肝细胞癌及癌旁肝组织EGFR和EGFR vⅢ的表达及其临床意义

【目的】检测人体肝癌组织及癌旁肝组织中表皮生长因子受体EGFR及其突变体EGFRvⅢ的表达情况,并分析其临床意义。【方法】用免疫组化法检测58例肝细胞癌患者肿瘤及癌旁肝组织中EGFR、EGFRvⅢ的表达情况,与患者的临床资料进行相关分析,同时对EGFR和EGFRvⅢ不同表达的患者无瘤生存期和总生存期进行生存分析。【结果】肝癌组织EGFR、EGFRvⅢ表达的阳性率分别为74.1%、63.8%;癌旁肝组织EGFR、EGFRvⅢ表达阳性率分别为81.0%、77.6%。肝癌组织EGFRvⅢ的表达情况与肿瘤病理分级(P=0.028)及术前AFP值(P=0.035)呈负相关。癌栓及/或卫星灶(P<0.001)和肿瘤病理分级(P=0.023)是肝癌术后无瘤生存期的主要影响因素;肝癌患者术后总生存期的主要影响因素包括患者的肿瘤家族史(P=0.014)、肿瘤最大径(P<0.001)、癌栓及/或卫星灶(P=0.039)以及肿瘤的病理分级(P=0.002)。生存分析显示肝癌组织EGFR及EGFRvⅢ表达阴性的患者与表达阳性的患者无瘤生存率及总生存率均无明显差异。【结论】肝细胞癌患者肿瘤组织及癌旁肝组织中均存在EGFR以及EGFRvⅢ高表达,EGFR以及EGFRvⅢ过度表达可能是肝癌发生过程中的事件。肝癌组织EGFRvⅢ的表达情况与肿瘤病理分级及术前AFP值呈负相关,肝癌组织EGFR及EGFRvⅢ的表达情况不是肝癌预后的独立影响因素。

纳米磁流体介导的重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα对肝癌细胞HepG2的体外杀伤作用

目的探讨纳米磁流体作为肝癌基因治疗载体的可行性及AFP增强子能否使外来基因在AFP阳性细胞内高表达。方法构建重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性的宫颈癌细胞Hela。转染12h后,于荧光显微镜下动态观察;48h后,RT-PCR和Westernblot分析HepG2细胞中hTNFα基因的表达情况,用MTT法检测HepG2细胞的存活,用流式细胞分析HepG2细胞的凋亡。结果纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转入HepG2细胞,并且其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Westernblot证明转染的HepG2细胞有hTNFα基因的表达;MTT及流式细胞分析说明hTNFα基因发挥杀伤细胞作用。结论纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体。采用AFP增强子可使目的基因在HepG2细胞中定向而特异性表达。

不同肝功能患者肝移植术中血糖、胰岛素和胰高血糖素的变化及相关性

目的观察不同肝功能患者行肝移植术中血糖、胰岛素、胰高血糖素的变化及其相关性。方法终末期肝病拟行肝移植患者30例,按Child分级分为A、B、C组、每组10例,静脉吸入复合全身麻醉下行改良背驮式肝移植。于麻醉前、无肝前期、无肝期25min,下腔静脉开放后5、30、60min、手术结束时采集动脉血测定血糖(BG)、血胰岛素和胰高血糖素。结果肝移植术中血糖、胰岛素、胰高血糖素变化显著,患者术中血糖、胰岛素、胰高血糖素在组内差异有显著性(P>0.01),组间随着Child分级增加可见血糖、胰岛素、胰高血糖素增高,但只有胰高血糖素变化在组间差异有显著性(P<0.01)。术前及无肝前期胰岛素水平和血糖水平呈正相关,r=0.542P<0.01;新肝期(新肝5、30、60及术毕)胰岛素水平和血糖水平无相关,r=0.171P=0.06。结论肝移植围术期血糖、胰岛素及胰高血糖素变化显著,肝功能ChildB级以上患者术前常伴有胰岛素血症及胰高血糖素血症,高胰高血糖素血症在重症肝炎患者肝移植围术期有重要意义。

