siRNA介导垂体瘤转化基因沉默抑制人泌乳素型垂体瘤凋亡的研究

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)对人泌乳素型垂体瘤(HPA)细胞凋亡的影响。方法设计并合成针对PTTG的特异性siRNA序列,通过siPORTTM NeoFXTM转入原代培养HPA细胞,Western blot法检测siRNA作用后PTTG蛋白表达,DNA ladder和annexin V/PI染色法检测PTTG沉默对细胞凋亡的影响。结果siRNA转染组细胞内PTTG蛋白表达减弱;在CDDP诱导后,对照组和siRNA组均出现细胞凋亡,siRNA组DNA ladder形成不明显,Annexin V染色凋亡细胞数目减少,对照组细胞凋亡率为18.6%,而siRNA组仅为8.7%。结论垂体瘤转化基因对人泌乳素型垂体瘤细胞具有促进凋亡作用。

人生长激素启动子调控TNF-α表达载体的构建及体外靶向基因治疗垂体生长激素腺瘤

目的构建人生长激素启动子(hGHp)调控的基因治疗载体pSNAV2.0-hGHp-TNFα并探索其对体外垂体生长激素腺瘤的抑制作用。方法以pSNAV2.0-hGHp-EGFP和pSNAV2.0-TNFα为基础通过酶切、连接反应构建pSNAV2.0-hGHp-TNFα,用脂质体转染法验证hGHp的靶向转录活性,用ELISA检测治疗基因TNFα的表达并用MTT法检测体外TNFα基因表达对垂体生长激素腺瘤的抑制作用。结果所得质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα的测序结果正确;pSNAV2.0-hGHp-EGFP只在GH3细胞检测到绿色荧光而在对照细胞中未检测到绿色荧光;转染了pSNAV2.0-hGHp-TNFα的实验组中GH3细胞的生长较对照组明显受抑制(P<0.05)。结论首次成功构建了质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα,且其可以明显抑制体外垂体生长激素腺瘤的生长。

人脑垂体瘤染色体分析

为探讨垂体瘤及癌的发病机理与肿瘤演进过程中的细胞遗传学特征，对１５例人脑垂体瘤进行了染色体分析。实验结果表明染色体数目的分布从２４～２１０，２０％病例干系细胞为二倍体染色体，而８０％病例干系细胞为非二倍体染色体，其中亚二倍及超二倍体以上染色体病例分别为１３％和６７％。１０例人脑垂体瘤Ｇ显带核型分析，９０％病例具有２２号染色体减少及７号染色体增加，侵袭性垂体瘤７号染色体增加明显。６０％病例具有８、９号染色体的增加。提示人脑垂体瘤在病理形态学虽属良性肿瘤，而细胞遗传学却呈恶性表现。作者认为２２号染色体的丢失，７、８和９号染色体的增加，可使调控细胞增殖，分化基因缺失，癌基因活化，可能与该肿瘤的发病机理有关，７号染色体的明显增加可能为肿瘤演进中的表现。