一株罕见不携带rmpA、rmpA2的多药耐药高毒力肺炎克雷伯菌临床分离株

肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)是一种臭名昭著的机会致病菌,尤以高毒力肺炎克雷伯菌(Hypervirulent K.pneumoniae,hvKp)为重。幸运的是,多数hvKp对抗生素敏感。然而,近年来,多药耐药hvKp(multidrug-resistant hvKp,MDR-hvKp)引发病症的报告剧增,威胁着全世界人民的健康和安全。本研究报告了一例感染了不携带rmpA和rmpA2的MDR-hvKp的92岁慢性阻塞性肺疾病患者的病例。患者在住院后第8天去世。对患者痰液中分离得到的肺炎克雷伯菌21072329进行表型实验和全基因组测序,结果显示,21072329属于ST11-KL47 MDR-hvkp,该菌株对大蜡螟具有较高的致死率。同时,21072329有着较强的粘性,难以将其完全离心。21072329携带ESBL(extended spectrum beta-lactamase)基因(blaCTX-M-65,blaSHV-158,和blaTEM-1)和碳青霉烯酶基因(blaKPC-2),其对碳青霉烯类抗生素和第三代、第四代头孢菌素耐受。21072329虽具有hvKp的特征,但在其基因组中未发现rmpA和rmpA2。此外,它只携带了一种铁载体耶尔森菌素(yersinabactin)。这表明可能存在其他促进hvKp形成的高毒力因子。MDR-hvKp已经给全球医疗保健带来了巨大负担,携带未知高毒力因子的肺炎克雷伯菌则带来了新的威胁,因此迫切需要进行预防和深入研究。

宁波地区耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌的分子生物学特征研究

目的研究宁波地区耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae,CR-hvKP)分子流行特征,为宁波地区CR-hvKP院内防控及临床治疗提供理论依据。方法从宁波地区3家医院收集150株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用PCR筛选出CR-hvKP;再用PCR检测其耐药基因和毒力基因。结果150株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中检出14株CR-hvKP,占比为9.33%;主要标本类型为血流感染6株和痰液5株;临床科室分布以ICU(5株)为主,其次为呼吸科(3株)和血液科(3株)。14株CR-hvKP拉丝试验阳性,荚膜血清型以K2为主,整合子均为intI1型;碳青霉烯类耐药基因以KPC-2为主,且发现3株同时携带KPC-2和NDM-1耐药基因;14株CR-hvKP均携带rmpA、kpn、entB、wabG、ureA、fimH毒力基因,其中2株aerobactin基因阳性。结论宁波地区出现的CR-hvKP以K2荚膜型为主,耐药情况严重,且同时携带耐药及毒力基因,提示临床须合理使用抗生素,加强耐药监测及院感防控,以减少CR-hvKP的传播。

替加环素与临床常用抗生素对碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌体外联合药敏试验

目的研究替加环素与临床常用抗生素对碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent and carbapenemresistant Klebsiella pneumonia,CR-HvKP)的体外联合抗菌活性。方法收集2017~2019年河北医科大学第二医院临床分离非重复性CR-HvKP共20株。应用微量肉汤稀释法测定替加环素与5种抗生素的最低抑菌浓度(MIC),采用棋盘稀释法检测替加环素与5种抗生素(多黏菌素、头孢哌酮钠/舒巴坦钠、美罗培南、阿米卡星、磷霉素钠)的联合药敏试验。结果20株CR-HvKP主要来源于呼吸ICU 13例(65%),均为ST11型,碳青霉烯酶基因均为KPC-2型。血清型12株(60%)为K2型,为主要的血清型,1株(5%)为K1型。拉丝试验及毒力基因rmpA2均为阳性。替加环素与多黏菌素出现协同作用,百分比为60%。替加环素与美罗培南、磷霉素钠、头孢哌酮钠/舒巴坦钠均未出现协同作用。结论替加环素与多黏菌素体外联合有协同作用,可供临床作为参考治疗CR-HvKP感染。

高毒力肺炎克雷伯菌的研究进展

近年来高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)在急诊越来越常见,其起病急、毒力强、易引起转移性感染,临床危害较大,但很多医生对其认识并不充分.故本文对hvKp的流行病学、发病机制、临床特征、诊断及治疗进行综述,以期提高对这种特殊菌种的临床认识.

