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Mesenchymal stem cells derived from human placenta suppress allogeneic umbilical cord blood lymphocyte proliferation 被引量:36
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作者 Chang Dong LI Wei Yuan ZHANG +4 位作者 He Lian LI Xiao Xia JIANG Yi ZHANG Pei Hsien TANG Ning MAO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第7期539-547,共9页
Human placenta-derived mononuclear cells (MNC) were isolated by a Percoll density gradient and cultured in mesenchymal stem cell (MSC) maintenance medium. The homogenous layer of adherent cells exhibited a typical... Human placenta-derived mononuclear cells (MNC) were isolated by a Percoll density gradient and cultured in mesenchymal stem cell (MSC) maintenance medium. The homogenous layer of adherent cells exhibited a typical fibroblastlike morphology, a large expansive potential, and cell cycle characteristics including a subset of quiescent cells. In vitro differentiation assays showed the tripotential differentiation capacity of these cells toward adipogenic, osteogenic and chondrogenic lineages. Flow cytometry analyses and immunocytochemistry stain showed that placental MSC was a homogeneous cell population devoid of hematopoietic cells, which uniformly expressed CD29, CD44, CD73, CD105, CD166, laminin, fibronectin and vimentin while being negative for expression of CD31, CD34, CD45 and m-smooth muscle actin. Most importantly, immuno-phenotypic analyses demonstrated that these cells expressed class Ⅰ major histocompatibility complex (MHC-I), but they did not express MHC-Ⅱ molecules. Additionally these cells could suppress umbilical cord blood (UCB) lymphocytes proliferation induced by cellular or nonspecific mitogenic stimuli. This strongly implies that they may have potential application in allograft transplantation. Since placenta and UCB are homogeneous, the MSC derived from human placenta can be transplanted combined with hematopoietic stem cells (HSC) from UCB to reduce the potential graft-versus-host disease (GVHD) in recipients. 展开更多
关键词 mesenchymal stem cells human placenta umbilical cord blood immune regulation.
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Neural differentiation of human placenta-derived mesenchymal stem cells following neural cell co-culture 被引量:2
2
作者 Nailong Yang Hongyan Zhang Xiaojuan Sun Lili Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期23-28,共6页
We induced human placenta-derived mesenchymal stem cells (hPMSCs) to differentiate into neural cells by adding chemical reagents, despite the fact that toxic chemicals induce cell shrinkage or cytoskeletal formation... We induced human placenta-derived mesenchymal stem cells (hPMSCs) to differentiate into neural cells by adding chemical reagents, despite the fact that toxic chemicals induce cell shrinkage or cytoskeletal formation, which does not represent a proper cell differentiation process. The present study established a co-culture system with hPMSCs and neural cells and analyzed the influence of neural cells on hPMSC differentiation in a co-culture system, hPMSCs were isolated and purified from human full-term placenta using collagenase digestion. Fetal neural cells were co-cultured with hPMSCs for 48 hours using the Transwell co-culture system, hPMSCs co-cultured with neural cells exhibited a slender morphology with a filament. After 96 hours, hPMSCs expressed neuron-specific enolase, which suggested that co-culture of hPMSCs and neural cells induced neural differentiation of hPMSCs. 展开更多
