基于标准汤剂的地耳草配方颗粒质量标准研究

目的以地耳草标准汤剂为基础建立其配方颗粒的质量标准,为地耳草配方颗粒质量评价提供参考。方法采用高效液相色谱法测定饮片、标准汤剂及配方颗粒中槲皮苷、异槲皮苷的质量分数,计算2种成分转移率,并且采用高效液相色谱建立了标准汤剂及配方颗粒特征分析方法。结果15批标准汤剂样品中槲皮苷、异槲皮苷的质量分数为13.66~32.11 mg/g,4.00~16.81 mg/g,转移率为45.7%~63.5%,37.8%~56.9%,3批配方颗粒槲皮苷的质量分数为16.16、17.02、16.52 mg/g,转移率为55.2%、58.2%、55.3%,异槲皮苷的质量分数为7.61、7.93、7.56 mg/g,转移率为45.0%、48.8%、44.7%;各样品特征图谱与对照图谱的相似度均大于0.90,所建立的特征图谱标定共有峰7个,其中指认了4个,峰3为异槲皮苷、峰5为槲皮苷、峰6为白前苷B、峰7为槲皮素;聚为2类,2种主成分的累积方差贡献率达84.85%。结论所创建的质量分数测定及特征图谱HPLC方法的专属性强、重复性好、合理准确,得到的地耳草标准汤剂、配方颗粒一致性良好,可以对地耳草配方颗粒的质量进行控制和整体性评价提供参考。

田基黄提取物保肝作用的实验研究

目的：以D-半乳糖胺盐酸盐腹腔注射造成大鼠急性肝损伤模型,观察田基黄药材不同提取部位的肝保护作用。最终确定有效部位。方法：将SD大鼠给D-半乳糖胺盐酸盐造成急性肝损伤模型,腹腔注射田基黄不同溶剂的提取物,观察血清中的ALT、AST的变化,确定有效部位。结果：给予田基黄乙醇总提物和乙酸乙酯部位均可降低大鼠血清中的ALT、AST。结论：田基黄乙醇总提取物和乙酸乙酯部位具有明显的保肝作用。

微波消化火焰原子吸收分光光度法测定田基黄中重金属

采用微波消解田基黄样品,用火焰原子吸收分光光度法测定了5种重金属含量。结果表明,田基黄中锌、铜、铅、铬、镉含量依次为193.94,36.51,77.68,13.68,49.06μg/g,平均加标回收率分别为100.03%,101.02%,103.11%,101.06%,103.92%,RSD分别为0.89%,1.62%,4.01%,3.81%,4.27%。精密度和重复性实验的RSD为0.28%～2.68%和1.02%～3.8%。

田基黄对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影响

目的 :研究田基黄对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影响。方法 :将雄性重 2 0 0～ 2 5 0 g Wistar大鼠随机分成对照组与实验组 (每组 n =10 ) ,应用免疫学细胞技术 ,对大鼠呼吸道及全身免疫功能各项指标进行检测。结果 :田基黄能明显提高外周血中性粒细胞 (PMN)吞噬率 (75 .2± 3.9,83.5± 5 .1,P <0 .0 0 1)及 T淋巴细胞百分率 (6 4.8± 5 .4,72 .2± 3.1,P <0 .0 0 1) ;提高支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中 T淋巴细胞百分率 (6 0 .4± 6 .3,6 8.8± 6 .5 ,P <0 .0 1) ;对外周血白细胞移行抑制指数 (MI) (0 .45 5± 0 .15 6 ,0 .439± 0 .148,P >0 .0 5 )及肺泡巨噬细胞 (AM)吞噬率 (4 1.8± 5 .8,48.2± 9.5 ,P >0 .0 5 )无明显影响。结论 :田基黄能提高大鼠全身的特异性和非特异性细胞免疫功能 ;

田基黄体内抗甲3型流感病毒作用研究

目的:从体内抗病毒实验观察田基黄抗甲3型流感病毒作用。方法:以病毒滴鼻感染小鼠,观察田基黄对肺指数、病毒致小鼠死亡率的影响。结果:口服10 g/kg.d田基黄可明显抑制甲3型流感病毒引起的小鼠肺组织炎性实变,降低甲3型流感病毒感染小鼠的死亡率。结论:田基黄是一种治疗流行性感冒的有效药物。