高毒力肺炎克雷伯菌耐药情况和分子特征研究

目的分析东莞地区高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)的耐药情况和分子特征。方法收集2018年6月至12月我院临床各种标本分离的肺炎克雷伯菌255株,应用PCR技术检测菌株荚膜血清型,并进行药敏试验。结果255株肺炎克雷伯菌菌株中,hvKP菌株80株(占31.37%),以K2型和K1型为主。除对氨苄西林天然耐药之外,hvKP对氨苄西林-舒巴坦、头孢唑啉、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星及复方新诺明的耐药率均显著低于cKP(P<0.05)。hvKP的ESBLs检出率为4.9%,显著低于cKP的27.1%(P<0.05)。结论东莞地区hvKP的血清型以K2型、K1型为主,对常用抗生素敏感,可检测出ESBLs阳性菌株,临床上可据此给予hvKP患者早期诊断和治疗,改善预后。

碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌的实验室研究及与临床转归相关危险因素分析

目的研究碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent and carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CR-HvKP)实验室检测及临床转归相关危险因素。方法回顾性研究2016年12月~2017年12月河北医科大学第二医院CR-HvKP感染患者20例,对患者临床资料进行分析,采用PCR检测毒力基因(rmpA和rmpA2)、血清型(K1和K2)以及碳青霉烯酶基因(KPC-2,NDM-1,OXA,VIM和IMP)。结果20例CR-HvKP感染患者中,毒力基因rmpA2均为阳性,拉丝试验阳性17例(85%),K2血清型16例(80%)和碳青霉烯酶基因KPC-2型18例(90%)。标本来源主要为痰/肺泡灌洗液16例(80%),治疗好转9例(45%)和治疗无效11例(55%)。患者使用气管插管辅助呼吸以及感染并发症危及生命的感染性休克治疗无效和好转比较,差异均具有统计学意义(χ^2=5.690~7.593,均P<0.05)。结论CR-HvKP感染临床治愈率低,传播性强,应引起高度重视。

高毒力肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐药性分析

目的分析高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)的临床分布、耐药基因及耐药性,以指导临床合理使用抗菌药物。方法 2014年6月—2018年9月,收集长沙医学院第一附属医院医院或社区连续分离的非重复性肺炎克雷伯菌(cKP),拉丝试验及气杆菌素基因检测以确认hvKP。VITEK-2全自动微生物分析仪对hvKP及cKP进行鉴定及药敏试验。PCR法检测产超广谱β-内酰胺(ESBLs)基因,产物测序,并进行比对分析。结果 2014年6月—2018年9月共收集到328株hvKP,其中痰标本构成比最高为48.8%,同时发现每年hvKP标本数呈递减趋势。hvKP菌株对常用抗菌药物具有较高敏感性,敏感率为89.3%～100.0%,头孢类的耐药率为5.5%～10.4%,未发现碳青霉烯类抗生素耐药的菌株。在被检测的抗菌药物中,hvKP较cKP具有更高的敏感性,差异有统计学意义(P<0.01),仅有氨苄西林/舒巴坦药敏结果中中介值时差异无统计学意义(P>0.05)。在328株hvKP菌株中blaTEM、blaSHV、blaCTX-M检出率分别为97.9%、86.0%和33.8%,其中hvKP中基因检出率最高的是blaTEM,712株cKP检出率分别为75.0%、70.1%和90.0%,且cKP检出率最高的是blaCTX-M。同时在发现hvKP中blaSHV+blaCTX-M+blaTEM为9株,占2.7%,而在cKP中未检测出有此种基因型的菌株。hvKP中的3种基因型blaTEM、blaSHV、blaCTX-M对第三代头孢类、第四代头孢类、喹诺酮类及氨基糖苷类耐药率都很低,且在cKP的耐药率相对于hvKP高出很多,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论尽管hvKP菌株对目前常用抗菌药物具有较高的敏感性,但是高产ESBLs菌株的出现应该引起临床高度重视。

Tn-seq法筛选高毒力肺炎克雷伯菌新毒力基因

目的建立转座子突变文库,筛选高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKp)的新毒力基因。方法构建转座子突变文库,血清处理,通过转座子测序(transposon sequencing,Tn-seq)比较分析血清处理前后各基因突变株在文库中丰度变化,并对筛选出的基因进行KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)注释和富集分析。结果以处理后丰度低于初始丰度20%为界,共筛选出405个基因,其中351个基因在HS11286、NJST258_1、NTUH-K2044和RJF293等4株参考菌株中保守存在,占86.7%,10个基因为NTUH-K2044和RJF293两株高毒力株共有而低毒力株HS11286和NJST258_1缺失;荚膜多糖基因簇中基因如糖基转移酶基因wzy、聚集蛋白基因wzi、荚膜转运蛋白基因wza等突变株在血清处理后不能检出,气杆菌素、沙门氏菌素等铁载体基因簇在各文库中的丰度变化不超过1倍;KEGG注释结果显示,注释最多的基因为参与氨基酸代谢、辅助因子和维生素代谢、碳水化合物代谢等。结论Tn-seq是功能基因筛选的可靠方法,本研究成功筛选出405个hvKp的候选新毒力基因,为后续深入研究hvKp的新毒力基因功能和调控机制提供实验依据。