关键词 human placenta-derived mesenchymal stem cells TRANSWELL CO-CULTURE DIFFERENTIATION neural cells
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Uric acid promotes neuronal differentiation of human placenta-derived mesenchymal stem cells in a time- and concentration-dependent manner
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作者 Nailong Yang Lili Xu +1 位作者 Peng Lin Jing Cui 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第10期756-760,共5页
Uric acid is an important, naturally occurring serum antioxidant. The present study investigates the use of uric acid for promoting proliferation and neuronal differentiation of mesenchymal stem cells derived from hum... Uric acid is an important, naturally occurring serum antioxidant. The present study investigates the use of uric acid for promoting proliferation and neuronal differentiation of mesenchymal stem cells derived from human placenta tissue. Human placenta-derived mesenchymal stem cells were pre-induced in the presence of either 0, 0.2, 0.4 or 0.8 mM uric acid in combination with 1 mM β-mercaptoethanol for 24 hours, followed by exposure to identical uric acid concentrations and 5 mM β-mercaptoethanol for 6 and 10 hours. Cells developed a neuronal-like morphology, with formation of interconnected process extensions, typical of neural cells. Immunocytochemistry and immunofluorescence staining showed neuron specific enolase positive cells were present in each group except the control group. A greater number of neuron specific enolase positive cells were observed in 0.8 mM uric acid in combination with 5 mM β-mercaptoethanol at 10 hours. After 24 hours of induction, Nissl bodies were detected in the cytoplasm of all differentiated cell groups except the control group and Nissl body numbers were greatest in human placenta-derived mesenchymal stem cells grown in the presence of 0.8 mM uric acid and 5 mM β-mercaptoethanol. These results suggest uric acid accelerates differentiation of human placenta-derived mesenchymal stem cells into neuronal-like cells in a time-and concentration-dependent manner. 展开更多
关键词 uric acid human placenta-derived mesenchymal stem cells DIFFERENTIATION neural cells
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Improvement of Atrophic Acne Scar and Skin Complexity by Combination of Aqueous Human Placenta Extract and Mesenchymal Stem Cell Mesotherapy 被引量:2
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作者 Ruchee Phonchai Pimjai Naigowit +3 位作者 Bunchob Ubonsaen Supansa Nilubol Supaluk Brameld Parinya Noisa 《Journal of Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications》 2020年第1期1-7,共7页
