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Green synthesis,characterization,acaricidal,larvacidal,and repellent activities of copper nanoparticles of Astragalus sinicus against Hyalomma anatolicum
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作者 Hattan S.Gattan Bassam M.Al-Ahmadi +3 位作者 Abdullah F.Shater Qais A.H.Majeed Maha S.Alazemi Abdullah D Alanazi 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2023年第6期250-257,共8页
Objective:To green synthesize and characterize copper nanoparticles(Cu NPs)using Astragalus sinicus,as well as evaluate the acaricidal,larvacidal,and repellent activities of Cu NPs against Hyalomma anatolicum(H.anatol... Objective:To green synthesize and characterize copper nanoparticles(Cu NPs)using Astragalus sinicus,as well as evaluate the acaricidal,larvacidal,and repellent activities of Cu NPs against Hyalomma anatolicum(H.anatolicum),one of the most prevalent ticks infesting cattle in Saudi Arabia.Methods:Cu NPs were green synthesized by adding the Astragalus sinicus extract to a copper sulfate solution.The acaricidal,larvicidal,and repellent activities of Cu NPs against H.anatolicum were assessed via the adult immersion test,the larval packet test,and the vertical movement behavior of tick larvae,respectively.The effects of Cu NPs on acetylcholinesterase as well as oxidative enzyme activities were examined.Results:The green synthesized Cu NPs displayed a spherical form with a size range of 15-75 nm.After exposure of adult H.anatolicum to different concentrations of Cu NPs,the viability rate of adult H.anatolicum and the mean number,weight,and hatchability of eggs were noticeably reduced,in comparison to the control group(P<0.001).In addition,the viability rate of larvae considerably declined(P<0.001)with the LC_(50)and LC_(90)values of 11.30 and 20.34μg/m L,respectively.The maximum repellent activity of Cu NPs was observed at 50,100,and 200μg/m L with complete repellent activity after 60,120,and 180 min of exposure,respectively.Cu NPs,mainly at 1/2 LC_(50)and LC_(50)concentrations,markedly suppressed the acetylcholinesterase activity of the larval stage of H.anatolicum(P<0.001).Moreover,Cu NPs,mainly at LC_(50)dose,significantly elevated malondialdehyde level while declining glutathione-S-transferase level in H.anatolicum larvae(P<0.001).Conclusions:Cu NPs show potent acaricidal,larvicidal,and repellent activities against adults and larvae of H.anatolicum.However,further studies must be performed to clarify the precise mechanisms and the efficacy of Cu NPs in practical use. 展开更多
关键词 INSECTICIDE TICK PESTICIDE Astragalus sinicus NANOMEDICINE hyalomma anatolicum Acaricidal activity Larvacidal activity
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Molecular Identification of Hyalomma anatolicum,Hyalomma asiaticum and Hyalomma detritum
