小白菊内酯对U-87 MG细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的考察小白菊内酯对于人脑恶性胶质瘤细胞U-87 MG细胞系的增殖、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用CCK-8比色法和克隆形成检测法检测小白菊内酯对U-87 MG的增殖抑制作用;采用碘化丙啶(PI)染色后的流式细胞仪检测小白菊内酯处理前后对细胞周期、凋亡的影响;采用q PCR以及Western blotting法研究药物处理后U-87MG细胞的Caspase 3、Bax、Cyclin D1的表达变化以及P53-Ser392蛋白质磷酸化激活。结果小白菊内酯可明显抑制U-87 MG的细胞增殖、克隆形成数量及克隆大小。处理48 h后,U-87 MG细胞的S期、G2/M期受到了阻滞,G0/G1期细胞比例明显减少,同时细胞的凋亡也明显增多。Caspase 3、Bax基因的m RNA及蛋白表达明显上升,而Cyclin D1基因的m RNA表达明显下降。同时P53-Ser392残基的磷酸化水平也明显上升。结论小白菊内酯可通过调节P53基因的Ser392残基磷酸化抑制其下游的细胞凋亡、细胞周期途径上Caspase 3、Bax、Cyclin D1的基因表达,影响细胞周期及凋亡,从而抑制肿瘤细胞的增殖。