包虫病患者循环抗原检测中血清不同处理方法的比较研究

本文比较了在包虫病人循环抗原检测中，数种血清不同处理方法。结果证实，在检测包虫病人循环抗原时，预先用胰蛋白酶消化可以使血清免疫复合物中的循环抗原较彻底地游离。用３．５％聚乙二醇沉淀血清中的免疫复合物，再以１％胰蛋白酶消化，较不处理组敏感性提高６倍，较传统的酸解组增加４倍多。另外，将处理血清的稀释液中氯化钠浓度加大，或将血清用１０％牛血清白蛋白孵育，可明显降低本底值，Ｐ／Ｎ值可分别提高１．２倍和１．３倍。

神经系统疾病患者脑脊液博尔纳病病毒CIC及抗体的检测

目的探讨贵州省部分地区神经系统疾病中博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染情况以及病毒性脑炎阳性患者的临床特征。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测84例神经系统疾病患者[包括病毒性脑炎(VE)患者69例,吉兰-巴雷综合征(GBS)患者9例,多发性硬化(MS)患者6例,以及45例对照组(非炎症性神经系统疾病患者)]脑脊液(CSF)中BDV循环免疫复合物(CIC)及抗体,对13例脑脊液BDV CIC阳性患者同期行血液BDV CIC检测。结果 84例神经系统疾病患者CSF中BDV CIC总阳性率为15.4%(13/84),其中VE阳性率14.4%(10/69),GBS阳性率11.1%(1/9),MS阳性率33.3%(2/6),对照组阳性率2.22%(1/45),实验组总体阳性率明显高于对照组(P<0.05),两组比较具有统计学意义。CSF抗体阳性率1.2%(1/84),对照组抗体阳性率为0。两组比较无统计学意义(P>0.05)。血液BDV CIC阳性标本10例。7例BDV CIC阳性病毒性脑炎患者主要以精神行为异常为特征,患者有密切动物接触史。结论贵州省部分地区等地神经系统疾病中存在BDV感染,7例VE患者主要以精神行为异常为临床特征。

血清循环免疫复合物中胆固醇含量与缺血性心脑血管疾病关系的研究

目的 :了解血清循环免疫复合物 ( CIC C)中胆固醇 ( TC)含量在缺血性心、脑血管疾病发病中的意义和作用。方法 :测定冠心病 ( CHD)、急性心肌梗死 ( AMI)、脑梗死 ( CI)、糖尿病 ( DM)患者及健康人 ( 3 0例 )血清CIC C含量 ,并将其与相关指标进行对比分析。结果 :各患者组 CIC C含量、血脂 TC、甘油三脂 ( TG)及心肌酶 (肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶和 α 羟丁酸脱氢酶 )水平均显著高于健康人组 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1 )。CHD、AMI、CI患者 CIC C含量与 TC呈正相关 ( P均 <0 .0 5) ,且其异常率高于 TC、TG。结论 :CIC C含量升高与缺血性心、脑血管疾病的发生密切相关 ,且有较高的诊断价值。

应用酶消化法使囊虫循环抗原游离的研究

检测囊虫病循环抗原(CA)时,预先用胰酶或木瓜酶消化可以使血清免疫复合物(1C)中的CA完全游离。用3.5％聚乙二醇(PEG)沉淀血清中的1G,再以胰酶消化,在抗体过量时CA的得率可达100％。应用ELISA双抗体夹心法检测自抗体过量型至抗原过量型的系列1C模拟血清,仅抗原过量时呈阳性;囊虫病人血清阳性率为43.1％(25/58),用胰酶消化后检测,由阴性变为阳性者占22.58％(7/31)。建议用PEG分离浓缩血清中的1C,再以胰酶或木瓜酶消化,以提高血清CA阳性率。

日本血吸虫感染动物血清中CAb CAg及CIC水平的动态

本文对感染10条与50条单、双性血吸虫的4组家兔,在感染后2—18wk,连续检测了血吸虫CAb、CAg及CIC水平,并与正常对照兔进行了对比.结果表明,CAg在感染早期显示高水平,CAb在感染中期呈现明显高峰,而CIC在感染后期也有较高水平.阐明了血吸虫感染宿主血清中CAb、CAg和CIC水平的消长规律,也提示了感染宿主CAb、CAg及CIC水平与感染度和单、双性感染有关.