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作者 Lv Jizhou Wu Shaoqiang +6 位作者 Zhang Yongning Wang Zhenbao Feng Chunyan Wang Caixia Deng Junhua Yuan Xiangfen Lin Xiangmei 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2014年第3期118-122,共5页
Hyalomma anatolicum, Hyalomma asiaticum and Hyalomma detritum are wide-spread tick vectors in China. They could transmit a great variety of serious animal and human pathogens, which are great threats to the health of ... Hyalomma anatolicum, Hyalomma asiaticum and Hyalomma detritum are wide-spread tick vectors in China. They could transmit a great variety of serious animal and human pathogens, which are great threats to the health of human beings and the safety of stockbreeding. Most of them are distributed in Xinjiang and Inner Mongolia, and they share similar morphologies. This study is to establish a method for identifying H. anatolicum, H. asiaticum and H. detritum with molecular markers and to revealing the phylogenetic relationship of these ticks. Ticks were collected from domestic animals in Xinjiang and Inner Mongolia autonomous regions and classified by morphological characters. 16S rRNA and mitachondrial cytochrome oxidase subunit I gone (CO1) of ticks were amplified by PCR and subsequently sequenced. Phylogenetic trees were constructed by MEGA 5.0 and Mrbayes 3.2. On the 16S rRNA-based phylogenetic tree, H. anatolicum and H. aisaticum were clustered together with their respective classes. H. detritum was clustered with their respective class and the H. anatolicum, H. asiaticum formed distinct branches on the phylogenetic trees based on the COL The method based on morphology that combined with molecular 16S rRNA and COl seemed a simple and accurate method for species identification of H. anatolicum, H. asiaticum and H. detritum. n 展开更多
关键词 Cytochrome oxidase subunit I gone (COI) 16S rRNA hyalomma anatolicum hyalomma asiaticum hyalomma detritum Molecular identificatio
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中国璃眼蜱属(蜱螨亚纲:硬蜱科)研究——附新记录种盾陷璃眼蜱Hyalomma excavatum Koch,1844的描述 被引量:2
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作者 黎唯 孙毅 +1 位作者 张桂林 许荣满 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 北大核心 2015年第2期94-103,共10页
我国的璃眼蜱属Genus Hyalomma Koch,1844蜱种原记录6种,盾糙璃眼蜱Hy.scupense Schulze,1919;小亚璃眼蜱Hy.anatolicum Koch,1844;嗜驼璃眼蜱Hy.dromedarii Koch,1844;亚洲璃眼蜱Hy.asiaticum Schulzeet Schlottke 1929;... 我国的璃眼蜱属Genus Hyalomma Koch,1844蜱种原记录6种,盾糙璃眼蜱Hy.scupense Schulze,1919;小亚璃眼蜱Hy.anatolicum Koch,1844;嗜驼璃眼蜱Hy.dromedarii Koch,1844;亚洲璃眼蜱Hy.asiaticum Schulzeet Schlottke 1929;伊氏璃眼蜱Hy.isaaci Sharif,1928;图兰璃眼蜱Hy.turanicum Pomerantzev,1946。依据文献,在检视我国璃眼蜱属标本过程中发现一新纪录种盾陷璃眼蜱Hy.excavatum Koch,1844,使我国的璃眼蜱属增至7种,为了便于璃眼蜱属分类鉴定,本文编制了我国7种璃眼蜱的分种检索表。 展开更多
关键词 璃眼蜱属 分种检索表 盾陷璃眼蜱 中国
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Partial Characterization of Thrombin Inhibitor(s) Derived from Salivary Glands of the Tick, <i>Hyalomma dromedarii</i>, and Related Anti-Cancer Potential