山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病大鼠糖脂代谢作用的研究

目的:观察山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠糖脂代谢的影响。方法:用高脂饲料诱导建立大鼠NAFLD模型,分为正常组、模型组、阳性药物对照组、山楂叶提取物组、自然恢复组和节食组,观察各组大鼠血清中甘油三酯(TC),总胆固醇(TG),游离脂肪酸(FFA),脂蛋白酯酶(LPL)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(INS)和胰岛素抵抗指数(IRI)以及大鼠肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA的表达情况及其肝组织病理学改变情况。结果:与模型组和自然恢复组相比,山楂叶提取物组大鼠体重明显降低,血清TC、FFA、FPG、INS、IRI明显降低(P<0.05),同时LPL升高以及PPARαmRNA表达量升高亦有统计学意义(P<0.05)。结论:山楂叶提取物能够改善NAFLD大鼠的糖脂代谢异常,这可能与提高LPL的含量和增加PPARαmRNA表达有关。

索拉非尼联合TACE术治疗中晚期肝细胞癌的临床疗效分析

目的探讨索拉非尼联合TACE术治疗中晚期肝细胞癌的临床疗效。方法根据治疗方法不同将97例中晚期肝细胞癌患者分为实验组(47例)和对照组(50例),对照组患者给予单纯TACE术治疗,实验组患者在此基础上加用索拉非尼治疗,比较两组患者近期疗效和远期疗效。结果实验组患者疗程结束后总有效率明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.05);实验组患者治疗后血清VEGF水平明显低于对照组,差异具有显著性(P<0.05);实验组患者手足反应、腹泻、皮疹/脱皮以及高血压发生率及严重程度均明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.05);两组患者乏力、消化道反应、脱发、骨髓抑制和肝功能异常发生率及严重程度比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组患者2年生存率及中位生存期明显优于对照组,差异具有显著性(P<0.05)。结论索拉非尼能够有效提高TACE术的近期疗效和远期生存率,但会明显增加患者手足反应、腹泻、皮疹/脱皮以及高血压等不良反应发生率,可作为中晚期肝细胞癌治疗的优选方案,但需注意预防不良反应。

地塞米松对大鼠肝脏微粒体细胞色素P-450的诱导效应

目的:观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对细胞色素P-450(cytochrome P450,CYP450)的诱导效应,并探讨其诱导机制。方法:雄性Wistar大鼠分别以DEX 0,25,50和100mg·kg^(-1)·d^(-1)诱导处理(ip)4d后,测定大鼠肝脏总CYP450含量,CYP3A1,CYP3A2和CYP2B1/2的mRNA及蛋白的表达水平,肝脏ERD(CYP3A活性),PROD(CYP2B活性)和BROD(总CYP450活性)。结果:CYP450含量、ERD、PROD和BROD活性在DEX多次诱导后都有升高。CYP3A1 mRNA表达水平、蛋白含量和酶活性有明显的升高,剂量效应关系明显;CYP3A2蛋白明显升高,但mRNA表达水平却无明显变化。PROD和CYP2B1/2的mRNA表达水平以及总CYP450含量均在50mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量组达到最高值。结论:DEX对雄性大鼠主要诱导CYP3A1和CYP3A2两个CYP450成员表达上调,对CYP2B1/2也有一定的诱导作用,其诱导作用主要表现在酶活性、酶蛋白含量和mRNA表达水平的升高。CYP3A1和CYP3A2的诱导方式可能不同。

原位灌洗联合快速切取腹腔器官的临床应用(附56例报告)

[目的]探讨原位灌洗多器官联合快速切取的改进技术。[方法]沿腹主动脉插管灌注HC-A液,经肠系膜上静脉外科干向门静脉插管灌注UW液,取56例供体。[结果]应用该技术共获取肝脏56个,肾脏112个。热缺血时间平均为(3.0±1.5)min,肝、肾切取时间平均为(18±5.0)min。同时行2例胰肾联合移植,与心胸外科合作完成心脏切取6例、肺脏1例。进行的移植手术未出现肝脏、肾脏的灌注不良及移植物原发无功能。[结论]改进的原位灌洗多器官联合快速切取的技术方法的优点为保证器官充分灌注、减少污染、保护变异动脉、解剖固定,入路简便,减少热缺血时间、节约费用。

