抗人精浆蛋白McAb的制备及其特性研究

本文报道用杂交瘤技术建立了２株分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的细胞株Ｄ１和Ｃ１２。Ｄ１株分泌的抗体为ＩｇＭ，Ｃ１２株为ＩｇＧ３。这两株均能与正常人精浆和无精子症患者的精浆产生特异性免疫反应。Ｄ１株单抗具有补体依赖性制动人精子的作用，间接免疫荧光试验表明，它能结合到人精子颈部和顶体后区。这充分说明２株单抗是特异性抗人精浆的，Ｄ１是精子制动抗体，其相应的精子抗原属于精子外套抗原成分之一。

人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白制备和纯化

目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆菌落,通过制备一级及二级种液,按比例加入5L发酵罐中进行发酵,发酵过程中在菌体起始密度、诱导剂加入时机、诱导时间以及诱导温度等条件探索成熟的基础上,采用50L大型发酵罐进行批量发酵。所获菌体蛋白通过饱和硫酸铵粗提和Ni-NTA金属螯和层析获得较纯的表达产物,比较表达量,鉴定纯化后蛋白的抗原活性及生物学活性。结果:用5L及50L发酵罐能获得较高蛋白产量的大肠杆菌,经饱和硫酸铵粗提及Ni-NTA金属螯和层析纯化后可获得抗原性及生物学活性较好的抗体片段。结论:发酵罐发酵大肠杆菌,产量高,所获蛋白含量活性较稳定,为批量生产作了准备。

NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体的制备及人胚脑皮层NR2B蛋白表达的研究

目的：制备NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体，并对人胚脑皮层NR2B的表达作免疫印迹分析。方法：制备NR2BC末端934～1457氨基酸与GST的融合蛋白，并以此作为免疫原，经常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。用该抗体对不同周龄的人胚脑皮层的NR2B蛋白作免疫印迹分析。结果：本研究制备的NR2B单克隆抗体能特异地识别180kDa的NR2B蛋白，并首次发现人胚脑皮层NR2B亚单位蛋白的表达。结论：成功制备了NR2B特异的单克隆抗体；12周龄的人胚脑皮层组织已有NR2B的表达，表达量随胎龄增大而增高。

人呼吸道合胞病毒检测方法的研究进展

各年龄段人群均可能感染HRSV,5岁以下儿童、老年人和免疫功能低下人群为主要高危人群。尽管年长的儿童和成年人感染后症状相对较轻,甚至无症状,但仍可能成为潜在的病毒传播者。因此,使用高效、精准、快速的检测方法及时发现传染源,迅速阻断传播,是遏制潜在疫情传播的重要手段。然而,HRSV感染的临床表现与其他呼吸道病毒引起的急性呼吸道感染难以区分,需要依据病原学检测结果进行鉴别。本文依据检测原理总结了4类HRSV常用检测方法:抗原检测、核酸检测、抗体检测和病毒分离,并对这四类方法的优缺点,原理和适用场景等进行分析与比较,对HRSV检测方法的研究进展进行了综述和展望。

应用鸡胚分离法分离人感染H7N9禽流感病毒的研究

目的 建立人感染H7N9禽流感病毒鸡胚分离法，并用病毒分离株进行血清抗体检测。方法 用SPF鸡胚接种人感染H7N9禽流感确诊病例的呼吸道标本，培养72 h后收获羊水和尿囊液测定血凝效价（HA）。用2株病毒分离株检测福建省首例患者急性期、恢复期及密切接触者血清抗体。结果 经鸡胚盲传2代后，5例患者的咽拭子标本均分离出该病毒。第2代分离物HA滴度（1∶32～1∶256）较第1代（1∶8～1∶32）明显提高。2株病毒分离株检测感染者血清，恢复期血清HI抗体滴度较急性期升高16倍，且2株检测结果一致。结论 用鸡胚分离法分离人感染H7N9禽流感病毒敏感性高，感染者在短期内可产生高滴度的HI抗体。