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作者 Wessam S. Ibrahim Fatma S. A. Mohamed +2 位作者 Walaa A. Moselhy Emtithal M. Abdel Samie Aly Fahmy Mohamed 《Advances in Entomology》 2021年第1期1-19,共19页
A long-term blood feeder, like the <i><span>Hyalomma</span></i><span> </span><i><span>dromedarii</span></i><span> tick, requires extended con... A long-term blood feeder, like the <i><span>Hyalomma</span></i><span> </span><i><span>dromedarii</span></i><span> tick, requires extended control over all hemostatic defense mechanisms generated by the host during feeding, including blood coagulation. To overcome this, ticks have evolved numerous molecules that target proteases in the blood coagulation cascade. New insights into the role of clotting factors in the development and progression of cancer have identified anticoagulant treatment as a potential therapeutic approach. In this context, the present work assessed the anticoagulation activities of crude and fractionated salivary gland extract (SGE) prepared from semi-fed </span><i><span>H</span></i><span>. </span><i><span>dromedarii</span></i><span> females. Additionally, the antitumor effects of the potent anti-thrombin fractions were determined against colon cancer (Caco-2) and normal skin (HFB4) cells. Crude SGE significantly prolonged clotting time in prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT) and thrombin time (TT) assays and inhibited thrombin in FII-activity assay. Using anion-exchange chromatography, the fractions that strongly inhibited thrombin (3.A4 and 3.A5) were eluted. Both fractions prolonged the aPTT and TT clotting times and reduced the activity of FII significantly. The protein profiles of both fractions indicated the presence of a single polypeptide band of about 99 kDa. Regarding anti-cancer potential of the tested fractions, Caco-2 cells showed reduced viability with obvious morphological changes, induced apoptosis and a reduced level of vascular endothelial </span><span>growth factor (VEGF). G2/M cell cycle arrest was observed only in 3.A5-treated</span><span> cells. No cytotoxic effects were observed in HFB4 cells. These results demonstrated the potential of tick-derived anticoagulants, specifically thrombin inhibitors, as effective tools in colorectal cancer treatment. Further purification of the effector molecule(s) is required to fully characterize their structures and mechanisms of action.</span> 展开更多
关键词 hyalomma dromedarii Salivary Glands Thrombin Inhibitor APOPTOSIS VEGF
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Genetic Diversity in the Camel Tick <i>Hyalomma dromedarii</i>(Acari: Ixodidae) Based on Mitochondrial Cytochrome c Oxidase Subunit I (COI) and Randomly Amplified Polymorphic DNA Polymerase Chain Reaction (RAPD-PCR)
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作者 Mohammad Ali Al-Deeb Mohamed Rizk Enan 《Advances in Entomology》 2018年第4期285-294,共10页
