Percoll离心联合多步差异黏附法分离、纯化人睾丸精原细胞

目的探讨分离、纯化人睾丸精原细胞的有效方法。方法用联合二步酶消化法获得人生殖细胞悬液,经Percoll不连续密度梯度离心,再用间隔不同时间(2、3、4h),不同次数(1、2次)差异黏附法纯化人精原细胞。结果未经纯化的精原细胞纯度为48.5%,间隔2、3、4h纯化1次所获得的精原细胞纯度分别为51.3%、59.0%、56.4%,纯度均高于未经纯化的纯度;间隔2、3、4h连续纯化2次所获精原细胞纯度分别为:57.7%、67.8%、57.8%,以间隔3h纯度最高;与间隔同样时间纯化1次精原细胞纯度相比,间隔2、3h纯化2次高于1次,间隔4h纯化2次与1次无明显差别。结论Percoll不连续密度梯度离心联合不同时间间隔差异黏附法可以有效地对人精原细胞进行分离和纯化;间隔2、3h,纯化2次高于1次;连续纯化2次时,间隔3h效果最佳。

绒毛膜促性腺激素治疗隐睾可能损伤生殖细胞的研究

目的:隐睾的治疗最初常采用人绒毛膜促性腺激素(HCG)或者促性腺激素释放激素(GnRH)的治疗方法。临床上多使用人绒毛膜促性腺激素治疗。我们就这些隐睾患儿采用人绒毛膜促性腺激素疗法是否会损伤生殖细胞进行了研究评价。方法:87名隐睾患儿随机分为单纯手术组(45例)和HCG+手术组(42例),HCG+手术组患儿在征得其父母同意前提下于手术前接受HCG治疗,单纯手术组患儿只接受手术治疗。所有患儿均行睾丸下降固定术,同时测定睾丸活检标本的曲细精管横断面精原细胞数目。两组在其他方面的情况相似。结果:单纯手术组的患儿的曲精细管断面精原细胞数目高于HCG+手术组的患儿,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);12例正常的曲细精管横断面精原细胞数目仅存在于单纯手术患儿中。结论:隐睾患儿接受人绒毛膜促性腺激素疗法可能降低生殖细胞数目。