Atrophic scars, a permanent complication of severe acne, have negative effect on psychology in adolescent. The treatment of atrophic scar is depended on types of scar and it is difficult to improve by a single treatme... Atrophic scars, a permanent complication of severe acne, have negative effect on psychology in adolescent. The treatment of atrophic scar is depended on types of scar and it is difficult to improve by a single treatment. Mesenchymal stem cell is a scientific approval for surgery scar treatment and wound healing. We present a case report of female presented with atrophic acne scar distributed on both cheeks. The case aims to prove that the combination of MSCs and aqueous human placenta extract (RGF&#174) contained bioactive therapeutic molecules obviously promoted the improvement of skin scar to reach the optimal outcomes. We first found that MSCs-contained human placenta extract solution combination subcision improves the atrophic acne scar and skin complexity by enhancement of skin cell regeneration. 展开更多
关键词 ATROPHIC Scar mesenchymal stem cells human placenta EXTRACT MESOTHERAPY SKIN Regeneration
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Human embryonic stem cells as an in vitro model for studying developmental origins of type 2 diabetes
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作者 Andy Chun-Hang Chen Kai Fai Lee +1 位作者 William Shu Biu Yeung Yin Lau Lee 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2020年第8期761-775,共15页
The developmental origins of health and diseases(DOHaD)is a concept stating that adverse intrauterine environments contribute to the health risks of offspring.Since the theory emerged more than 30 years ago,many epide... The developmental origins of health and diseases(DOHaD)is a concept stating that adverse intrauterine environments contribute to the health risks of offspring.Since the theory emerged more than 30 years ago,many epidemiological and animal studies have confirmed that in utero exposure to environmental insults,including hyperglycemia and chemicals,increased the risk of developing noncommunicable diseases(NCDs).These NCDs include metabolic syndrome,type 2 diabetes,and complications such as diabetic cardiomyopathy.Studying the effects of different environmental insults on early embryo development would aid in understanding the underlying mechanisms by which these insults promote NCD development.Embryonic stem cells(ESCs)have also been utilized by researchers to study the DOHaD.ESCs have pluripotent characteristics and can be differentiated into almost every cell lineage;therefore,they are excellent in vitro models for studying early developmental events.More importantly,human ESCs(hESCs)are the best alternative to human embryos for research because of ethical concerns.In this review,we will discuss different maternal conditions associated with DOHaD,focusing on the complications of maternal diabetes.Next,we will review the differentiation protocols developed to generate different cell lineages from hESCs.Additionally,we will review how hESCs are utilized as a model for research into the DOHaD.The effects of environmental insults on hESC differentiation and the possible involvement of epigenetic regulation will be discussed. 展开更多
关键词 Development origins of health and diseases maternal diabetes Environmental insults Type 2 diabetes human embryonic stem cells EPIGENETICS