Hyalomma dromedarii ticks are important disease vectors to camels in the UAE and worldwide. Ticks can be identified using DNA-based techniques. In addition, such techniques could be utilized to study the intraspecific... Hyalomma dromedarii ticks are important disease vectors to camels in the UAE and worldwide. Ticks can be identified using DNA-based techniques. In addition, such techniques could be utilized to study the intraspecific genetic diversity in tick populations. In this study, the genetic diversity of four H. dromedarii populations was investigated using mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I (COI) gene and randomly amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction (RAPD-PCR). The results showed that both of the aforementioned techniques produced similar grouping patterns. Moreover, they revealed that the four tick populations had high levels of genetic similarity. However, one population was slightly different from the three other populations. The current study demonstrated that H. dromedarii ticks in the UAE are very similar at the genetic level and that investigating more locations and screening larger numbers of ticks could reveal larger genetic differences. 展开更多
关键词 CAMEL TICK Genetic Diversity COI Gene RAPD-PCR hyalomma dromedarii
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小亚璃眼蜱吸血前后组织形态比较观察
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作者 李晓森 罗亭祥 +8 位作者 杨德鹏 伍军 石文玉 张华聪 艾则麦提·艾合买提 苏蓓琪 玛合力亚·马合木提 胡政香 呼尔查 《中国动物检疫》 CAS 2023年第12期104-109,共6页
小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum)是新疆南疆地区常见的寄生于家畜体表的一种外寄生虫。该蜱虫可携带和传播多种人兽共患病病原。为观察小亚璃眼蜱吸血前后的组织学变化,采用糖原PAS染色方法,将人工饲养的小亚璃眼蜱雌蜱制作为组织切片... 小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum)是新疆南疆地区常见的寄生于家畜体表的一种外寄生虫。该蜱虫可携带和传播多种人兽共患病病原。为观察小亚璃眼蜱吸血前后的组织学变化,采用糖原PAS染色方法,将人工饲养的小亚璃眼蜱雌蜱制作为组织切片,观察其在饥饿、半饱血以及饱血状态下不同组织器官的特征。冠状面组织切片观察结果显示,饥饿雌蜱体内糖原含量较低,主要分布在中肠基底膜周围、唾液腺和卵巢组织表面,气管密度与半饱血和饱血雌蜱相比稍大;半饱血雌蜱体内糖原含量较高,主要集中在中肠、唾液腺导管和卵巢周围组织;饱血雌蜱体内糖原含量较高,主要集中在中肠和卵巢组织表面。在饥饿至饱血过程中,唾液腺细胞接触宿主血液后迅速发育,随雌蜱饱血自然脱离宿主,唾液腺逐渐溶解萎缩;中肠组织从饥饿状态下的“小而空”形态,转变成充满糖类物质的“储存池”。本试验丰富了蜱类组织器官形态学分析数据,为了解吸血期硬蜱器官的变化提供了重要参考。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 人工饲养 器官形态 组织切片
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小亚璃眼蜱人工饲养条件下吸血期组织器官形态变化观察
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作者 余权威 姚鹤松 +9 位作者 妥小丽 梁欣悦 玉山·艾合麦特 何文文 伍军 诺明达来 罗亭祥 杨德鹏 胡政香 呼尔查 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2023年第3期160-165,共6页
小亚璃眼蜱Hyalomma anatolicum属于硬蜱科璃眼蜱属,是一种寄生于动物体表的专性吸血寄生虫,其分布范围广、寄生强度大。该蜱种可传播多种人畜共患病原体,对畜牧业造成巨大损失。为研究媒介蜱生物学特性和吸血期蜱类生理学变化,本研究... 小亚璃眼蜱Hyalomma anatolicum属于硬蜱科璃眼蜱属,是一种寄生于动物体表的专性吸血寄生虫,其分布范围广、寄生强度大。该蜱种可传播多种人畜共患病原体,对畜牧业造成巨大损失。为研究媒介蜱生物学特性和吸血期蜱类生理学变化,本研究利用实验室F2代小亚璃眼蜱进行人工饲养和组织器官切片染色,观察小亚璃眼蜱吸血期组织器官的形态学特征。结果显示,小亚璃眼蜱在实验条件下,从虫卵孵化为幼虫,再通过吸血成为若虫,进而吸血蜕皮为成蜱,共需要50.0 d。吸血期小亚璃眼蜱雌蜱苏木精伊红染色(HE染色)组织切片显示,随着雌蜱从半饱血至饱血状态,唾液腺细胞逐渐溶解消失,中肠腔内消化产生的血红素转移至中肠基底层和血淋巴中,然而卵巢组织并未出现明显变化。本研究首次观察了吸血期小亚璃眼蜱组织器官的变化,丰富了该蜱的生物学特性和组织学形态资料。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 人工饲养 器官形态 组织切片