HSP70、GPC3、GS和AKR1B10在肝脏高度异型增生结节免疫组化诊断中的应用

目的探讨免疫组化标志物热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)、谷氨酰胺酶(glutamine synthetase,GS)和正醛酮还原酶家族中单分子醛糖还原酶(aldo-ketoreductase family 1 member B10,AKR1B10)在肝脏高度异型增生结节(high-grade dysplastic nodule,HGDN)和高分化小肝细胞癌(well-differentiated small hepatocellular carcinoma,WD-SHCC)中的表达特点及鉴别诊断价值。方法对16例单结节型HGDN和32例WD-SHCC进行HSP70、GPC3、GS和AKR1B10免疫组化染色。结果 4项标志物在HGDN与WD-SHCC组织中均可表达,单项标志物中,HSP70在HGDN与WD-SHCC中阳性率最高(31.25%,81.25%,P<0.001);GPC3在HGDN与WD-SHCC中阳性率最低(12.50%,25.00%,P<0.460)。HSP70+GPC3+GS及HSP70+AKR1B10+GS诊断组合均在3项标志物中至少2项阳性时,获取最佳诊断效果,此时诊断敏感性和准确率分别为62.50%、81.25%和70.83%、83.33%,特异性均为87.50%。结论HSP70、GPC3和GS经典免疫组化诊断谱对HGDN和WD-SHCC组织具有一定的鉴别能力。然而,GPC3在WD-SHCC中阳性率较低,表达水平与HGDN无明显差异,制约该谱的整体诊断效果。AKR1B10替代GPC3后,在维持较高特异性一致的同时,可明显提高诊断敏感性和准确率。

中药复肝解毒冲剂对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

目的:探讨中药复肝解毒冲剂对CCL4诱导急性肝损伤大鼠的的疗效及可能作用机制。方法:Wistar雄性大鼠分组后,复肝解毒冲剂低、中、高剂量和联苯双酯组连续给药7天。所有大鼠,除正常组外,以CCL4腹腔注射。24h后检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酸氨基转移酶(ALT)的活性及肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与正常组比较,模型组血清AST、ALT及肝匀浆MDA明显增高,肝匀浆GSH和SOD明显降低(P<0.01);与模型组比较,联苯双酯组和复肝解毒冲剂大、中剂量组血清AST、ALT和肝匀浆MDA降低,肝匀浆GSH、SOD升高(P<0.01或P<0.05);小剂量组血清AST、ALT和肝匀浆GSH升高不明显,但肝匀浆MDA降低、SOD升高(P<0.05)。结论:复肝解毒冲剂对CCL4致大鼠急性肝损伤具有明显的防治作用。

不同肝癌肝移植标准对于肝癌切除术后复发补救性肝脏移植有效性的评价

目的评价米兰标准、UCSF标准、Up-to-seven标准作为肝癌切除术后复发补救性肝移植适应症选择标准的有效性。方法回顾性分析本治疗组自1999年6月至2011年6月间实施的724例肝癌肝脏移植病例数据,其中包括107例肝癌切除术后复发行补救性肝移植术病例,对不同选择标准在各组病例的生存率进行统计分析。结果对于首选肝脏移植患者米兰标准、UCSF标准、Up-to-seven标准具有良好的一致性,5年生存率分别为76.2%,75.5%,73.4%。对于补救性肝脏移植,米兰标准、UCSF标准具有与首选肝脏移植一致的有效性,受者术后5年生存率分别83.1%,72.6%;而Up-to-seven标准则不具有一致的有效性,符合该标准的补救性肝脏移植受者5年生存率仅为49.9%,不符合Up-to-seven标准补救性肝脏移植受者的5年生存率为49.4%,二者无统计学差异。结论米兰标准、UCSF标准对于肝癌切除术后复发补救性肝移植适应症的选择具有较好的有效性,Up-to-seven标准有效性则较低;对于补救性肝癌肝移植应进行三维变量的标准选择,包括首次肝切除时肝癌数据、补救性肝脏移植评估时复发肝癌数据以及肝癌切除术后复发的时间间隔。