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胎盘间充质干细胞低氧培养液对肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:6
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作者 杜莉莉 吕润潇 +2 位作者 杨晓漪 辛娜 马廷贤 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期131-135,140,共6页
目的研究胎盘间充质干细胞(p MSCs)低氧培养液对肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的作用。方法组织块培养法提取p MSCs,流式细胞术检测表面标志,ELISA检测p MSCs常氧(21%O_2)或低氧(1%O_2)培养5 d后培养液中胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量... 目的研究胎盘间充质干细胞(p MSCs)低氧培养液对肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的作用。方法组织块培养法提取p MSCs,流式细胞术检测表面标志,ELISA检测p MSCs常氧(21%O_2)或低氧(1%O_2)培养5 d后培养液中胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量。人结肠腺癌细胞(Caco2)经100μmol/L H_2O_2处理12 h后分别培养于正常培养液、p MSCs常氧培养液或p MSCs低氧培养液,5 d后台盼蓝染色测细胞存活情况,MTT测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染测细胞凋亡。结果 p MSCs阳性表达CD29,CD44。p MSCs低氧培养液中的IGF-1明显多于p MSCs常氧培养液(P<0.05)。与p MSCs常氧培养液相比,p MSCs低氧培养液中H_2O_2处理的Caco2存活细胞多,增殖快,凋亡少(P<0.05)。向p MSCs低氧培养液中加入IGF-1抗体后,细胞增殖减慢,凋亡增多(P<0.05)。结论 p MSCs低氧培养液对H_2O_2处理的Caco2具有保护作用。机制与IGF-1促进细胞增殖、抑制凋亡相关。 展开更多
关键词 胎盘间充质干细胞 低氧 氧化应激 人结肠腺癌细胞
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γ干扰素上调人胎盘间充质干细胞PD-L1表达并增强其诱导脐血和外周血T细胞向IL-10^+T细胞的分化 被引量:9
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作者 王炜玮 李恒 +5 位作者 徐逢皇 都海波 李晓华 易君祝 王国艳 栾希英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期191-195,200,共6页
目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10^+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和流式细胞术分别检测程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在h PMSC的表达... 目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10^+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和流式细胞术分别检测程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在h PMSC的表达;Ficoll密度梯度离心法分离脐血和健康成人外周血单个核细胞,并用红细胞花环法纯化T细胞;用植物血凝素(PHA)活化T细胞并与h PMSC进行共培养,流式细胞术分别检测在阻断型PD-L1 m Ab和IFN-γ预刺激的条件下h PMSC对脐血和外周血T细胞向CD4^+IL-10^+T细胞、CD8^+IL-10^+T细胞分化的诱导作用。结果 h PMSC可诱导脐血和外周血T细胞向CD4^+IL-10^+T细胞、CD8^+IL-10^+T细胞分化,且对外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化的诱导能力明显高于对脐血T细胞向该细胞分化的诱导能力;IFN-γ预处理h PMSC后,h PMSC促进脐血和外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化能力明显增强;h PMSC高表达PD-L1,IFN-γ可明显上调其在h PMSC上的表达;阻断PD-L1在h PMSC上表达后,脐血、外周血中CD4^+IL-10^+T细胞、CD8^+IL-10^+T细胞比例均明显降低。结论 h PMSC诱导外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化的能力明显高于其诱导脐血T细胞向该细胞分化的能力。IFN-γ可通过上调PD-L1在h PMSC上的表达,增强h PMSC对脐血和外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化的诱导能力。 展开更多
关键词 胎盘间充质干细胞 程序性死亡蛋白配体1 IL-10+T细胞 γ干扰素(IFN-γ)
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人胎盘来源的两种间充质干细胞IL6、IL8、IL10和HGF表达水平的比较研究 被引量:3
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作者 朱永朝 王立斌 +3 位作者 马海滨 刘婷 李玉奎 魏军 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期5-9,共5页
目的比较人胎盘母体和胎儿来源间充质干细胞(hmPMSCs/hfPMSCs)IL6、IL8、IL10和HGF表达水平的差异。方法采用酶消化法分离人胎盘母体和胎儿侧间充质干细胞(MSCs),并利用流式细胞仪和D2S1399、D10S2325、D18S535和GATA198B05四个STR基因... 目的比较人胎盘母体和胎儿来源间充质干细胞(hmPMSCs/hfPMSCs)IL6、IL8、IL10和HGF表达水平的差异。方法采用酶消化法分离人胎盘母体和胎儿侧间充质干细胞(MSCs),并利用流式细胞仪和D2S1399、D10S2325、D18S535和GATA198B05四个STR基因座对细胞属性进行鉴定分析;通过q-PCR和ELISA分别测定hmPMSCs和hfPMSCs细胞培养上清液中IL6、IL8、IL10和HGF在基因及蛋白水平上的表达。结果所分离两种来源细胞表达MSCs表面标志分子CD73、CD90和CD105,不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR,母体来源细胞中上述四个STR位点的等位基因与母体亲本保持一致性,而胎儿侧来源细胞分别具有来自亲本双方的等位基因。hfPMSCs IL8、IL10和HGF mRNA的表达水平显著高于hmPMSC(sP<0.01),而IL6的表达水平差异无显著性。ELISA结果表明,hfPMSCs IL6、IL8和HGF蛋白表达水平显著高于hmPMSCs(P<0.01),IL10的分泌量两者无差异。结论 hmPMSCs和hfPMSCs中IL6、IL8和HGF三种细胞因子的分泌量差异存在显著性,其中hfPMSCs HGF的分泌量远高于hmPMSCs,提示hfPMSCs在免疫抑制和组织修复中可能更具临床应用潜力。 展开更多