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亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析 被引量:8
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作者 程天印 周金林 +2 位作者 周勇志 施启顺 林矫矫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期261-266,共6页
从单雌蜱克隆群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成两组。未吸血组直接剖取唾液腺。半饱血组于蜱吸血第5d采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、RasⅠ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDN... 从单雌蜱克隆群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成两组。未吸血组直接剖取唾液腺。半饱血组于蜱吸血第5d采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、RasⅠ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDNA片段。将纯化的cDNA片段与pGEMT-Easy载体连接,转化DH5a,获得204个白色菌落。扩增检查表明,136个克隆含有插入片段,片段大小为250bp~850bp。测出有效序列120个。由10个cDNA片段的RT-PCR检查结果初步断定,本研究消减效果良好。由网上资源分析得:21个片段与其他蜱的基因,19个片段与按蚊、库蚊、钩虫、奥斯特线虫等其他吸血寄生虫的基因,9个与果蝇的基因具有同源性。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 唾液腺 差异表达基因文库 同源性
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小亚璃眼蜱和亚洲璃眼蜱对环形泰勒虫传播能力的研究 被引量:8
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作者 罗建勋 殷宏 +3 位作者 关贵全 马米玲 张其才 吕文顺 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第2期22-23,共2页
将实验室培养的小亚璃眼蜱 (Hyalommaanatolicumanatolicum )和亚洲璃眼蜱(Hyalommaasiaticumasiaticum)清洁幼虫和若虫饲喂于感染环形泰勒虫的牛体 ,收集饱血幼虫和若虫 ,用所孵化的若虫和成虫感染试验牛。结果显示 ,小亚璃眼蜱幼虫、... 将实验室培养的小亚璃眼蜱 (Hyalommaanatolicumanatolicum )和亚洲璃眼蜱(Hyalommaasiaticumasiaticum)清洁幼虫和若虫饲喂于感染环形泰勒虫的牛体 ,收集饱血幼虫和若虫 ,用所孵化的若虫和成虫感染试验牛。结果显示 ,小亚璃眼蜱幼虫、若虫阶段感染 ,所发育之若虫、成虫均可传播环形泰勒虫 ;而亚洲璃眼蜱各阶段的传播试验结果均为阴性。 展开更多
关键词 传播能力 小亚璃眼蜱 亚洲璃眼蜱 环形泰勒虫 传播媒介
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牛(牦牛)内寄生虫感染情况的调查及亚东璃眼蜱生活习性的观察 被引量:5
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作者 曹雯丽 李丽 +2 位作者 王冰洁 石进纯 巴音查汗 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2140-2145,共6页
[目的]调查新疆疫区感染牛(牦牛)的体外寄生虫璃眼蜱优势分布种的生物学特性以及体内寄生虫的种类、感染率及危害。[方法]采用人工饲养蜱虫、寄生虫病病原(粪便)常规检查技术,进行疫区璃眼蜱优势分布种生活习性及牛(牦牛)体内寄生虫病... [目的]调查新疆疫区感染牛(牦牛)的体外寄生虫璃眼蜱优势分布种的生物学特性以及体内寄生虫的种类、感染率及危害。[方法]采用人工饲养蜱虫、寄生虫病病原(粪便)常规检查技术,进行疫区璃眼蜱优势分布种生活习性及牛(牦牛)体内寄生虫病调查。[结果]经过一循环的饲蜱试验观察和形态学鉴定:疫区璃眼蜱的优势分布种为亚东璃眼蜱,经实验室人工饲养,发现其生活史改变,74%(88/119)的幼蜱饱血后未脱落,而是蜕变为若蜱后继续吸血,由三宿主蜱变为了二宿主蜱,以上饱血若蜱蜕变期、蜕变率分别为23~33d(平均26 d)、100%;26%(31/119)的幼蜱正常饱血脱落,吸血期、蜕变期、蜕变率分别为3~9 d(平均5 d)、7~12 d(平均10 d)、83.9%(26/31)。若蜱吸血期、蜕变期、蜕变率分别为6~8 d(平均7 d)、25~33 d(平均29 d)、88.5%(23/26);成蜱吸血期、产卵前期、产卵期、孵化期分别为4、26、20和11 d。室内病原学检查结果显示:和静县巴仑台和巴音布鲁克高山草原牦牛体内寄生虫感染率分别为69.05%(29/42)、85.14%(63/74),总感染率为79.31%(92/116),且大多为混合感染,线虫感染率均高于其它寄生虫。[结论]亚东璃眼蜱是新疆优势种,可以根据其生物学习性制定相关防治措施,同时发现被检区牦牛体内寄生虫感染比较严重,急需制定切实可行的防治措施。 展开更多
关键词 亚东璃眼蜱 人工饲蜱 牦牛 体内寄生虫 调查
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从中哈边境亚洲璃眼蜱中检测到弗朗西斯氏菌样内共生体核酸 被引量:6
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作者 尹小平 赵姗姗 +5 位作者 刘丹 田延河 巴特尔 程天立 张江国 王远志 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期170-172,177,共4页
