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曲古菌素A对视网膜母细胞瘤Hxo-rb44细胞凋亡及Sur-vivin、c-Myc表达的影响
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作者 王国军 胡燕华 +1 位作者 李鹏程 徐茜 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第2期324-326,共3页
目的探讨曲古菌素A(TSA)对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株Hxo-rb44细胞凋亡和Survivin、c-Myc表达的影响。方法将人Rb细胞株Hxo-rb44进行培养传代,流式细胞仪检测不同浓度的TSA作用不同时间对Hxo-rb44细胞周期和凋亡的影响,用Westernblot... 目的探讨曲古菌素A(TSA)对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株Hxo-rb44细胞凋亡和Survivin、c-Myc表达的影响。方法将人Rb细胞株Hxo-rb44进行培养传代,流式细胞仪检测不同浓度的TSA作用不同时间对Hxo-rb44细胞周期和凋亡的影响,用Westernblot法检测凋亡过程中Survivin和c-Myc蛋白表达的变化。结果TSA可明显诱导细胞发生G2期阻滞及细胞凋亡,而且与药物作用时间呈依赖关系(r=0.97,P=0.02);Westernblot法可以观察到Survivin和c-Myc的表达水平随着TSA作用时间的延长而下降(P均<0.01)。结论TSA可以有效诱导人Rb细胞株Hxo-rb44细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制与抑制Survivin和c-Myc表达有关。 展开更多
关键词 曲古菌素A 视网膜母细胞 hxo—rb44细胞 细胞周期阻滞 凋亡 Survivin、c-Myc
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KAI1对HXO—Rb44细胞同质性黏附、迁移和侵袭能力的影响
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作者 闫慧 季迅达 赵培泉 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS 2012年第4期212-216,共5页
目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对人视网膜母细胞瘤HXO.Rb44细胞黏附力、运动力和侵袭力的影响。方法实验研究。应用脂质体转染法将含KAI1的真核表达质粒pCMV—KAI1转染人HXO—Rb44细胞株,命名为HXO—Rb44-KAI1,使其KAI1蛋白过表达。... 目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对人视网膜母细胞瘤HXO.Rb44细胞黏附力、运动力和侵袭力的影响。方法实验研究。应用脂质体转染法将含KAI1的真核表达质粒pCMV—KAI1转染人HXO—Rb44细胞株,命名为HXO—Rb44-KAI1,使其KAI1蛋白过表达。以转染空载体质粒pcDNA3.1(+)及未转染质粒的HXO—Rb44细胞作为对照,分别命名为HXO—Rb44.KAI1/zero及HXO—Rb44。质粒转染48h后,吹散细胞,显微镜下观察三组细胞的同质性黏附情况;应用Transwell小室及其联合Matrigel分别进行迁移和侵袭实验。100倍光镜下观察进入Transwell下室的细胞并随机选取5个视野进行细胞计数,采单因素方差分析对三组细胞的迁移和侵袭能力进行比较。结果质粒转染48h后,PCR及WesternBlot显示HX0-Rb44-KAI1细胞的KAI1表达明显强于HXO-Rb44-KAI1/zero及HXO—Rb44细胞。HXO—Rb44-KAI1细胞的同质性黏附力明显强于HXO-Rb44-KAI1/zero及HXO—Rb44细胞。Transwell迁移实验显示,100倍镜下下室中平均每视野细胞数,HXO—Rb44-KAI1组为(20.4±4.0)个,HXO-Rb44-KAI1/zero组为(46.0±4.5)个,HXO-Rb44组为(52.1±3.6)个,差异有统计学意义(F=256.71,P〈0.01)。侵袭实验显示100倍镜下下室中平均每视野细胞数,HXO—Rb44-KAI1组为(16.7±3.3)个,HXO—Rb4J4.KAI1/zero组为(42.5±3.7)个,HXO—Rb44组为(47.3±5.2)个,差异有统计学意义(F=235.12.P〈0.01)。结论KAI1可显著增强HXO—Rb44细胞同质性黏附力,抑制其运动力和侵袭力。 展开更多
关键词 KAI1 视网膜母细胞 hxo—rb44 细胞黏附 细胞运动 细胞浸润
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纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP对Rb44细胞凋亡的影响
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作者 郭慧丽 张明昌 +2 位作者 郑乃刚 吴景兰 王爱凤 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第3期393-395,共3页
目的:探讨纳米脂质体槲皮素(nLQ)和8-Br-cAMP(Br)对人视网膜母细胞瘤Rb44细胞凋亡和p53、p21waf1mRNA表达及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。方法:Rb44细胞分为4组:nLQ组给予终浓度为40μmol/LnLQ;Br组给予终浓度为2×10-5mol... 目的:探讨纳米脂质体槲皮素(nLQ)和8-Br-cAMP(Br)对人视网膜母细胞瘤Rb44细胞凋亡和p53、p21waf1mRNA表达及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。方法:Rb44细胞分为4组:nLQ组给予终浓度为40μmol/LnLQ;Br组给予终浓度为2×10-5mol/LBr,联合用药组给予同上浓度的nLQ和Br,对照组不给药。采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡率。采用原位杂交技术检测p53、p21waf1mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,单用nLQ或Br均可增高凋亡率,上调p53和p21waf1mRNA的表达及Bax和Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达(P<0.001);nLQ及Br联用呈现协同效应(P<0.001)。结论:nLQ和8-Br-cAMP可能通过上调p53和p21waf1基因的表达,诱导线粒体途径和Caspase-3的最终共同凋亡途径而诱导Rb44细胞趋向凋亡,且两药联用呈现协同效应。 展开更多