关键词 胎盘间充质干细胞 母体来源 胎儿来源
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IFN-γ诱导的自噬抑制人胎盘胎儿侧来源间充质干细胞增殖 被引量:5
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作者 朱永朝 李芳 +4 位作者 韩飞 梁雪云 刘晓明 李玉奎 魏军 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第3期295-300,共6页
目的探讨IFN-γ诱导无血清培养人胎盘胎儿侧来源MSCs自噬的发生,并分析自噬对细胞增殖的影响。方法用酶消化法和无血清培养体系分离培养人胎盘胎儿侧来源MSCs,利用流式细胞仪和分化培养体系鉴定细胞属性;用质量浓度50μg/L的IFN-γ处理... 目的探讨IFN-γ诱导无血清培养人胎盘胎儿侧来源MSCs自噬的发生,并分析自噬对细胞增殖的影响。方法用酶消化法和无血清培养体系分离培养人胎盘胎儿侧来源MSCs,利用流式细胞仪和分化培养体系鉴定细胞属性;用质量浓度50μg/L的IFN-γ处理人胎盘胎儿侧来源MSCs,以未处理细胞作为对照组,3-Ma处理为自噬抑制组;分别提取总蛋白,Western blot检测自噬标志基因LC3Ⅰ/Ⅱ的表达;mRFP-GFP-LC3腺病毒感染细胞,观察细胞内点状聚集的情况;MTT法检测IFN-γ对细胞增殖的影响。结果所分离细胞呈CD73、CD90和CD105阳性细胞,不表达CD14、CD34和CD45,具有向脂肪和成骨细胞分化的能力;IFN-γ可提高LC3Ⅱ的表达量(P<0.05),荧光共聚焦显微境观察到IFN-γ处理细胞中的点状聚集显著增加;3-Ma可解除IFN-γ对MSCs增殖能力的抑制(P<0.05)。结论 IFN-γ诱导的自噬负调控人胎盘胎儿侧来源MSCs的增殖能力。 展开更多
关键词 人胎盘 间充质干细胞 干扰素 自噬 增殖
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人胎盘间充质干细胞及诱导的胰岛样细胞移植治疗妊娠期糖尿病大鼠效果比较 被引量:4
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作者 高珊 黄东静 +2 位作者 洪海漫 贾京桥 孟斐 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第25期3981-3987,共7页
背景:妊娠期糖尿病易对孕产妇和胎儿的健康造成严重损害,探索安全有效的妊娠期糖尿病预防和治疗手段成为妇产科学的重要研究方向之一。目的:对比人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞对妊娠期糖尿病大鼠的治疗效果,为其用于临床研究治疗妊娠... 背景:妊娠期糖尿病易对孕产妇和胎儿的健康造成严重损害,探索安全有效的妊娠期糖尿病预防和治疗手段成为妇产科学的重要研究方向之一。目的:对比人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞对妊娠期糖尿病大鼠的治疗效果,为其用于临床研究治疗妊娠期糖尿病提供理论依据。方法:在无菌条件下提取人胎盘组织中的人胎盘间充质干细胞,将其诱导分化为胰岛样细胞,采用流式细胞术检测分化过程中巢蛋白和胰岛素的表达,采用双硫腙染色法检测胰岛样细胞团中锌离子表达。将雌性SD大鼠随机分为5组:正常孕鼠组、妊娠期糖尿病鼠未干预组、妊娠期糖尿病鼠生理盐水干预组、妊娠期糖尿病鼠人胎盘间充质干细胞干预组、妊娠期糖尿病鼠胰岛样细胞干预组,每组10只。采用妊娠前喂食高糖高脂饮食和妊娠后腹腔注射链脲佐菌素的方法建立妊娠期糖尿病模型,建模成功后,尾静脉注射1 mL含6×106个人胎盘间充质干细胞或胰岛样细胞的生理盐水悬液,分别于妊娠第6,12,18天检测各组孕鼠体质量和空腹血糖,妊娠第18天检测孕鼠血清脂联素水平。结果与结论:①在人胎盘间充质干细胞诱导分化为胰岛样细胞过程中,胰岛素水平逐渐增高;巢蛋白表达水平先上升后逐渐下降;在诱导分化的第28天形成胰岛样细胞团;②人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞均能使妊娠期糖尿病鼠血糖降低,体质量升高,脂联素水平升高;妊娠第18天,与人胎盘间充质干细胞干预组相比,胰岛样细胞干预组大鼠体质量上升、血糖降低、脂联素水平升高效果更明显;③结果表明,人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞均能有效治疗妊娠期糖尿病鼠,由人胎盘间充质干细胞诱导分化的胰岛样细胞治疗效果更优。 展开更多
关键词 干细胞 胎盘间充质干细胞 胰岛样细胞 诱导分化 妊娠期糖尿病 血糖 脂联素
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人胎盘胎儿来源间充质干细胞通过下调髓样分化因子88和转化生长因子β信号通路减轻小鼠肺纤维化 被引量:2
11
作者 陶金 李庆伦 +4 位作者 马晓薇 韩飞 刘晓明 魏军 朱永朝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1347-1351,共5页
目的探讨无血清培养人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hf PMSC)对博来霉素所致小鼠肺纤维化的疗效及分子机制。方法培养并采用流式细胞术鉴定hf PMSC,取无特定病原体级雄性6周龄C57BL/6J小鼠随机分为博来霉素组、hf PMSC治疗组和阴性对照组... 目的探讨无血清培养人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hf PMSC)对博来霉素所致小鼠肺纤维化的疗效及分子机制。方法培养并采用流式细胞术鉴定hf PMSC,取无特定病原体级雄性6周龄C57BL/6J小鼠随机分为博来霉素组、hf PMSC治疗组和阴性对照组。博来霉素组和hf PMSC治疗组分别经气管内注入50μL博莱霉素(1 g/L)制备肺纤维化模型,阴性对照组经气管内注入50μL PBS。hf PMSC治疗组,在造模3 d后,经尾静脉注射200μL含5×105个hf PMSC。第21天全部处死各实验组小鼠,取肺组织进行HE染色、Masson染色以及胶原蛋白含量测定;提取各组肺组织总蛋白,Western blot法检测髓样分化因子88(My D88)、转化生长因子β(TGF-β)的表达;ELISA检测各组血清中TGF-β的浓度。结果所培养具有典型的间充质干细胞形态特征并表达表面标志分子CD73、CD90和CD105,而不表达CD14、CD34和CD45。与博来霉素组比较,HE和Masson染色显示,hf PMSC治疗组可显著性降低肺组织纤维化程度、降低肺组织胶原蛋白含量以及My D88和TGF-β蛋白水平。结论hf PMSC可通过My D88下调TGF-β的表达减轻小鼠肺纤维化。 展开更多