制首乌对肾阳虚、肾阴虚证大鼠肝线粒体COX及mPTP开放的影响

目的:探讨制首乌对肾阳虚、肾阴虚证大鼠肝线粒体COX及mPTP开放的影响。方法:将90只SD大鼠随机分成9组,即空白组、肾阳虚模型对照组、肾阳虚高、中、低剂量组、肾阴虚模型对照组、肾阴虚高、中、低剂量组,每组10只。空白组予生理盐水。肾阳虚造模给予皮下注射氢化可的松,25 mg/kg,1次/d,连续14 d,肾阴虚造模在肾阳虚证大鼠开始造模后第8天,开始腹腔注射氢化可的松,50 mg/kg,1次/d,连续7 d。肾阳、阴虚造模后模型对照组予生理盐水,其余高、中、低剂量组分别给予制首乌高(24 g/kg)、中(12 g/kg)、低剂量(6 g/kg)灌胃3个月,提取肝线粒体,测定COX活力及mPTP开放。结果:肾阴虚证大鼠肝线粒体COX活力增强,PTP通透性减小。结论:制首乌肝毒性成分可能在肾阴虚证大鼠体内毒性减弱。

临床药师参与1例药物性肝损害患者的药物分析与调整

目的为临床药师在肾内科参与药物性肝损害患者的治疗提供参考。方法临床药师参与1例药物性肝损害患者的药物治疗方案的分析与调整,充分考虑患者年龄、肾病综合征伴低钾血症、血行播散型肺结核的特点,建议医师停用可疑药物,调整保肝药物。结果临床药师结合患者特点,从药物相互作用及不良反应方面,积极配合医师,为患者提供了合理的用药方案。经治疗后,患者肝功能得以恢复。结论肾内科临床药师参与临床实践,可从药学的角度发挥优势,优化治疗方案。

非酒精性脂肪性肝炎患者血清肝纤维化指标观察

目的:了解非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的CT分离与血清肝纤维化水平的关系。方法:59例NASH按CT诊断标准分为轻度29例、中度18例、重度12例,分别将三组的肝纤维化指标(HA、LN、ⅣC及PCⅢ)进行比较,并与对照组(31例)进行比较。结果:NASH组肝纤维化指标明显高于健康对照组;重度NASH组各项肝纤维化指标均明显高于轻度及中度NASH组。结论:重度NASH患者存在一定程度的肝纤维化。

补肾强筋胶囊治疗围绝经期及绝经后期膝骨性关节炎临床研究

目的:比较补肾强筋胶囊治疗围绝经期及绝经后期膝骨性关节炎的临床疗效。方法:选择2014年1月—2015年9月就诊于本院骨科门诊的围绝经期膝骨性关节炎76例为观察组A,绝经后期膝骨性关节炎95例为观察组B,两组患者均采用补肾强筋胶囊治疗,比较两组患者治疗前后关节活动范围、VAS评分的改善情况,以及不同证型的疗效情况。结果:两组患者治疗前后活动范围、各VAS评分比较,均有显著性差异(P<0.05);但两组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中医证候疗效结果显示,同组患者肝肾亏虚证、瘀血闭阻证之间比较,均无显著差异(P>0.05),两证型均显著优于风寒湿痹证(P<0.05)。结论:补肾强筋胶囊对围绝经期、绝经后期膝骨性关节炎肝肾亏虚证、瘀血闭阻证有良好的疗效。

瘤内注射奥曲肽对大鼠移植性肝肿瘤PCNA表达的影响

目的:探讨奥曲肽瘤内注射对大鼠移植性肝肿瘤PCNA表达的影响。方法:30只大鼠移植性肝肿瘤模型随机分为奥曲肽组、盐水组、酒精组三组,分别瘤内注射奥曲肽0.02mg、生理盐水0.2mL、无水酒精0.2mL,3d及8d后分别测定肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:治疗3d后,奥曲肽组的PCNA表达低于无水酒精组和生理盐水组的表达(P<0.05)。8d后,奥曲肽组的PCNA表达明显低于无水酒精组和生理盐水组的水平(P<0.05)。结论:瘤内注射奥曲肽可抑制大鼠移植性肝肿瘤的生长。

