AQP6和AQP5在人下颌下腺上的免疫组化定位

目的检测水通道蛋白亚型AQP6和AQP5在人下颌下腺的分布情况。方法对源自10例行颈淋巴清扫术患者的正常颌下腺组织,通过免疫组织化学染色方法,标记确定人下颌下腺组织中AQP6和AQP5的分布情况。结果 AQP6在部分颌下腺腺泡细胞质中表达。AQP5在浆液性腺泡和粘液性腺泡顶膜以及分泌小管均有表达,而闰管和纹状管未见表达。结论 AQP6在部分颌下腺腺泡细胞中表达,与AQP5相协调,参与唾液中水和阴离子的分泌调节。

人颌下腺腺上皮细胞体外培养及生物学特性研究

目的 建立人颌下腺腺上皮细胞的原代培养模型。方法 取口腔癌患者未受累及的颌下腺组织块 ,采用机械法和消化法 ,在 10 %血清浓度下 ,分别加入EGF、胰岛素、转铁蛋白等附加因子 ,37℃ ,5 %CO2 开放培养。选用苏木精 -伊红、PAS染色及S -P法免疫组化染色 ,扫描及透射电镜观察等方法研究其生物学性状。结果 通过特殊染色、免疫组化、电镜观察证实了体外培养细胞的腺上皮属性 ,细胞在 4d内可保持分化状态和分泌功能 ,可存活 1周以上。

成人下颌下腺微血管构筑

目的 了解成人下颌下腺微血管的构筑特点及分布规律,为下颌下腺减量移植提供解剖学依据。 方法 对摘除的正常下颌下腺进行墨汁、福尔马林灌注固定并切片,光镜下观察腺体的血管构筑的形态特点 和分布规律。结果 成人下颌下腺小叶内的纹管及腺泡周围血管网的血供主要来源于微前动脉,腺泡周围血 管网部分接受纹管周围血管网的供血,两个血管网有各自的静脉回流。在小叶内存在动—动,静—动,静—静 吻合;在小叶间导管存在动—动,静—静吻合。结论 下颌下腺的血管构筑特点为下颌下腺减量移植提供解 剖学依据,下颌下腺减量移植是可行的。

成人下颌下腺微血管分布和测量

目的探讨成人下颌下腺微血管构筑特点,为临床下颌下腺游离移植提供形态学资料。方法应用显微解剖学方法观察测量成人下颌下腺微血管构筑和分布特点。结果成人下颌下腺深浅两部位的血管密度不同,深部腺体的血管密度高于浅部腺体的血管密度。腺内血管密度排列依次为深前区、深后区、浅前区及浅后区。结论提示下颌下腺减量游离移植时,深前区、深后区为易成活的优质供腺部位。

重组2型腺病毒相关病毒体外基因转导人胚肾293细胞与人颌下腺细胞的研究

目的研究重组2型腺病毒相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype2,rAAV2)介导的β-半乳糖苷酶基因和人红细胞生成素(human erythropoietin,hEPO)基因在人胚肾293(human embryonic cell293,HEK293)细胞与人颌下腺细胞(human submandibular gland,HSG)的体外表达,为进一步的涎腺基因转导提供研究基础。方法用感染复数(multiplicity of infection,MOI)为105的携带β-半乳糖苷酶基因的腺病毒相关病毒(rAAV2LacZ)转导HEK293细胞和HSG细胞,组织化学方法检测β-半乳糖苷酶基因表达,计数转导效率。用MOI分别为103、104和105的携带hEPO基因的腺病毒相关病毒(rAAV2hEPO)转导HEK293细胞和HSG细胞,ELISA法测定hEPO含量。结果rAAV2介导的β-半乳糖苷酶基因转导HEK293与HSG后组织化学染色显示转导率分别为68·2%和66·3%。rAAV2介导的hEPO基因转导HEK293细胞与HSG细胞后,随MOI值增加和时间的延长,hEPO的浓度增高。MOI=105,转导后72h时,HEK293细胞培养基中的hEPO浓度达到482·54mU/ml,HSG细胞培养基中的hEPO浓度为458·22mU/ml。结论rAAV2载体在体外可以有效转导涎腺细胞,可以进一步应用于动物体内实验。

成人下颌下腺内NT-3的表达及意义

目的 对成人下颌下腺内NT 3进行定位研究。方法 对正常成人下颌下腺采用HE和免疫组织化学SABC染色方法。结果 成人下颌下腺导管上皮细胞呈NT 3免疫反应阳性 ,其中以纹状管最为明显。导管上皮细胞核和腺泡细胞则为阴性。结论 成人下颌下腺中有NT 3的表达 ,提示NT

人下颌下腺淋巴管、血管和腺导管的计算机三维重建技术

本文应用计算机图形学和图像处理技术,重建了人下颌下腺连续半薄切片内的淋巴管、导管、动脉和静脉等实体的三维图像,更加形象地揭示了腺体内淋巴管的立体构筑,以及与动脉、静脉、导管之间的伴行关系。

去甲基化酶腺病毒载体构建及其在人颌下腺细胞中的表达

目的构建去甲基化酶(methyl-CpG binding domain 2,MBD2)基因腺病毒载体,并观测其在人颌下腺(human submandibular gland,HSG)细胞中的表达。方法以HSG细胞总RNA为模板,RT-PCR法扩增MBD2基因全长编码序列,克隆入载体pMD18-T后,亚克隆入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体,构建pAdTrack-MBD2重组体。该重组体与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1于BJ5183菌中同源重组,产生重组腺病毒质粒Ad-MBD2,该质粒经293细胞包装,获得具有感染力的Ad/MBD2重组腺病毒颗粒,将该病毒颗粒感染HSG细胞,倒置显微镜检测转染后HSG细胞生长变化及MBD2在其中的表达等情况。图像分析法计算感染效率。RT-PCR法检测MBD2基因在该细胞中的表达变化。结果成功克隆到909 bp大小的MBD2基因,构建了其腺病毒载体Ad/MBD2,该腺病毒载体经293细胞成功包装,并获具感染力的Ad/MBD2重组腺病毒颗粒,其感染效率约70%。感染的HSG高表达MBD2。结论成功克隆到MBD2基因,构建了其重组腺病毒载体Ad/MBD2,并证实了其感染HSG细胞的有效表达。