田基黄石油醚提取物与5-Fu联用对HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的研究田基黄石油醚提取物与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联用对人肝癌HepG2细胞作用。方法用MTT法检测田基黄石油醚提取物和5-Fu单用和联用对HepG2细胞生长抑制的影响,用DAPI荧光染色法、Annexin-V/PI双染流式细胞术法和琼脂糖凝胶电泳法观察两药对HepG2细胞形态学,诱导凋亡和细胞DNA降解的影响。结果田基黄石油醚提取物及5-Fu均对HepG2细胞有生长抑制作用,且有协同增效作用;DAPI染色结果表明联合给药引起的细胞核凋亡现象较单独给药组更明显;Annexin-V/PI双染流式细胞术法和琼脂糖凝胶电泳法结果表明,联合给药诱导凋亡明显,有典型的凋亡"DNA梯形条带"。结论田基黄石油醚提取物与5-Fu联用后可提高HepG2细胞对5-Fu的敏感性,发挥促凋亡增效作用。

田基黄注射液对小鼠醋氨酚肝脏毒性的保护作用

醋氨酚中毒小鼠肝内 GSH 含量减少,微粒体 GST 活性降低,MDA、SGPT 和 SGST显著增加。小鼠 ip 田基黄8,15g/kg×10d,qd 后,使醋氨酚中毒小鼠 SGPT 和 SGST 活性恢复正常,肝内 GSH 含量明显升高,且呈剂量依赖性。上述剂量的田基黄对肝微粒体 GST 活性也具有保护作用。田基黄 15g/kg 可抑制醋氨酚中毒小鼠肝 MDA 的生成和 LTG 的形成。

田基黄的化学成分研究

目的:对田基黄的化学成分进行研究。方法:运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等手段进行分离,运用UV,IR,1H-NMR,13C-NMR,MS等波谱方法进行结构鉴定。结果:共分离鉴定了7个化合物,分别为β-谷甾醇(Ⅰ)、白桦酸(Ⅱ)、槲皮素(Ⅲ)、槲皮苷(Ⅳ)、咖啡酸十八烷酯(Ⅴ)、3,4-二羟基苯甲酸(Ⅵ)、(-)-表儿茶素(Ⅶ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅴ、Ⅶ为首次从该种植物中分离得到。

田基黄对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞生长抑制的体外实验

目的:观察田基黄对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞的生长抑制作用,为其临床应用提供理论依据。方法:将浓度为(0、25、100、400)mg/ml的田基黄与CNE-2细胞作用(24、48、72)h,用SRB法检测田基黄对CNE-2细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态学变化。结果:田基黄对CNE-2细胞的生长抑制率随药物浓度和作用时间的增加而增大。流式细胞仪分析显示田基黄将CNE-2细胞明显阻滞于S期。田基黄浓度为400mg/ml作用48小时,CNE-2细胞的凋亡率为13.12%,荧光显微镜下观察有凋亡细胞存在。结论:田基黄能够抑制人低分化鼻咽癌细胞株CNE-2细胞的增殖,能使CNE-2细胞阻滞于S期,可诱导CNE-2细胞发生一定程度的凋亡。

RP-HPLC法测定田基黄中异巴西红厚壳素的含量

目的:建立测定田基黄中异巴西红厚壳素含量的方法。方法:采用 RP-HPLC 法,色谱柱为 Diamonsil C_(18)(200 mm×4.6 mm,5 μm);以乙腈-甲醇-水-磷酸(45:15:50:0.05)为流动相;流速为1.0 mL·min^(-1);柱温为室温;检测波长为254 nm。结果:异巴西红厚壳素浓度在5.01～80.2 μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999(n=5);平均回收率为97.5%(n=9)。结论:本方法简便、快速、准确,可用于田基黄中异巴西红厚壳素的含量测定。

田基黄对人鼻咽癌细胞CNE-2生长和凋亡的影响

目的探讨田基黄对人鼻咽癌细胞CNE-2的抑制和凋亡作用,为其临床应用提供实验依据。方法SRB法检测田基黄对CNE-2细胞生长的抑制作用,PI分析细胞周期的变化、Annexin V检测细胞凋亡的发生。结果田基黄抑制CNE-2细胞的生长,引起细胞死亡;田基黄诱导CNE-2细胞发生凋亡和坏死;田基黄作用人鼻咽癌细胞后S期细胞的比例增加,G2/M期细胞的比例减少。结论一定浓度的田基黄可明显抑制人鼻咽癌细胞CNE-2生长,并诱导其凋亡,机制可能与阻滞细胞停留在S期有关。