山豆根不同提取部位的毒性作用研究

目的明确山豆根的主要毒性部位。方法制备山豆根水煎液,过大孔吸附树脂进行分离,得到水洗部位、生物碱部位和非生物碱部位(主要包括黄酮类和皂苷类)。斑马鱼急性毒性实验被用于评价山豆根不同提取部位的毒性大小。此外,通过MTT法检测不同提取部位给药24 h对Hep G2细胞活力的影响并计算半数抑制浓度(IC50);LDH释放检测试剂盒检测细胞膜损伤程度;Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞术检测细胞凋亡。结果斑马鱼急性毒性实验结果提示非生物碱部位为山豆根主要毒性部位。MTT法结果也显示非生物碱部位对Hep G2细胞活力的抑制作用最强;非生物碱部位可以引起Hep G2细胞膜损伤,在2 g·L-1细胞损伤率达到67.31%;非生物碱部位(2 g·L-1)给药24 h引起的Hep G2细胞凋亡显著高于对照组(P<0.05)。结论山豆根非生物碱部位可能为山豆根主要毒性部位,非生物碱部位可能通过诱导细胞膜损伤和凋亡从而影响细胞活力。

补肾活血调肝治疗多囊卵巢综合征无排卵性不孕证临床研究

目的:探讨中医补肾活血调肝治疗多囊卵巢综合征PCOS无排卵性不孕证临床研究。方法:将60例PCOS无排卵性不孕证者随机分为治疗组、对照组各30例。治疗组予以自拟中药补肾活血调肝汤;对照组以口服氯米芬治疗。观察治疗前及治疗停药后3个月、6个月患者体内相关的激素及临床症状体征的变化。结果:停药后治疗组患者的总有效率优于对照组;停药后3个月两组患者的激素水平、卵巢体积、排卵率、受孕率、月经情况较治疗前明显改善;停药6个月对照组又回到治疗前的水平;而治疗组的激素水平、卵巢体积、排卵率、受孕率、月经情况仍保持较好的状态。结论:中医补肾活血调肝治疗肾虚肝郁型PCOS无排卵性不孕证近远期疗效优于对照组。

血缘性活体肝部分移植治疗先天性胆道闭锁

目的:探讨活体肝移植治疗儿童先天性胆道闭锁的临床体会。方法:受者为14个月男童,诊断为先天性胆道闭锁症,供者为患儿的父亲,术中切取供者肝脏的左外侧叶,原位移植给患儿。结果:供肝左外侧叶切取手术历时485min,术中出血200mL,无输血,切取肝脏265g,供者术后5d肝功能恢复正常。受者手术历时420min,术中失血400mL,肝脏冷缺血时间30min,无肝期60min,采用改良背驮式肝移植,术中使用IL-2R拮抗剂免疫诱导治疗,术后FK506、骁悉及甲基强的松龙(甲强龙)免疫抑制治疗,术后1个月各项生化指标正常,随访9个月,生长发育正常,无外科并发症。结论:活体肝部分移植应确保供者的安全,充分评估供、受者术前情况,术中良好的肝外科、血管外科技术及围手术期管理是确保活体肝移植术成功的关键。

雷氏丹参片联合辛伐他汀治疗高胆固醇血症对肝功能的影响

目的:观察雷氏丹参片联合辛伐他汀治疗高胆固醇血症患者对肝功能的影响。方法:高胆固醇血症患者随机分为辛伐他汀组(n=20例)和雷氏丹参片联合辛伐他汀组(联合治疗组,n=20例),疗程3个月。治疗前后分别检测血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)、AST、ALT和CPK。结果:两组血脂水平均较治疗前显著改善,且两组间无差异(P>0.05)。辛伐他汀组AST和ALT较治疗前有增高趋势,但无统计学差异(P>0.05);联合治疗组AST和ALT较治疗前有降低趋势,但无统计学差异(P>0.05),而两组间有差异(P<0.05)。两组及组间CPK无显著差异(P>0.05)。结论:雷氏丹参片联合辛伐他汀可降低降脂治疗对肝的损伤作用,具有保肝降酶,可作为临床上降脂治疗的辅助用药。