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Clinical significance of HBME-1,Galectin-3,and CK19 expression and the status of BRAF mutation in papillary thyroid carcinoma 被引量:4
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作者 Li Zheng Min Zhao +7 位作者 Xiangyang Hu Jin Huang Ling Ang Hongguang Hu Qiang Zou Jin Wang Mingqiang Liu Yang Zhao 《Oncology and Translational Medicine》 2016年第4期174-178,共5页
Objective The aim of this study was to explore the clinical significance of the expression of proteins human bone marrow endothelial cell markers(HBME-1), Galectin-3, and cytokeratin19(CK19), as well as the status of ... Objective The aim of this study was to explore the clinical significance of the expression of proteins human bone marrow endothelial cell markers(HBME-1), Galectin-3, and cytokeratin19(CK19), as well as the status of v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1(BRAF) mutation in papillary thyroid carcinoma(PTC). Methods Immunohistochemical staining was performed in 82 specimens each of PTC and papillary benign lesions to detect the expression of HBME-1, Galectin-3, and CK19. Polymerase chain reaction(PCR) and gene sequencing were performed on 60 specimens each of PTC and papillary benign lesions to detect the status of BRAF mutation. Results The positive expression ratios of HBME-1, Galectin-3, and CK19 in PTC were 98.8%, 97.6% and 100% respectively, which were significantly higher than the expressions in papillary benign lesions(P < 0.05). No significant relationship was observed between the expression of these makers and the clinicopathological features of PTC. The sensitivity of co-expression of HBME-1 and CK19 or HBME-1 and Galectin-3 as diagnostic criteria of PTC was 99.9%, with a specificity of 95.4%. BRAF mutation was detected in 40 of 60 PTC(66.7%) specimens. There was a statistical difference in BRAF mutations between PTC and papillary benign lesions(P < 0.05); there were no associations between BRAF mutation and the clinicopathological features of PTC. Conclusion Combined immunohistochemical staining of HBME-1, Galectin-3, and CK19 can further improve the sensitivity and specificity of differential diagnosis of PTC. BRAF mutation is a significant genetic event, which may have diagnostic value for PTC. 展开更多
关键词 papillary thyroid carcinoma(PTC) human bone marrow endothelial cell markers(HBME-1 Galectin-3 cytokeratin19(CK19) v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1(BRAF)
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INTU-siRNA质粒的构建及在人甲状腺Nthy-ori-3-1细胞中的筛选
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作者 闫淑鑫 张淑静 +4 位作者 袁慧敏 孙逸卓 骈雪 孙燕 汤阳 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第6期1001-1006,1043,共7页
目的:构建人源靶向特异INTU-si RNA质粒,转染人源性甲状腺Nthy-ori-3-1细胞以构建INTU基因沉默的Nthy-ori-3-1细胞模型,为探索Graves病的发病机制提供合适的细胞模型。方法:构建四对人源INTU序列(编号分别为INTU-29、INTU-31、INTU-33、... 目的:构建人源靶向特异INTU-si RNA质粒,转染人源性甲状腺Nthy-ori-3-1细胞以构建INTU基因沉默的Nthy-ori-3-1细胞模型,为探索Graves病的发病机制提供合适的细胞模型。方法:构建四对人源INTU序列(编号分别为INTU-29、INTU-31、INTU-33、INTU-35)si RNA质粒和空载体质粒,将空载体和四对INTU-si RNA质粒分别转染Nthy-ori-3-1细胞培养24 h,通过倒置荧光显微镜观察质粒转染细胞后的荧光表达,使用多功能酶标仪检测荧光强度,通过荧光定量PCR法验证INTU基因的沉默效率,通过蛋白质免疫印迹法验证各组细胞内INTU蛋白的表达水平,筛选沉默INTU基因效率最佳的质粒。结果:空载体和INTU-si RNA质粒转染入Nthy-ori-3-1细胞24 h后,倒置荧光显微镜和荧光酶标仪检测结果显示空载体和四组INTU-si RNA组呈现绿色的荧光表达,与正常组相比,空载体与四组INTU-si RNA组的荧光强度均显著高于正常组(P<0.01),提示质粒均转染成功。荧光定量PCR结果显示,与正常组和空载体组相比,四组INTU-si RNA组的INTU基因m RNA相对表达量均显著降低(P<0.01),其中INTU-35组表达降低最显著,INTU的m RNA表达降低了61.02%。蛋白质免疫印迹法结果显示,与正常组和空载体相比,INTU-29组和INTU-31组并无显著降低,INTU-33和INTU-35组较正常组和空载体组明显下降(P<0.05,P<0.01),其中INTU-35组最佳,INTU的蛋白表达降低了44.54%。以上结果提示INTU-35组沉默INTU基因效果最佳。结论:本研究成功构建INTU-si RNA质粒,并将该质粒成功转染人源甲状腺Nthy-ori-3-1的细胞模型。INTU-si RNA甲状腺细胞模型的构建,为进一步探索Graves病的发病机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 INTU-si RNA质粒 人甲状腺nthy-ori-3-1细胞 GRAVES病
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长链非编码RNA CCAT1对人乳头状甲状腺癌侵袭和迁移能力的影响 被引量:7
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作者 刘丽云 龚健 +2 位作者 徐晋珩 张志勇 崔永兴 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第7期81-86,共6页
目的检测长链非编码RNA CCAT1在人乳头状甲状腺癌中的表达,并观察下调表达CCAT1对人乳头状甲状腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法检测人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1及人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平,在TPC-1细胞中转染CCAT1 ... 目的检测长链非编码RNA CCAT1在人乳头状甲状腺癌中的表达,并观察下调表达CCAT1对人乳头状甲状腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法检测人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1及人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平,在TPC-1细胞中转染CCAT1 siRNA质粒,利用Transwell小室及划痕实验观察下调表达CCAT1对细胞侵袭和迁移能力的影响,通过Western blot检测BRAF、MUC15、RKIP蛋白的变化。结果人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平明显高于人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1;在TPC-1细胞中下调表达CCAT1后能够明显抑制细胞的侵袭和迁移能力;Transwell侵袭实验和迁移实验显示下调表达CCAT1组TPC-1细胞的穿膜数与对照组比较明显减少。划痕实验中下调表达CCAT1后细胞间距较对照组明显增大,提示细胞运动能力减弱。同时下调表达CCAT1可明显降低细胞中BRAF、MUC15的表达,增高RKIP蛋白的表达。结论人乳头状甲状腺癌中长链非编码RNA CCAT1较正常甲状腺细胞明显升高;在乳头状甲状腺癌中下调表达CCAT1可抑制细胞的侵袭、迁移运动能力,并且可能通过影响BRAF、MUC15、RKIP蛋白的表达发挥上述功能。 展开更多
关键词 长链非编码 SIRNA CCAT1 人乳头状甲状腺癌 TPC-1 Nthy-ori 3-1 细胞侵袭 细胞迁移
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