反应型双特异性免疫复合物的免疫生物学

在国内外首创双特异性循环免疫复合物 (TCIC)的新概念 ,提出了一种检测循环免疫复合物的新分类方法 ,并在科研中实际应用 ,获国家教委科技进步 (甲类 )三等奖 .在对抗原 / Ig和抗原 /补体 - TCIC的研究中 ,发现了抗原 / Ig A- TCIC是有关疾病慢性化及其程度的重要指标 ,论证了抗原 /补体 - TCIC的免疫病理作用 ,获江西省科技进步二等奖 .在对 Ig/补体 - TCIC的研究中 ,阐明了免疫复合物病理生理意义的 Ig类型决定性和临床病型相关性等免疫生物学规律 ,获江西省科技进步二等奖 .

克山病患者红细胞免疫功能与血硒水平的关系

对潜在型、慢型克山病患者和病区健康居民的红细胞免疫功能、血清红细胞免疫粘附调节因子、循环免疫复合物（CIC）、全血硒含量和全血谷胱甘肽过氧化物酶活性（GPX）进行了检测，结果是：潜在型、慢型克山病患者和病区健康居民红细胞C3b受体花环率、全血硒含量和全血GPX活性均明显低于非病区居民；血清红细胞免疫粘附抑制率均明显高于非病区居民；全血硒含量与红细胞C3b受体花环率呈显著正相关（r=0．887，n=61，P＜0．01）；与血清红细胞免疫粘附抑制率呈显著负相关（r=0．781，n=60，P＜0．01）；而免疫复合物（IC）花环率、血清红细胞免疫粘附促进率和CIC在各型克山病患者、病区健康居民及非病区居民之间无明显差异。提示：潜在型、慢型克山病患者和病区健康居民红细胞免疫功能低下，可能与低硒状态和血清红细胞免疫粘附抑制因子增加有关。

单克隆抗体夹心ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

应用生物素标记单克隆抗体进行夹心ABC-ELISA检测包虫病人血清循环抗原(HcAg),共检测包虫病人血清103份,62价呈阳性(60.19％);检测囊虫病人血清22份,其它寄生虫病血清54份,正常人血清101份,均未出现假阳性反应。常规ELISA血清抗体阴性的10例包虫病人HcAg 5例呈阳性。HcAg的检测对血清抗体阴性的包虫病人具有辅助诊断意义。

风湿性心脏病IgM特异性激活补体类循环免疫复合物的研究

采用捕捉法ELISA,检测64例风湿性心脏病患者的IgM 特异性激活补体类循环免疫复合物(IgM/C_3—CIC),发现其阳性率与风湿活动、抗“O”及CRP 密切相关,而与年龄、性别、病程、RF、IgM、IgG、IgA、C_3、C_4及C_5无明显关系。这些结果提示,IgM/C_3—CIC 参与了风湿活动过程,风湿性心脏病是一种免疫调节紊乱性疾病。

库存血加热对于红细胞免疫功能的影响

目的通过检测37℃温浴前后正常献血员的红细胞上白细胞分化抗原相关指标来评价温浴对红细胞免疫功能是否有影响,并进一步探讨温浴不同温度和时间对红细胞CD35[红细胞补体受体1(CR1)]、CD59、CD55、CD58、CD44s表达的影响,为库存红细胞安全、有效地使用提供理论依据。方法随机抽取河北省血液中心采集的无偿献血、经检测各项指标全部合格血液标本50份,每份均分成8段(A、B、C、D、E、F、G、H组)分别行4℃保存,37℃加热10,20,30,60,120,180 min和40℃加热30 min处理,并进行后续实验。采用流式细胞技术检测CR1及红细胞CD58、CD59、CD55、CD44s分子水平。结果红细胞CD35、CD58、CD55、CD44s阳性率和分子水平在37℃加热后30 min内无显著变化,之后随着时间延长而逐渐降低。红细胞CD59阳性率和分子水平在37℃加热180 min内变化不显著。结论库存红细胞37℃温浴30 min以内对红细胞免疫功能无明显影响,患者输注红细胞前库存红细胞37℃温浴30 min为最佳。