目的对中哈边境铁路线区域的亚洲璃眼蜱中弗朗西斯菌属及内共生体检测。方法 2015年在中哈边境采集的游离蜱进行形态学与分子学鉴定后,扩增弗朗西斯菌属及共生体16SrRNA和sdhA基因,对阳性产物测序后进行Blast分析,用Mega 6.0构建分子遗... 目的对中哈边境铁路线区域的亚洲璃眼蜱中弗朗西斯菌属及内共生体检测。方法 2015年在中哈边境采集的游离蜱进行形态学与分子学鉴定后,扩增弗朗西斯菌属及共生体16SrRNA和sdhA基因,对阳性产物测序后进行Blast分析,用Mega 6.0构建分子遗传进化树。结果对243只游离蜱经形态学与分子学鉴定为亚洲璃眼蜱后,经PCR病原学检测及测序得到35份(只)阳性,阳性率为14.4%。分析得到两株(Seq1和Seq2)不同基因型的序列,遗传进化树显示,这两株弗朗西斯菌属内共生体聚到1支,未检测到土拉弗朗西斯菌。结论在中哈边境铁路线区域亚洲璃眼蜱中首次检测到弗朗西斯菌样核酸。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 PCR 弗朗西斯菌 中哈边境
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小亚璃眼蜱的鉴定及其生物学特性研究 被引量:5
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作者 王振宝 吾仁其米克 +3 位作者 巴音查汗 王常汉 杨帆 李向梅 《新疆农业大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期63-66,共4页
经过一循环的饲蜱试验观察和形态学鉴定:蜱种为小亚璃眼蜱,在22-28℃,60%-85%相对湿度下室内人工饲养,证明该种蜱为三宿主蜱,完成一代需要138d,成蜱吸血期、产卵前期、产卵期分别为8.5,10.5,27.5d;卵孵化期为31.5d,孵化率... 经过一循环的饲蜱试验观察和形态学鉴定:蜱种为小亚璃眼蜱,在22-28℃,60%-85%相对湿度下室内人工饲养,证明该种蜱为三宿主蜱,完成一代需要138d,成蜱吸血期、产卵前期、产卵期分别为8.5,10.5,27.5d;卵孵化期为31.5d,孵化率为80%;幼虫吸血前期、吸血期、蜕化期分别为3.0,5.5,18.5d;若虫吸血前期、吸血期、蜕化期分别为4,10,19d;成蜱在4℃冰箱、室外模拟鼠洞保种试验成活率为80%。小亚璃眼蜱完全可以在实验室条件下大量繁殖和4℃冰箱保存。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 生物学特性 鉴定 研究
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小亚璃眼蜱4D8基因的克隆与原核表达 被引量:5
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作者 赵金国 曾巧英 +3 位作者 殷宏 刘爱红 李有全 罗建勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期461-464,共4页
根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8。测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边... 根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8。测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边缘革蜱4D8基因的核苷酸序列的同源性为89.2%。将此片段定向亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Hyaa4D8,表达并纯化重组蛋白,通过免疫印迹试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示,该重组蛋白是分子质量为45ku的融合蛋白,且表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 4D8基因 克隆 原核表达
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亚洲璃眼蜱不同发育阶段及其组织中microRNA-10表达分析 被引量:3
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作者 袁小松 罗金 +5 位作者 田占成 谢俊仁 王芳芳 田美媛 张以芳 刘光远 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期806-814,共9页
【目的】MicroRNA(miRNA)是一类长度为20—22个核苷酸(nt)且高度保守的非编码小RNA。迄今为止,在病毒、动物、植物中都有发现,如在Mareks病毒、果蝇、斑马鱼、人类以及拟南芥等多种生物中都有存在。其通过与靶基因特异性的碱基互补配对... 【目的】MicroRNA(miRNA)是一类长度为20—22个核苷酸(nt)且高度保守的非编码小RNA。迄今为止,在病毒、动物、植物中都有发现,如在Mareks病毒、果蝇、斑马鱼、人类以及拟南芥等多种生物中都有存在。其通过与靶基因特异性的碱基互补配对使靶基因降解或者受到抑制,在转录后水平调控靶基因的表达水平。miRNAs参与多种生物的细胞增殖、分化、代谢与死亡等多种生物学过程。为了解microRNA-10在亚洲璃眼蜱中的潜在生物学功能,试验获得亚洲璃眼蜱miR-10的前体、成熟体序列;分析亚洲璃眼蜱不同发育阶段及组织miR-10的表达水平,及亚洲璃眼蜱miR-10的生物学意义;为进一步研究miR-10与亚洲璃眼蜱生长发育间的关系奠定基础。【方法】用Trizol Reagent分别提取不同发育阶段及组织的总RNA,用SYBR?Prime Script TMmiRNA RT-PCR Kit(TaKaRa Code:RR716)制备cDNA。参考miRBase数据库中isc-miR-10(登录号:MI0012262)序列,设计特异性引物,通过PCR的方法从亚洲璃眼蜱中扩增获得miR-10前体序列,通过MEGA4软件将此前体序列与已知物种的miR-10前体序列进行比对分析;利用qPCR技术分析亚洲璃眼蜱不同发育阶段及组织miR-10的表达情况;推测miR-10在亚洲璃眼蜱中的生物学功能。【结果】获得亚洲璃眼蜱miR-10的前体序列CUACAUCUACCCUGUAGAUCCGAAUUUGUUUGCCACUAGACUACAAAUUCGGUUCUAGAGAGGCUUUGUGUGG,大小为73bp;亚洲璃眼蜱的miR-10前体序列与肩突硬蜱的相似性最高,是95.9%,且与其他节肢动物相似性在88.9%—91.7%之间;miR-10在不同物种间高度保守。miR-10的成熟体序列为UACCCUGUAGAUCCGAAUUUGU,种子序列为ACCCUGU。