田基黄对舌癌细胞株TSCCa裸鼠移植瘤抑制作用的研究

本研究的目的是探讨田基黄在裸小鼠体内的抑瘤作用。将体外培养的人舌鳞癌细胞株TSCCa接种于12只裸鼠皮下,建立移植瘤模型,观察田基黄和平阳霉素对TSCCa细胞移植瘤的抑瘤效果。结果田基黄和平阳霉素对TSCCa细胞移植瘤的抑制率分别为78.3％和81.7％,两者无显著性差异,提示田基黄对口腔鳞癌有较好的治疗作用。

鱼腥草等中草药对外周血中性粒细胞和单核细胞化学发光影响的研究

用化学发光法（Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ，ＣＬ）研究鱼腥草、田基黄和板兰根对外周血中性粒细胞和单核细胞化学发光的影响。结果发现鱼腥草可增加中性粒细胞的化学发光值，而对单核细胞无显著影响；田基黄和根兰根虽增加中性粒细胞的化学发光值，但无鱼腥草作用显著。结果表明鱼腥草可能参与调整中性粒细胞氧化过程（呼吸爆发）并增强中性粒细胞的杀菌能力。

田基黄提取物抑菌作用的研究

该实验以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、酿酒酵母菌、苏云金芽孢杆菌和变形杆菌为供试菌种,采用采用滤纸片扩散法对田基黄水提取液进行抑菌实验研究,并测定其最低抑菌浓度(MIC),其结果表明:田基黄水提取物对供试菌种普遍有抑制作用,黑曲霉除外;MIC也因菌种不同而不同,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和青黄链霉菌为0.25g/mL,酿酒酵母菌为0.5g/mL,苏云金芽孢杆菌和变形杆菌均为0.125g/mL.实验还采用不同有机溶剂的提取物对选取的五种供试菌种进行抑菌作用研究,其结果表明:田基黄有机溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、苏云金芽孢杆菌均有抑制作用,且抑菌效果均比水提取物的抑菌效果明显.

药用植物田基黄的组织培养与快速繁殖

以田基黄为材料,应用组织培养和快速繁殖技术,对适于活血丹增殖分化的培养基、培养方式进行了系统的研究。试验是以田基黄的茎尖为外植体,采用MS为基本培养基,附加不同植物生长调节剂进行试验;结果表明采用MS+6-BA3.0mg/L的培养基能成功地诱导愈伤组织的分化;MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L能成功地诱导芽的分化,对于芽增殖,以此培养基也比较好;诱导生根以1/2MS+NAA0.2mg/L培养基较好,培养20d后生根率可达90%以上。

田基黄提取物抗CCl_4诱导大鼠肝纤维化的作用及其机制研究

探讨田基黄提取物(HJT)抗四氯化碳(CCl_4)诱导的大鼠肝纤维化(HF)的作用及其机制。将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱(0. 12 mg/kg)组和HJT(16 000、8 000、4 000 mg/kg)剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射40%的CCl_4橄榄油溶液(1 mL/kg),2次/周,建立HF模型;同时各给药组灌胃相应剂量药物,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,连续6周。末次给药后,采用HE染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理学改变;生化法检测血清中ALT、AST活性;生化法检测肝组织中SOD、GSH-PX活性和MDA含量;ELISA法检测血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C含量;ELISA法检测肝组织IL-1β、IL-6和TNF-α的含量;Western blot法检测大鼠肝组织中TGF-β1和α-SMA表达水平。结果显示,HJT(16 000、8 000、4 000 mg/kg)剂量组和秋水仙碱组能显著降低HF大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C活性或含量,降低肝组织MDA含量,增加SOD和GSH-PX活性,同时减少肝组织IL-1β、IL-6及TNF-α含量,抑制肝组织TGF-β1和α-SMA蛋白表达;病理组织切片结果显示:HJT各剂量组和秋水仙碱组大鼠肝组织炎症坏死和HF病变程度明显减轻。本研究结果表明,HJT对CCl_4诱导的HF大鼠有显著保护作用,其机制可能与抗炎、抗氧化和抑制TGF-β1蛋白表达有关。