关键词 人胎盘 间充质干细胞 肺纤维化 髓样分化因子88(My D88) 转化生长因子β(TGF-β)
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HLA-G阳性的胎盘间充质干细胞体外诱导Treg的实验研究 被引量:3
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作者 崔桂玉 白剑 +4 位作者 苗兰英 林大勇 刘鸿 李亚丽 刘喜成 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期396-400,共5页
目的:研究HLA-G阳性的胎盘间充质干细在体外诱导Treg的产生。方法:从新生儿胎盘中分离胎盘间充质干细胞的,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到胎盘间充质干细胞中,将细胞分为空白对照组、PEGFP-N1组和PEGFP-N1-HLA-G组,每... 目的:研究HLA-G阳性的胎盘间充质干细在体外诱导Treg的产生。方法:从新生儿胎盘中分离胎盘间充质干细胞的,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到胎盘间充质干细胞中,将细胞分为空白对照组、PEGFP-N1组和PEGFP-N1-HLA-G组,每组设置5个复孔,并通过蛋白质免疫印迹检测HLA-G的表达,将鉴定后的细胞与健康人外周血中CD4^+的T淋巴细胞混合培养24 h和48 h,并检测CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占T淋巴细胞的比例。结果:PEGFP-N1-HLA-G转染后胎盘间充质干细胞可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFPN1组相比有显著性差异(P<0.01); HLA-G阳性的胎盘间充质干细胞在与CD4+的T淋巴细胞混合淋巴细胞培养24 h后,Treg细胞占全部T淋巴细胞的比例为(16.41±0.94)%,在培养48 h后,Treg细胞的占全部T淋巴细胞的比例为(16.46±0.59)%,与空白对照组和PEGFP-N1组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:HLA-G基因修饰后胎盘间充质干细胞能够有效的在体外诱导CD4^+CD25^+FoxP3^+Treg产生。 展开更多
关键词 HLA-G 胎盘间充质干细胞 T淋巴细胞 调节性T淋巴细胞
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体外分离培养胎盘多分化潜能细胞的实验研究 被引量:4
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作者 苗宗宁 祝建中 +2 位作者 黄伟 王新 张学光 《中国微循环》 北大核心 2006年第1期5-9,i0001,共6页
目的探索一种新的获取间充质干细胞(m esem chym al stem cells,MSCs)的来源及方法。MSCs在成人骨髓内含量极低,数量随着年龄的增长而减少。MSCs同时少量出现于外周血以及脐带血、胎儿组织器官内,然而,胎儿组织样本难以获取,脐带血中含... 目的探索一种新的获取间充质干细胞(m esem chym al stem cells,MSCs)的来源及方法。MSCs在成人骨髓内含量极低,数量随着年龄的增长而减少。MSCs同时少量出现于外周血以及脐带血、胎儿组织器官内,然而,胎儿组织样本难以获取,脐带血中含量太低。这样,如何获得合适的MSCs来源以建立稳定的培养体系,同时避免伦理道德问题的约束是一个值得探索的课题。方法消化胎盘实体组织,贴壁培养细胞,观测形态并检测其细胞表面抗原表达以及分化潜能。结果胎盘组织中分离出的贴壁细胞与骨髓间充质干细胞有相似形态和细胞表面标志,具有分化为成骨细胞以及神经细胞的能力。结论胎盘组织中含有的多分化潜能细胞(p lacenta-derived mu ltipotent cells,PDMCs)与骨髓MSCs形态功能相似,胎盘可以作为获取MSCs的一种有效来源。 展开更多
关键词 胎盘 胎盘多分化潜能细胞 间充质干细胞 细胞培养
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表达PEDF的人胎盘间充质干细胞抑制人脐静脉内皮细胞增殖和迁移 被引量:4
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作者 陈巧玲 白亦光 +2 位作者 肖东琴 刘康 冯刚 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第3期226-230,共5页
目的探讨携带色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)基因的腺病毒转染胎盘间充质干细胞(PMSCs)后对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的抑制作用。方法取足月产胎儿的胎盘组织,分离、培养PMSCs,用流式细胞术鉴定其表面标... 目的探讨携带色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)基因的腺病毒转染胎盘间充质干细胞(PMSCs)后对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的抑制作用。方法取足月产胎儿的胎盘组织,分离、培养PMSCs,用流式细胞术鉴定其表面标记。用携带PEDF基因的腺病毒(Ad-PEDF)转染PMSCs,并用Western blot和ELISA检测转染了Ad-PEDF的PMSCs细胞(PMSCs-PEDF)培养上清中PEDF的表达。MTT测定PMSCs-PEDF表达的PEDF对HUVECs增殖的影响。Transwell实验检测PMSCs-PEDF所表达的PEDF蛋白对HUVECs迁移的抑制作用。结果用流式细胞术对分离的PMSCs进行免疫表型分析,结果显示,CD44、CD73、CD90、CD105表达呈阳性,而CD34、CD45表达呈阴性。Western blot结果显示,重组腺病毒成功将PEDF基因传送至PMSCs细胞内并产生分泌性的PEDF蛋白。ELISA结果显示PMSCs-PEDF可并分泌高水平的PEDF至培养基中[(65.2±4.9)ng/ml]。MTT结果显示,PMSCs-PEDF培养基上清在稀释比例为1∶2时对HUVECs抑制率为56.3%±8.7%,随着稀释比例的增加抑制率逐渐降低。而PMSCs及PMSCs-null的培养基上清则对HUVECs抑制作用很弱。Transwell实验结果显示,与PMSCs组(208.8±14.7)及PMSCs-null组(199.0±20.7)相比,PMSCs-PEDF组(79.4±14.5)可显著抑制HUVECs迁移(均P<0.05)。结论 PMSCs-PEDF可在体外高效表达PEDF蛋白,并抑制HUVECs细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 胎盘间充质干细胞 人脐静脉内皮细胞 细胞增殖 细胞迁移