在亚洲璃眼蜱的不同发育阶段中,饥饿若蜱的miR-10的表达水平最高,是卵的48.3倍;饥饿成蜱是卵的7.78倍;饥饿幼蜱是卵的2.78倍。在饥饿雌性成蜱吸血过程中,吸血3d的成蜱是饥饿成蜱的约4.28倍,吸血5d的成蜱是饥饿成蜱的约0.31倍,饱血自然脱落的成蜱是饥饿成蜱的约0.087倍。吸血初期miR-10的表达量上调,随着吸血时间的延长其表达量逐渐下调;在唾液腺、气管、卵巢、表皮、中肠中miR-10的表达情况有明显不同,其中唾液腺的表达量最高,是表皮的13.2倍;卵巢的表达量是表皮的2.98倍,气管的表达量是表皮的6.46倍。【结论】从亚洲璃眼蜱中克隆miR-10序列,序列分析显示此序列在节肢动物中相对保守。miR-10在亚洲璃眼蜱不同发育阶段及不同组织的表达明显不同,表明其表达具有选择性;依据miR-10表达的差异性及已报道miR涉及的生物学功能,推测miR-10在亚洲璃眼蜱的细胞增殖、发育及吸血方面有潜在的重要作用。本研究为寄生虫miRNAs功能的研究提供一定的依据,并有可能为防控寄生虫疾病开辟新的途径。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 MIR-1 0 克隆 表达分析 qPCR
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四种璃眼蜱ITS2基因的序列分析 被引量:3
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作者 张艳艳 刘继荣 +2 位作者 薄新文 王开胜 王光雷 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2012年第4期241-247,共7页
对采自新疆准噶尔盆地的亚洲璃眼蜱指名亚种、亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱进行总DNA提取,PCR扩增和测序,并从GenBank中下载的6种硬蜱ITS2序列,应用软件分析ITS2片段长度、变异位点、G+C含量和进化关系。结果显示,亚洲璃眼... 对采自新疆准噶尔盆地的亚洲璃眼蜱指名亚种、亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱进行总DNA提取,PCR扩增和测序,并从GenBank中下载的6种硬蜱ITS2序列,应用软件分析ITS2片段长度、变异位点、G+C含量和进化关系。结果显示,亚洲璃眼蜱指名亚种和亚东璃眼蜱的ITS2序列长度均为1458bp,全序列存在3个变异位点(A、G转换)和2个碱基缺失\插入,同源性达99%,残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱的ITS2全长均为1561bp,存在12个变异位点,同源性达99%;12种硬蜱的ITS2序列中G+C含量较高,为61.2%-62.7%。系统进化分析表明亚洲璃眼蜱指名亚种和亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱分别处在两个分支上,这两个分支分别与嗜驼璃眼蜱和小亚璃眼蜱聚为一支。璃眼蜱属、革蜱属和扇头蜱属聚为一大支,血蜱属单独构成一大支。 展开更多
关键词 璃眼蜱 ITS2 序列分析 准噶尔盆地
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中哈边境阿拉山口口岸输入性亚洲璃眼蜱的种类鉴定与分析 被引量:5
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作者 徐军 王安东 +6 位作者 戴莉 杨杰 罗丹 徐建军 李志远 热依罕古丽 萨尼叶古丽 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期17-19,共3页
对1批从哈萨克斯坦进口羊毛中检获的蜱样品进行种类鉴定。应用16S rDNA基因和COI基因两条DNA条形码技术进行鉴定分析。结果 16S rDNA序列分析显示与新疆亚洲璃眼蜱(KC203351)同源性最接近(99%);COI基因序列分析显示与新疆伊犁亚洲璃眼蜱... 对1批从哈萨克斯坦进口羊毛中检获的蜱样品进行种类鉴定。应用16S rDNA基因和COI基因两条DNA条形码技术进行鉴定分析。结果 16S rDNA序列分析显示与新疆亚洲璃眼蜱(KC203351)同源性最接近(99%);COI基因序列分析显示与新疆伊犁亚洲璃眼蜱(KF527440)同源性最接近(99%)。结论:经DNA条形码比对,确定为亚洲璃眼蜱,应加强对外来医学媒介生物防控,严防"外来病"入侵。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 种类鉴定 16S RNA COI 线粒体 阿拉山口口岸
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盾糙璃眼蜱传播的牛泰勒虫分离鉴定及生物学特性 被引量:3
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作者 刘爱红 关贵全 +5 位作者 刘军龙 李有全 马米玲 牛庆丽 殷宏 罗建勋 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期17-20,共4页
自新疆伊宁地区黄牛体表采集的盾糙璃眼蜱饥饿或半饱血成虫,带回实验室感染除脾牛。经血涂片检查发现,于感染后第21天,病牛血液中出现一种以圆环形与卵圆形为主的泰勒虫。经形态学观察和18 S rRNA基因测序和进化关系分析证明,它们为环... 自新疆伊宁地区黄牛体表采集的盾糙璃眼蜱饥饿或半饱血成虫,带回实验室感染除脾牛。经血涂片检查发现,于感染后第21天,病牛血液中出现一种以圆环形与卵圆形为主的泰勒虫。经形态学观察和18 S rRNA基因测序和进化关系分析证明,它们为环形泰勒虫。将此饱血成蜱经实验室饲喂条件下,孵化出的幼虫分别饲喂于牛与家兔两种不同的动物,结果在饱血若虫阶段所有的蜱均从两种动物体表脱落,不再叮咬,饥饿成蜱又更换另一宿主,证明其是二宿主蜱。 展开更多
关键词 盾糙璃眼蜱 牛梨形虫 形态学 18SrRNA基因 生物学特性
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亚洲璃眼蜱唾液腺一新功能基因的克隆与测序 被引量:2
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作者 程天印 周金林 +2 位作者 施启顺 周勇志 林矫矫 《畜牧与兽医》 北大核心 2005年第5期4-6,共3页