田基黄对防治内毒素血症性肝损伤的实验研究~

目的探讨田基黄对内毒素血症引起的肝损伤的防治作用。方法对Wister大鼠用不同剂量的田基黄水煎剂或联苯双酯进行灌胃,1次/d,连续7 d。于最后一次给药1小时后,空白组尾静脉注射生理盐水,其余各组尾静脉注射LPS 5 mg/kg。在用药24小时后下腔静脉采血做实验室指标检测,取肝组织做病理学检查。结果通过肝组织切片,LPS模型组可见脂肪变性,肝细胞灶性及带状坏死,肝窭结构破坏,汇管区炎细胞浸润。而田基黄组脂肪变性少见,偶有点状坏死,无明显炎细胞浸润。表明田基黄能减轻LPS导致肝组织病理损伤,同时抑制LPS引起的小鼠血清ALT活性的比高,抑制NO,TNF-α和IL-6的过量分泌。结论田基黄时内毒素引起的肝损伤有一定的防治作用。

田基黄抗痛风的实验研究

目的:研究田基黄抗痛风的作用。方法:观察田基黄提取物对尿酸(MSU)所致大鼠足爪肿胀的影响;对MSU诱导家兔急性关节炎的影响;对次黄嘌呤所致小鼠高尿酸血症的影响;对小鼠扭体反应的影响及小鼠耳廓肿胀法观察田基提取物品抗炎、镇痛作用。结果:田基黄对MSU所致大鼠足爪肿胀有较好的抑制作用,能减轻MSU所致家兔急性关节炎炎症,降低高尿酸血症模型小鼠血尿酸值,有一定的抗炎作用,但镇痛作用较弱。结论:田基黄具有抗痛风作用,值得进一步研究开发。

田基黄对人舌癌细胞株TSCCa细胞毒作用的研究

本实验采用体外细胞毒试验（MTT法）和电镜观察，研究了田基黄对人舌癌细胞株TSCCa的细胞毒作用。结果表明：田基黄对人舌癌细胞株TSCCa的生长有明显的抑制作用，其抑制率随浓度的增加而提高。电镜下见田基黄对癌细胞内线粒体和粗面内质网有损伤作用。结果提示中药田基黄对口腔鳞癌有较好的治疗作用。

田基黄总黄酮调节酒精性肝损伤小鼠肠道菌群及降低内毒素的研究

目的 使用中药田基黄调节酒精性肝病(ALD)小鼠的肠道菌群,降低小鼠血中内毒素(LPS)的含量,改善小鼠的肝脏功能,从而减少酒精对肝脏的损伤、降低ALD的发病率达到临床辅助治疗ALD的目的。方法 80只昆明小鼠(雌雄各半),体质量26~37 g。正常饲养1周后,随机选取20只小鼠作为正常组,剩余小鼠作为酒精模型组,模型组小鼠灌胃56°北京红星二锅头白酒0.3 mL,2次/d,连续灌胃45 d,末次小鼠灌胃白酒后,禁食12 h但不禁水,于第46天早上随机选取模型组与正常组小鼠各10只,采用眼球采血法取小鼠血液,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及血LPS水平来验证模型。造模成功后模型组余下50只小鼠随机分为自然恢复组、丽珠肠乐组以及田基黄总黄酮低、中、高剂量干预组(田基黄总黄酮剂量分别为10、20、40 mg/mL),每组10只。分别于造模成功第0天、灌药7 d后,于无菌条件下取小鼠粪便对小鼠粪便中的大肠埃希菌、肠球菌、双歧杆菌和乳杆菌进行平板培养并计数。先称量小鼠体质量,采血检测小鼠血清ALT、AST活性及血LPS水平;最后处死小鼠取其肝脏称重,计算肝体比。结果 造模成功后模型组小鼠血清ALT、AST活性以及血LPS水平、肝体比升高,肠道菌群失衡。田基黄总黄酮治疗7 d后小鼠血清ALT、AST活性以及血LPS水平、肝体比降低,肠道中大肠埃希菌、肠球菌数量显著减少和乳杆菌、双歧杆菌数量显著升高。结论 田基黄总黄酮可有效降低ALD小鼠血清转氨酶活性及血LPS水平,调节肠道菌群失衡,改善酒精引起的小鼠肝脏损伤,对酒精性肝损伤发挥了一定的治疗作用。