硫化氢对铁超载下大鼠肝星状细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨硫化氢(H2S)对铁超载下大鼠肝星状细胞(HSC-T6)氧化应激损伤的保护作用。方法:将HSC-T6分为4组,空白组、次氮基三乙酸铁(FeNTA)组、硫氢化钠(NaHS)组、格列苯脲(GLBN)组。铁超载法复制HSC-T6氧化应激损伤模型,按实验设计分别给予不同剂量NaHS和GLBN,检测24h和48h后上清液中SOD、GSH、TAOC、MDA、GSSG、.OH含量。结果:与FeNTA组比较,NaHS组SOD、GSH、TAOC随剂量呈不同程度的升高(P<0.05),MDA、GSSH、ROS则呈不同程度的降低(P<0.05);GLBN组SOD、GSH、TAOC随剂量有不同程度的降低(P<0.05),MDA、GSSG、ROS则有不同程度的升高(P<0.01)。结论:H2S对铁超载下大鼠HSC-T6具有抗氧化作用,其机制可能与KATP通道开放,降低钙超载有关。

硫化氢对大鼠肝星形细胞增殖和氧应激的影响

目的探讨H2S对大鼠肝星形细胞(HSC)增殖和氧应激的影响。方法用铁超载的方法复制HSC增殖模型,通过绘制生长曲线以及CCK-8细胞计数法检测不同浓度的H2S对500μmol/L次氮基三乙酸铁(FeNTA)作用下的HSC增殖的影响。通过不同浓度的H2S作用于500μmol/L FeNTA培养的HSC,检测6h、12h、24h细胞上清液和裂解液中H2S、SOD活力、MDA含量,观察H2S对HSC氧应激反应的影响。结果同对照组比较,一定浓度的H2S对HSC增殖有抑制作用。在FeNTA诱导的氧应激反应中,一定浓度范围的H2S可有效提高SOD的活性和降低MDA含量。结论H2S对HSC增殖有较强抑制作用,对FeNTA诱导的氧应激具有保护作用。

硫化氢对氧应激大鼠肝星形细胞的影响

目的探讨硫化氢(H2S)对大鼠肝星形细胞(HSC)增殖和氧应激的影响。方法用铁超载的方法复制肝纤维化的氧应激模型,给予外源性H2S供体硫氢化钠(NaHS)和炔丙基甘氨酸(PPG,H2S合成关键酶胱硫醚-γ-裂解酶CSE抑制剂),通过绘制生长曲线法和用CCK-8细胞计数法测定不同浓度H2S和PPG分别作用于500μmol/L次氮基三乙酸铁(FeNTA)培养下的HSC6、12、24 h细胞上清液和裂解液中H2S浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,通过检测HSC的增殖情况、CSEmRNA表达水平、H2S浓度和氧化抗氧化指标(MDA、SOD)来探讨H2S对HSC氧应激的影响。结果FeNTA所致的增殖HSC氧应激损伤明显增加,抗氧化能力减弱。同时,CSEmRNA表达水平低下,H2S产生减少。给予PPG后,HSC增殖显著且CSEmRNA表达受到抑制。内源性H2S随着严重的氧应激损伤进一步减少。给予NaHS后,HSC增殖减少,CSEmRNA表达和H2S产生显著增加以缓解氧应激损害和增强抗氧化能力。结论H2S对HSC增殖具有一定的抑制作用,对FeNTA诱导的氧应激具有保护作用。

硫化氢对氧应激下大鼠肝星状细胞的收缩和黏附作用

目的探讨硫化氢(H2S)含量的变化对氧应激下大鼠肝星状细胞(HSC)收缩和黏附作用影响。方法将HSC分为空白组(B组,HSC-T6);对照组(C组,HSC-T6+500μmol/L FeN-TA);NaHS组(N组,N1:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+100μmol/L NaHS;N2:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+200μmol/L NaHS;N3:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+300μmol/LNaHS;N4:HSC-T6 500μmol/L FeNTA+400μmol/LNaHS);GLBN组(G组,G1:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+200μmol/LGLBN;G2:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+400μmol/LGLBN)。应用500μmol/L次氮基三乙酸铁(FeNTA)制备氧应激模型。采用聚硅酮膜法直观检测氧应激模型大鼠肝星状细胞收缩情况、甲苯胺兰染色法测定细胞黏附率、Boyden Chamber小室法测定HSC跨膜迁移数量。给予不同浓度的外源性H2S供体NaHS和KATP通道阻断剂格列本脲(GLBN),在不同刺激条件下,观察上述指标。结果 HSC被NaHS处理后可见聚硅酮膜由于细胞收缩而引起明显皱纹,能够明显促进HSC收缩,而且随H2S浓度的升高和作用时间的延长,HSC收缩程度增强,这些作用能够被格列本脲阻止。加入200、400μmol/L H2S的HSC黏附抑制率分别为62.4%、81.7%,与对照组相比有显著差异;100、200、300、400μmol/L 4种不同浓度NaHS的HSC细胞迁移数量为6.43×103、8.85×103、11.34×103、14.86×103,与对照组(2.52×103)比较存在显著差异。结论 H2S在氧化应激下能促进HSC的收缩。H2S通过抑制细胞黏附、增加HSC跨膜迁移数量发挥细胞保护作用。