HaB1是亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺差异表达基因文库中的一个片段,根据其序列设计引物HaB1-GSP1和HaB1-GSP2,以唾液腺总RNA为模板,RACE法扩增获得HaB1的未知3′-末端。测定该末端序列,进行序列拼接,设计全长引物5-′CCAGTCCGAAGGAAGGGCG-3′... HaB1是亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺差异表达基因文库中的一个片段,根据其序列设计引物HaB1-GSP1和HaB1-GSP2,以唾液腺总RNA为模板,RACE法扩增获得HaB1的未知3′-末端。测定该末端序列,进行序列拼接,设计全长引物5-′CCAGTCCGAAGGAAGGGCG-3′和5-′TCTC-CGGGCACGTGAAGTGTC-3′。以cDNA第一链为模板,扩增获得基因全长。经核查表明,该基因为一新基因(登录号AY803896)。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 唾液腺 基因克隆 序列分析 HaB1基因 体外寄生虫
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亚洲璃眼蜱成蜱不同发育期miR-451与MIF表达谱的动态分析 被引量:1
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作者 罗金 袁小松 +7 位作者 郝佳伟 田占成 谢俊仁 陈泽 任巧云 殷宏 罗建勋 刘光远 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期4366-4373,共8页
[目的]micro RNA(miRNA)作为一类内源性的非编码RNA,仅有18—25 nt,其广泛存在于动植物细胞中,可诱导生物基因沉默,参与细胞生长、发育、基因转录和翻译等诸多生命活动的调控过程。以亚洲璃眼蜱为研究对象,对miR-451及其靶基因(巨噬细... [目的]micro RNA(miRNA)作为一类内源性的非编码RNA,仅有18—25 nt,其广泛存在于动植物细胞中,可诱导生物基因沉默,参与细胞生长、发育、基因转录和翻译等诸多生命活动的调控过程。以亚洲璃眼蜱为研究对象,对miR-451及其靶基因(巨噬细胞游走因子,MIF)在相互作用关系进行分析。[方法]参考miR-451成熟体序列(AAA CCG UUA CCA UUA CUG AGU UU)来自研究单元亚洲璃眼蜱高通量测序所获得的结果。根据该成熟体序列设计stem-loop及PCR引物,RT-PCR扩增获得蜱源性miR-451序列;并对不同物种来源的miR-451序列特征进行分析。基因合成方法获得抑制miR-451的ds RNA序列,用于亚洲璃眼蜱饥饿成蜱体内注射。参考美洲钝眼蜱MIF基因(登录号:AF289543.2),设计亚洲璃眼蜱的特异性实时荧光定量引物,以β-actin作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR方法检测注射ds RNA后亚洲璃眼蜱饥饿成蜱不同发育时间点MIF基因的表达水平,以及miR-451的表达谱特征。[结果]琼脂糖凝胶电泳检测miR-451的PCR产物条带与预期大小一致,为72 nt。不同物种来源的miR-451具有较高的保守性,特别是种子序列极度保守,仅在短尾负鼠miR-451成熟体的19位点处存在A→U的突变。miR-451的RNA干扰实验证实,0-30 h miR-451表达逐渐上调,6 h达到最高值,其拷贝数为1.0×108。随后表达丰度逐渐降低。30 h其表达水平与PBS对照组相同。48-60 h miR-451再次出现一个表达上调微小变化过程。而miR-451抑制后的MIF直到30 h才有表达的上调,42 h达到峰值(拷贝量仅为9.0×103),此后其表达规模受到抑制,48 h时与PBS对照组水平一致。84 h后表达才逐渐上调,直到90 h达到峰值,并呈现正态分布趋势。[结论]利用RT-PCR获得亚洲璃眼蜱成蜱阶段miR-451序列,生物信息学方法分析了miR-451序列在不同物种间具有较高保守性。miRNA的保守性决定其靶标基因的特异性,因此,以上结果提示miR-451在动物细胞中可能扮演重要的生物学功能,是MIF功能发挥的一个重要调控因子。MIF作为miR-451靶标基因,其功能的实现可能受该miRNA的调控。基于此类推测q PCR及RNA干扰分析表明,miR-451参与了MIF的表达调控。且是一种负调控作用。当miR-451表达量升高时,MIF表达量明显下调。此研究首次证实miR-451在亚洲璃眼蜱成蜱发育阶段的表达是一种普遍现象,且对MIF存在负调控作用。这一研究为后期miR-451参与蜱的免疫应答及miR-451与靶标基因的相互作用机制提供了参考。同时证明,miRNA参与基因功能的调控具有一定的特异性和时序性。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 微小RNA(microRNA) miR-451 巨噬细胞抑制游走因子 MIF
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嗜驼璃眼蜱抗菌肽的电泳分析及抗菌活性研究 被引量:2
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作者 王振宝 王志强 巴音查汗 《动物医学进展》 CSCD 2008年第11期12-15,共4页
为探讨嗜驼璃眼蜱血淋巴中抗菌肽的电泳分析方法及其抗菌作用,从半饱血的嗜驼璃眼蜱雌蜱体内抽取血淋巴,用50mL/L的乙酸抽提,经AU-PAGE分析嗜驼璃眼蜱血淋巴中阳离子多肽成分,用电泳凝胶琼脂糖弥散法对各多肽进行抗菌活性的筛选。结果表... 为探讨嗜驼璃眼蜱血淋巴中抗菌肽的电泳分析方法及其抗菌作用,从半饱血的嗜驼璃眼蜱雌蜱体内抽取血淋巴,用50mL/L的乙酸抽提,经AU-PAGE分析嗜驼璃眼蜱血淋巴中阳离子多肽成分,用电泳凝胶琼脂糖弥散法对各多肽进行抗菌活性的筛选。结果表明,嗜驼璃眼蜱血淋巴中阳离子多肽成分对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均有很强的抗菌作用。AU-PAGE发现一电泳迁徙率明显高于溶菌酶的阳离子抗菌多肽。提示在嗜驼璃眼蜱的血淋巴中,存在与溶菌酶不同的抗菌多肽,可能是嗜驼璃眼蜱抵御感染的重要分子。AU-PAGE是一种较简单、快速、经济的分离纯化抗菌肽的方法。 展开更多
关键词 嗜驼璃眼蜱 抗菌肽 AU—PAGE 抗菌活性
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