冠心病患者血清C反应蛋白、循环免疫复合物和补体C_3的变化及其临床意义

目的 :通过观察不同类型冠心病 (CHD)患者血清中C反应蛋白 (CRP)、循环免疫复合物 (CIC)和补体C3的水平 ,探讨炎症和免疫反应在CHD发病中的意义。方法 :将 72例经冠脉造影证实其冠脉有异常改变的CHD患者和 2 8例经冠脉造影证实其冠脉无异常改变的非冠心病患者 (NCHD)作为观察对象 ;CHD患者包括稳定型心绞痛 (SAP) 2 4例、不稳定型心绞痛(UAP) 2 8例和急性心肌梗死 (AMI) 2 0例 ,测定血清CRP、CIC和补体C3浓度。并分析浓度的改变与冠脉狭窄程度的关系。结果 :CHD组中血清CRP和CIC水平与对照组相比明显升高 (P <0 0 5 ) ,而补体C3与对照组相比无显著性差异。对CHD各亚组分析发现 ,SAP亚组仅CRP高于正常 ,其余两项均无显著性差异。UAP亚组与对照组相比 ,CRP和CIC均升高 ,差异有显著性 ,C3无明显改变 ,而且UAP亚组CRP水平比SAP组SAP水平显著升高 (P <0 0 1)。在AMI亚组中 ,三项指标均高于对照组 ,其CRP和CIC水平比SAP亚组的浓度明显增高 (P <0 0 1) ,补体C3水平虽有升高 ,但与CHD其他各亚组比较无差异。CHD患者中CIC和C3增高水平与CRP呈正相关 (r =0 69,0 65 ,P <0 0 5 )。并发现血清CRP、CIC升高水平与冠状动脉狭窄程度呈正相关 (r =0 71,0 5 7,P <0 0 5 ) ,而血清C3浓度与冠脉狭窄程度无关 (r

应用单克隆抗体ELISA检测包虫病人循环免疫复合物的研究

应用抗包虫单克隆抗体F1建立了检测包虫病人循环免疫复合物和解离抗原的ELISA法。102例包虫病人中CIC阳性率为50％(51/102),其中手术前检出率为62.62％(33/53),手术后检出率为36.73％(18/49)。二者差异显著(P<0.005)。用PEG沉淀的免疫复合物经尿素解离后检测包虫抗原的阳性率为58.82％(60/102)。CIC与解离抗原二者累积阳性率达到86.27％(88/102)。表明在包虫病人中CIC的存在是普遍的。F1单克隆抗体ELISA法在检测包虫病人CIC和解离抗原上有极高的敏感性,因而证明F1单克隆抗体所识别的抗原表位是形成CIC的主要抗原成分。在IgG型CIC阳性的血清中解离抗原的检出率仅为48.1％(23/51)。可能是由于IgG抗体的高度亲和力,由其形成的CIC解离效率低。在IgG-CIC阴性血清中,检出解离抗原的阳性率高达72.5％(37/51),证明了在相当部分包虫病人血清中可能存在着IgE和IgM型CIC。解离抗原阳性率高表明这类CIC容易解离。在17例特异性IgG抗体阴性的包虫病人中CIC阳性者10例(58.82％),解离抗原阳性者9例(52.94％),二者累积阳性率为76.47％(13/17)。说明CIC与解离抗原的检测在IgG抗体阴性的包虫病人诊断上有实际意义。

影响包虫病人体液免疫应答相关因素的实验研究

本文报道了应用ELISA法对影响包虫病人体液免疫应答的相关因素进行的实验研究。结果表明，包虫在人体不同病理生理状态、不同寄生部位及血清循环免疫复合物的形成，均可影响抗E．g．特异抗体的免疫应答，表现为抗体反应性低及假阴性反应。对特异性抗E．g．抗体全部阴性包虫病人检测结果证实．确有包虫病患者血清内缺乏可测出的特异抗体，可能由于CIC的存在而造成血清中可检测的游离抗体耗竭。提示检测CIC有辅助和提高包虫病人免疫诊断的价值。

