、IgG2a及IgG3;染色体众数在90~110之间;3株抗人肺鳞癌单克隆抗体与其他组织细胞无交叉反应性。杂交瘤细胞体外传代培养6个月仍保持抗体稳定分泌。结论成功制备高效且特异的抗人肺鳞癌单克隆抗体。

三株抗人肺鳞癌单克隆抗体免疫组化分析

目的对三株抗云南个旧肺鳞癌YTMLC-90杂交瘤细胞S2D1、N2D1、N3C5所分泌的单克隆抗体进行不同组织细胞的免疫组化分析,探讨其特异性.方法用收集的原倍杂交瘤细胞上清常规ABC免疫组化法进行组织细胞学交叉检测,分析三个抗体与临床病理确诊的肺鳞癌组织、肺腺癌组织、肠癌组织、食道癌组织、肾癌组织、肺正常组织石腊切片和肺鳞癌YTMLC-90细胞系、肺腺癌GLC-82细胞系、舌鳞癌Tca-8113细胞系、鼻咽癌KB细胞系、胶质瘤U-251细胞系、膀胱癌T-24、B1u-87细胞系的交叉反应.结果杂交瘤细胞上清液与肺癌组织及肺鳞癌、肺腺癌细胞系YTMLC-90、GLC-82反应呈阳性,阳性率分别为82%、100%;与正常肺组织及肠癌组织、肾癌组织、食道癌组织及体外培养的其它各肿瘤细胞系均呈阴性反应.结论经免疫组化研究,三株单克隆抗体具有肺癌特异性,属于肺癌相关抗原的单克隆抗体.

重组人血管内皮抑制素联合阿法替尼及替吉奥二线治疗晚期肺鳞癌的单臂、多中心、前瞻性临床研究

目的评价重组人血管内皮抑制素联合阿法替尼及替吉奥二线治疗晚期肺鳞癌患者的有效性和安全性。方法共25例驱动基因阴性晚期肺鳞癌患者被纳入这项单臂前瞻性研究,按期二线给予入组患者重组人血管内皮抑制素联合阿法替尼及替吉奥治疗,观察分析患者无进展生存期(progression-free-survival,PFS)、总生存期(overall survival,OS)、疾病控制率(disease control rate,DCR)、客观缓解率(objective response rate,ORR)和不良反应(adverse reaction,AR)。结果25例入组患者接受了≥2个周期的二线治疗方案,随访时间截至2023年3月31日,其中4例患者病情部分缓解,17例患者病情稳定,4例患者病情进展。经研究者确认的ORR为16%(95%CI,4.5%~36.1%),DCR为84%(95%CI,63.9%~95.5%),中位PFS为5.3个月(95%CI,3.5~6.9个月),中位OS尚未达到。全组患者治疗耐受良好,治疗相关的Ⅲ级或Ⅳ级AR最常见的是白细胞下降(20%)和皮疹(12%),没有与治疗相关的死亡报告。结论重组人血管内皮抑制素联合阿法替尼及替吉奥二线治疗晚期肺鳞癌可延长患者PFS且相对安全,值得进一步探究及推广。

重组人内皮抑素对肺鳞癌放射增敏作用的体外实验研究

目的探讨国产重组人内皮抑素是否对肺鳞癌细胞系H-520具有放射增敏作用。方法取指数生长期的人肺鳞癌细胞系H-520细胞，用成克隆实验检测内皮抑素的细胞毒性和各实验组的克隆形成能力，计算各组细胞存活分数，利用多靶单击模型拟合细胞存活曲线。流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布变化及活化的Caspase蛋白片段水平。结果成克隆实验中内皮抑素联合照射组较照射组D0、Dq、D10SF2值均低，放射增敏比为1．50（D0值之比）。流式细胞术检测细胞凋亡示内皮抑素＋照射组细胞凋亡率分别为22．38％±1．61％、35．01％±1．16％、46．83％±2．06％、64．08％±4．28％，照射组分别为4．27％±0．29％、14．3％±1．15％、28．49％±1．58％、54．79％±1．89％，两组凋亡率差异有统计学意义（f=19．17、17．79、25．64、3．44，P值均〈0．05）。内皮抑素可诱导H-520细胞G0＋G1阻滞，而照射则诱导G2＋M期阻滞。内皮抑素＋照射组活化Caspase蛋白片段表达增加（62．7％±1．9％）较对照组（12．1％±0．1％）、内皮抑素组（54．6％,4-1．0％）和照射组（34．1％±1．2％）显著增高（t=46．69、6．55、22．54，P值均〈0．05；）。结论内皮抑素可通过抑制H-520细胞生长、促进凋亡、细胞周期重分布来达到放射增敏作用。

鸦胆子油乳对肺鳞癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨鸦胆子油乳诱导人肺鳞癌细胞株SK-MES-1的凋亡作用和其抗肿瘤机制。方法培养人肺鳞癌细胞株SK-MES-1,用不同浓度的鸦胆子油乳处理SK-MES-1细胞,采用MTT法检测鸦胆子油乳对SK-MES-1细胞生长、增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期。结果鸦胆子油乳抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK-MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性。与对照组相比,鸦胆子油乳处理后的SK-MES-1细胞G0-G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降。结论鸦胆子油乳在体外能够抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1的增殖,诱导其细胞凋亡,诱导作用具有显著的量效及时效关系。

携带凋亡素基因的重组腺病毒对人肺鳞癌细胞SK-MES-1、人肺腺癌细胞NCI-H1299凋亡的影响

目的:研究携带凋亡素基因VP3的重组腺病毒载体Adxsi-GFP-VP3对人肺鳞癌细胞SK-MES-1、人肺腺癌细胞NCI-H1299的凋亡的影响。方法:取对数生长期SK-MES-1、NCI-H1299细胞,各分为重组腺病毒(Adxsi-GFP-VP3)组、空病毒(Adxsi-GFP)组和细胞对照(磷酸盐缓冲液)组,依次记为A、B、C组。采用逆转录-聚合酶链反应和Western blot法检测A、B组细胞转染48、72 h的VP3 mRNA和Apoptin表达情况,透射电镜观察A组细胞转染72 h的超微结构变化。采用MTT法检测3组细胞转染24、48、72、96 h的细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞转染后24、48、72 h的凋亡率及细胞周期变化。结果:与B组比较,A组SK-MES-1、NCI-H1299细胞转染48 h后有VP3 mRNA表达,转染72 h后有Apoptin表达。A组转染72 h后SK-MES-1、NCI-H1299细胞均出现细胞凋亡的超微结构改变。与B、C组比较,A组SK-MES-1、NCI-H1299细胞增殖活性降低、细胞凋亡率增加,且与转染时间呈正相关;转染72 h S期的SK-MES-1、NCI-H1299细胞比例降低、G2/M期细胞比例增加。以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:Adxsi-GFP-VP3能有效诱导SK-MES-1、NCI-H1299细胞凋亡。