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人胎盘胎儿来源间充质干细胞通过旁分泌肝细胞生长因子减轻脂多糖诱导的人肺微血管内皮细胞损伤 被引量:3
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作者 陶金 夏培哲 +4 位作者 周瑜 李璐 卢震辉 杜勇 朱永朝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期109-114,共6页
目的探讨无血清培养人胎儿来源胎盘间充质干细胞(hfPMSC)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞损伤的保护作用。方法用无血清培养基培养hfPMSC,流式细胞术检测CD73、 CD90、 CD105、 CD14、 CD34、 CD45、 HLA-DR的表达... 目的探讨无血清培养人胎儿来源胎盘间充质干细胞(hfPMSC)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞损伤的保护作用。方法用无血清培养基培养hfPMSC,流式细胞术检测CD73、 CD90、 CD105、 CD14、 CD34、 CD45、 HLA-DR的表达以确定其干细胞属性;利用Transwell^(TM)共培养体系[人肺微血管内皮细胞(HPMEC)接种于Transwell^(TM)上室, hfPMSC接种于下室],检测hfPMSC旁分泌HGF对LPS处理的HPMEC通透性的影响。实验分为LPS处理组、 hfPMSC共培养组、 HGF中和抗体组、正常HPMEC对照组。在Transwell^(TM)培养上室加入100μg异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran),荧光酶标仪检测染料渗透情况; Western blot法检测渗透相关蛋白血管内皮钙黏素(VE-cadherin)和陷窝蛋白1(caveolin-1)及凋亡相关裂解型蛋白胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(c-PARP1)的蛋白水平。结果所培养细胞具备间充质干细胞形态,为CD73、 CD90、 CD105阳性及CD14、 CD34、 CD45、 HLA-DR阴性细胞;与LPS处理组相比, hfPMSC共培养可显著抑制LPS环境中HPMEC的通透性,显著上调VE-cadherin的表达水平,降低caveolin-1、 c-caspase-3和c-PARP1的蛋白水平。相反,中和共培养体系中的HGF,可逆转hfPMSC对HPMEC的上述作用。结论 hfPMSC通过分泌HGF抑制LPS诱导的HPMEC通透性增加。 展开更多
关键词 人胎儿来源胎盘间充质干细胞(hfPMSC) 人肺微血管内皮细胞(HPMEC) 脂多糖(LPS) 肝细胞生长因子(HGF) 急性肺损伤
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人胎盘间充质干细胞对呼吸道合胞病毒致毛细支气管炎大鼠肺组织视黄酸受体相关孤核受体γt基因的调控及意义 被引量:4
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作者 李得志 吴福玲 +4 位作者 高萌 李营营 石涛 韩亭亭 王海英 《中国医药》 2017年第2期216-220,共5页
目的研究人胎盘间充质干细胞(hpMSCs)对呼吸道合胞病毒(RSV)致毛细支气管炎大鼠肺组织中视黄酸受体相关孤核受体γt(RORγt)的调控及其意义。方法将36只sD幼鼠随机分为正常对照组、RSV致毛细支气管炎组(RSV组)和hpMSCs组,每组1... 目的研究人胎盘间充质干细胞(hpMSCs)对呼吸道合胞病毒(RSV)致毛细支气管炎大鼠肺组织中视黄酸受体相关孤核受体γt(RORγt)的调控及其意义。方法将36只sD幼鼠随机分为正常对照组、RSV致毛细支气管炎组(RSV组)和hpMSCs组,每组12只。RSV组和hpMSCs组均采用RSV滴鼻法建立毛细支气管炎动物模型,hpMSCs组接种病毒后向大鼠尾静脉内注射hpMSCs进行干细胞移植治疗,正常对照组不制作模型。观察3组肺组织病理学变化;应用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素17(IL-17)、IL-23的含量;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组外周血单个核细胞(PBMC)及肺组织中RORγtmRNA的水平;采用蛋白质印迹法检测3组肺组织中RORγt蛋白的表达。结果RSV组大鼠肺组织肺间质炎症明显,肺泡间隔增宽,肺泡腔变小,有大量嗜酸粒细胞、淋巴细胞浸润;与RSV组相比,hpMSCs组肺间质炎症明显减轻,肺泡腔相对增大,炎性细胞浸润减少;正常对照组大鼠肺组织无炎性改变。RSV组血浆IL-17、IL-23含量高于正常对照组[(56±6)ng/L比(27±4)ng/L、(61±5)ng/L比(19±3)ng/L](P〈0.05);hpMSCs组IL-17、IL-23含量[(30±4)ng/L、(40±6)ng/L]低于RSV组(P〈0.05)。RSV组大鼠PBMC及肺组织中RORTγt mRNA表达水平均高于正常对照组(PBMC:11.4±1.1比1.0±0.0,肺组织:8.1±0.7比1.0±0.0)(P〈0.05);hpMSCs组PBMC及肺组织中RORγtmRNA表达水平(PBMC:4.4±0.7.肺组织:3.4±0.5)均低于RSV组(均P〈0.05)。RSV组肺组织中RORγt蛋白的表达水平高于正常对照组(1.26±0.12比0.72±0.12)(P〈0.05);hpMSCs组肺组织中RORγt蛋白表达水平(0.88±0.14)低于RSV组(P〈0.05)。结论hpMSCs可以下调RSV致毛细支气管炎大鼠肺组织中特异性转录因子RORγt及相关细胞因子的表达水平,对减轻气道炎症有重要意义。 展开更多
关键词 毛细支气管炎 人胎盘间充质干细胞 呼吸道合胞病毒 视黄酸受体相关孤核受体γt
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母体来源人胎盘间充质细胞的分离培养及其分化能力的研究 被引量:2
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作者 马晓娜 刘婷 +2 位作者 金毅然 王立斌 魏军 《中国医药指南》 2013年第34期3-5,共3页