自身免疫性疾病患者红细胞免疫功能的变化

应用标准红细胞免疫粘附（RCIA）试验原理设计的酵母菌花环试验，分别测定了系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）及硬皮病（PSS）各20例患者的免疫功能，并与60例正常人检测结果相比较，结果显示，自身免疫性疾病患者红细胞免疫功能高于正常人（P＜0．01）。本文对红细胞免疫功能改变的机制进行了探讨，并对红细胞免疫功能与循环免疫复合物（CIC）及科体C3的关系亦进行了初步研究。

冠心病患者红细胞免疫粘附功能的观察

本文报道冠心病患者红细胞免疫粘附功能和循环免疫复合物测定结果。冠心病患者红细胞C_3b受体花环率(13.61±2.99%)明显低于正常对照(17.77±4.27%),P<0.01;而红细胞免疫复合物花环率(7.45±2.41%)高于正常对照组(5.33±1.07%),P<0.01。冠心病患者血清CIC含量明显高于正常人,P<0.01。本文对此结果的临床意义进行了讨论。

小细胞肺癌血清NSE、CIC、CEA检测的临床意义

对４８名肺癌病人治疗前的神经烯醇化酶（ＮＳＥ）、循环免疫复合物（ＣＩＣ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）分别进行了测定，并对部分小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）进行了治疗前后ＮＳＥ的动态观察。结果显示：ＮＳＥ对ＳＣＬＣ病人阳性诊断率为６６．７％，其中广泛期达８０％，而ＣＥＡ和ＣＩＣ对ＳＣＬＣ病人分别为１１．１％和４６．６％。ＳＣＬＣ与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、良性肺部疾病（ＢＰＤ）相比较，其血清ＮＳＥ显著升高（Ｐ＜０．０５）。对小细胞肺癌病人连续观察：化疗完全缓解及部分缓解者血清ＮＳＥ明显下降，而病情恶化或出现转移时，血清ＮＳＥ持续升高。血清ＮＳＥ作为诊断小细胞肺癌、预测疗效、判断复发具有一定的临床意义。

夹心酶联免疫吸附试验检测包虫病循环抗原

建立了检测包虫病循环抗原的夹心酶联免疫吸附试验。对１３０份阳性血清（猪６５，羊６５）作了检测，总阳性率为７９．２％，抗原最小检出量为５０μｇ／Ｌ。

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备抗ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。用ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。

吉兰—巴雷综合征患者脑脊液和血浆中BDV-CIC及抗体检测

目的对贵州省部分地区吉兰—巴雷综合征患者血浆外周血单核细胞和脑脊液同时进行检测,分析同组病人不同标本BDV循环免疫复合物(BDV-CIC)及抗体阳性率的差异,探讨博尔纳病病毒(BDV)感染与吉兰—巴雷综合征(GBS)的相关性,方法运用新型的三联酶联免疫吸附测定(ELISA)测BDV-CIC以及抗体的方法,检测9例GBS患者及93例健康对照组血浆以及45例对照组(非炎症性神经系统疾病患者)脑脊液(CSF)中BDV-CIC及抗体。结果9例GBS组血浆中有3例BDV-CIC为阳性,阳性率为33.3%,抗体阳性率11.11%(1/9),与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。9例GBS组患者脑脊液中有1例BDV-CIC为阳性,阳性率为11.1%(1/9),抗体阳性率为0;与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论贵州省部分地区GBS患者与BDV感染发生存在相关性;血浆中BDV-CIC检测阳性率高于脑脊液。

水貂循环免疫复合物检测方法的建立及应用

本试验建立了检测水貂循环免疫复合物(CIC)的微量PEG沉淀比浊法和固相C_(1q)—SPA—ELISA.用这两种方法检测了38例健康水貂血清、126例阿留申病(AD)病貂血清.微量PEG沉淀比浊法的结果(OD值,(?)±S)为:健康水貂0.081±0.042,AD病貂0.198±0.066;固相C_(1q)—SPA—ELISA的结果(OD值,(?)±S)为:健康水貂0.245±0.057,AD病貂0.503±0.167,敏感性为0.25μg/mL.经统计学处理,健康水貂与AD病貂血清OD值之间呈极显著差异(P<0.01),表明水貂阿留申病的病理过程与CTC有关.建立的两种方法均具有快速、简便、重复性好和敏感性高等特点,两种方法的相关性显著.