壳聚糖修饰的羟基磷灰石纳米粒载体介导BMP-2转染成骨细胞的研究

目的:研究壳聚糖(chitosan,CS)修饰的羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)纳米粒载体携带骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein2,BMP2)基因转染成骨细胞,及转染后对细胞增殖与分化的影响。方法:采用MTT法检测HA-CS纳米粒载体对成骨细胞的毒性反应;用HA-CS纳米粒载体转染技术,将BMP-2目的基因导入成骨细胞,评估转染效率;检测细胞增殖情况及碱性磷酸酶(alkaline phoaphatase,ALP)活性。结果:MTT结果提示HA-CS纳米粒混悬液浓度在500mg/L以下对成骨细胞无毒性作用;其转染效率优于没经修饰的HA;转染后促进成骨细胞增殖并增加了ALP活性。结论:HA-CS纳米粒在一定浓度下对成骨细胞无毒性作用,作为输送载体可以安全地将目的基因BMP-2导入成骨细胞,并促进了成骨细胞的增殖与分化。

壳聚糖修饰后的纳米羟基磷灰石作为BMP-2输送载体转染细胞的研究

目的:研究羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)纳米粒载体经壳聚糖(chitosan,CS)修饰后介导骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein2,BMP2)基因转染成骨细胞后的表达及表达产物对成骨细胞的影响。方法:用壳聚糖对羟基磷灰石纳米粒进行表面修饰;复苏成骨细胞株并进行传代培养,采用HA-CS纳米粒载体转染技术,将BMP-2目的基因导入成骨细胞,RT-PCR法鉴定BMP-2的整合和表达;检测细胞中碱性磷酸酶(alkaline phoaphatase,ALP)及骨钙素(osteocalcin,OCN)活性。结果:RT-PCR结果显示BMP-2基因在成骨细胞中稳定表达,而且表达产物增加了成骨细胞中碱性磷酸酶及骨钙素活性。结论:HA-CS纳米粒作为输送载体可以安全地将目的基因BMP-2导入成骨细胞中并稳定表达,同时增加了成骨细胞的生物学活性。