关键词 凋亡 纳米脂质体槲皮素 8-BR-CAMP rb44细胞
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纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP诱导人Rb44细胞恶性逆转化效应
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作者 郭慧丽 张明昌 +2 位作者 李宝华 李金萍 吴景兰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第7期633-636,643,共5页
目的纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)可抑制PI3K/AKt信号途径,8-Br-cAMP为PKAII型激动剂,探讨二者协同诱导人视网膜母细胞瘤(retinoblasto-ma,Rb)44细胞的恶性逆转化效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:(1)加纳米脂质体... 目的纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)可抑制PI3K/AKt信号途径,8-Br-cAMP为PKAII型激动剂,探讨二者协同诱导人视网膜母细胞瘤(retinoblasto-ma,Rb)44细胞的恶性逆转化效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:(1)加纳米脂质体槲皮素(终浓度为40μmol.L-1)组(nLQ组);(2)加8-Br-cAMP(终浓度为20μmol.L-1)组(Br组);(3)联合药物组(nLQ+Br组);(4)不加药物培养的对照组。以MTT实验检测培养的各组Rb44细胞生长抑制率,采用免疫细胞化学和蛋白质免疫斑点印迹检测PTEN、cyclinD1、c-myc、p21waf1、MMP9及VEGF的表达,原位杂交技术检测p16、Rb抑癌基因的表达。结果 MTT实验显示联合药物组的细胞生长抑制率显著高于任何单个药物组。与对照组相比,nLQ和8-Br-cAMP组明显抑制培养的Rb44细胞的生长,并呈现协同抑制效应。免疫细胞化学及蛋白质免疫斑点印迹显示:与对照组相比,cyclinD1、c-myc、MMP9、VEGF的表达下调,PTEN、p21waf1表达上调。原位杂交显示:与对照组相比,药物组的p16及Rb抑癌基因的表达上调。结论 nLQ或8-Br-cAMP可诱导人Rb44细胞恶性逆转化,且呈协同效应。 展开更多
关键词 恶性逆转化 纳米脂质体槲皮素 8-BR-CAMP rb44细胞
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纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP对人Rb44细胞组蛋白脱乙酰化酶抑制效应的探讨
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作者 郭慧丽 王予伟 +1 位作者 郑乃刚 吴景兰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第12期1110-1112,共3页
目的探讨纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)联合8-Br-cAMP对培养的人Rb44细胞组蛋白脱乙酰化酶的抑制效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:nLQ组,以40μmol·L-1nLQ培养;8-Br-cAMP组:以20μmol·L-18-Br-cAMP培养;n... 目的探讨纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)联合8-Br-cAMP对培养的人Rb44细胞组蛋白脱乙酰化酶的抑制效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:nLQ组,以40μmol·L-1nLQ培养;8-Br-cAMP组:以20μmol·L-18-Br-cAMP培养;nLQ+8-Br-cAMP组;以40μmol·L-1nLQ和20μmol·L-18-Br-cAMP共培养;对照组:不加nLQ或8-Br-cAMP。应用MTT实验检测细胞生长抑制率(GSR)。应用免疫斑点印迹检氉测脱乙酰化酶抑制物、NF-κBp65、磷酸化IκBα及c-myc的表达。对表达的靶信号以图像分析仪扫描灰度值。结果与对照组相比,nLQ组和8-Br-cAMP组GSR达44%±1%和40%±1%,均为P<0.05;nLQ+8-Br-cAMP组GSR达60%±1%,P<0.01。nLQ组、8-Br-cAMP组、nLQ+8-Br-cAMP组与对照组相比,脱乙酰化酶抑制物、NF-κBp65及c-myc的表达均减低,均为P<0.05;而磷酸化IκBα的表达均增强,均为P<0.05。结论 nLQ联合8-Br-cAMP可下调脱乙酰化酶抑制物表达,上调磷酸化IκBα的表达同时可抑制NF-κBp65的表达。 展开更多
关键词 组蛋白脱乙酰化酶 纳米脂质体槲皮素 8-Br—cAMP rb44细胞
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Rb蛋白在胶质瘤细胞凋亡中的表达
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作者 张荣 周良辅 +3 位作者 周范民 王晨 王宇倩 顾建新 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第2期102-104,共3页
目的 研究抑癌基因Rb在人胶质瘤SHG 44细胞调亡前后的表达情况。方法 利用N端Rb蛋白单克隆抗体通过Western印迹法检测SHG 44胶质瘤细胞株Rb蛋白的表达情况 ,并观察用VP16诱导细胞凋亡后Rb蛋白表达的改变。结果 在SHG 44胶质瘤细胞株... 目的 研究抑癌基因Rb在人胶质瘤SHG 44细胞调亡前后的表达情况。方法 利用N端Rb蛋白单克隆抗体通过Western印迹法检测SHG 44胶质瘤细胞株Rb蛋白的表达情况 ,并观察用VP16诱导细胞凋亡后Rb蛋白表达的改变。结果 在SHG 44胶质瘤细胞株中存在一相对分子质量约 70× 10 3 、具有N端的Rb蛋白。细胞凋亡后 ,Rb蛋白有裂解现象 ,出现一具有N端的约 48× 10 3 的裂解蛋白 ,并使细胞停滞于G1期。结论 在胶质瘤SHG 44细胞中有Rb基因突变体的表达 ,Rb蛋白的裂解与细胞凋亡密切相关。 展开更多
关键词 胶质瘤 rb蛋白 细胞凋亡 SHG-44细胞
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