目的探讨胎盘母体来源间充质细胞的分离、培养方法及其向脂肪和成骨诱导分化潜能。方法采用酶消化获得母体来源胎盘间充质干细胞;体外扩增后,利用流式细胞仪检测其表面标志物;进行诱导分化后,采用油红O及茜素红染色鉴定其向脂肪和成骨... 目的探讨胎盘母体来源间充质细胞的分离、培养方法及其向脂肪和成骨诱导分化潜能。方法采用酶消化获得母体来源胎盘间充质干细胞;体外扩增后,利用流式细胞仪检测其表面标志物;进行诱导分化后,采用油红O及茜素红染色鉴定其向脂肪和成骨诱导分化潜能。结果体外培养的母体来源胎盘间充质干细胞呈长梭形,细胞形态均一;细胞表面标志鉴定:CD73、CD90和CD105呈阳性表达,而CD14、CD34、CD45和HLA-DR呈阴性表达;细胞诱导分化后,经油红O、茜素红染色证实其可分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论建立了母体来源胎盘间充质干细胞的分离培养方法;证实其具有成脂、成骨分化潜能,有望成为细胞治疗及组织工程更为理想的种子细胞。 展开更多
关键词 母体来源胎盘间充质细胞 脂肪细胞 成骨细胞
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HLA-G阳性的胎盘间充质干细胞对NK细胞杀伤功能的影响 被引量:2
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作者 崔桂玉 白剑 +2 位作者 苗兰英 林大勇 刘鸿 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第17期2844-2847,共4页
目的研究NK细胞对人类白细胞抗原-G(HLA-G)阳性的胎盘间充质干细胞的杀伤作用。方法从新生儿胎盘中分离胎盘间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到胎盘间充质干细胞中,并通过蛋白质免疫印鉴检测HLA-G的表达,将... 目的研究NK细胞对人类白细胞抗原-G(HLA-G)阳性的胎盘间充质干细胞的杀伤作用。方法从新生儿胎盘中分离胎盘间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到胎盘间充质干细胞中,并通过蛋白质免疫印鉴检测HLA-G的表达,将鉴定后的细胞与NK92mi混合培养4 h,检测各组细胞的溶解率。结果胎盘间充质干细胞CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;PEGFP-N1-HLA-G转染后胎盘间充质干细胞可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFP-N1组相比差异有显著性(P <0.01);与NK92mi混合培养4 h,转染PEGFP-N1-HLA-G的胎盘间充质干细胞的细胞溶解率为(51.22±3.87)%,与胎盘间充质干细胞组别差异有显著性(P <0.05)。结论 HLA-G阳性的胎盘间充质干细胞可以抑制NK细胞的杀伤功能。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原-G 胎盘间充质干细胞 自然杀伤性淋巴细胞
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体外分步诱导人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞 被引量:1
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作者 刘婷 王立斌 +5 位作者 马晓娜 朱永朝 马丽君 范恒 李玉奎 魏军 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第26期3208-3212,共5页
目的建立体外诱导人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞的分步诱导分化体系。方法分离纯化人母体来源胎盘间充质细胞,体外扩增后进行分步诱导分化,收获的胰岛素分泌细胞分别行免疫细胞化学和ELISA检测,并通过葡萄糖刺激的胰岛... 目的建立体外诱导人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞的分步诱导分化体系。方法分离纯化人母体来源胎盘间充质细胞,体外扩增后进行分步诱导分化,收获的胰岛素分泌细胞分别行免疫细胞化学和ELISA检测,并通过葡萄糖刺激的胰岛素释放试验(GSIS)评价其体外功能。结果分离纯化的人母体来源胎盘间充质细胞经培养及六步诱导分化后最终可形成胰岛素分泌细胞。免疫细胞化学检测诱导后细胞GLP-1、PDX-1和C-Peptide染色为阳性,ELISA结果显示该诱导细胞培养上清中胰岛素有较高的表达。诱导后的胰岛素分泌细胞在低糖和高糖刺激下的胰岛素释放量分别为(20.42±1.58)μIU/mL和(65.1±7.43)μI-U/mL(P<0.01)。结论通过建立体外人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞的分步诱导分化体系,获得具有一定胰岛素分泌能力的细胞,为胰岛移植的细胞来源提供了更有效的新途径。 展开更多
关键词 胎盘间充质细胞 母体来源 胰岛素分泌细胞
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胎盘间充质干细胞缺氧培养液对血管内皮细胞生物学特性的影响 被引量:2
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作者 杜莉莉 吕润潇 +3 位作者 杨晓漪 许静 于艳秋 马廷贤 《解剖学研究》 CAS 2016年第2期104-108,共5页
目的研究胎盘间充质干细胞(placenta mesenchymal stem cells,p MSCs)缺氧培养液对血管内皮细胞增殖,迁移及血管形成的影响,并探讨其机制。方法取人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),分别培养与正常培养... 目的研究胎盘间充质干细胞(placenta mesenchymal stem cells,p MSCs)缺氧培养液对血管内皮细胞增殖,迁移及血管形成的影响,并探讨其机制。方法取人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),分别培养与正常培养液,p MSCs常氧培养液,p MSCs缺氧培养液,p MSCs缺氧培养液+IGF-1Ab(Insulin-like growth factor-1 antibody,IGF-1Ab)中,台盼蓝染色检测HUVECs增殖细胞数,划痕实验检测HUVECs迁移,血管形成实验检测HUVECs血管形成情况。结果与正常培养液相比,p MSCs常氧培养液,p MSCs缺氧培养液,p MSCs缺氧培养液+IGF-1Ab中的HUVECs增殖,迁移及血管生成均加快,p MSCs缺氧培养液中HUVECs的增殖,迁移及血管生成快于p MSCs常氧培养液。向p MSCs缺氧培养液中加入IGF-1Ab后,HUVECs增殖,迁移及血管生成均减慢。结论 p MSCs缺氧培养液可促进血管内皮细胞增殖,迁移及血管生成,p MSCs缺氧培养液中增多的IGF-1(Insulin-like growth factor-1)是原因之一。 展开更多
关键词 胎盘间充质干细胞 人脐静脉内皮细胞 增殖 迁移 血管生成
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